-
公开(公告)号：CN110423702B
公开(公告)日：2022-11-01
申请号：CN201910716851.9
申请日：2019-08-05
Applicant: 云南大学
Abstract: 本发明公开了高产孢量紫色紫孢菌基因工程菌ΔPlflbC及其构建方法与应用，属生物农药技术领域。本发明基因工程菌ΔPlflbC为敲除紫色紫孢菌的PlflbC基因；基因工程菌的保藏编号为CCTCC M 2019348，PlflbC基因的序列如SEQ ID NO.1所示，PlflbC氨基酸的序列如SEQ ID NO.2所示。本发明利用OSCAR方法构建PlflbC基因敲除载体；将供体质粒pA‑sur(氯密磺隆抗性基因)‑OSCAR、受体pPK2‑OSCAR‑GFP、PflbC基因5’端同源重组片段和3’端同源重组片段进行Gateway BP反应得到PlflbC基因敲除载体；将PlflbC基因敲除载体转入农杆菌中得到含PlflbC基因敲除载体的农杆菌；将含PlflbC基因敲除载体的农杆菌转化紫色紫孢菌；筛选flbC转化子，并依次采用验证引物对引物flbC验证5/flbC验证3和随机引物对随机插入验证5/随机插入验证3进行验证，即得高产孢量紫色紫孢菌的基因工程菌ΔPlflbC。
-
公开(公告)号：CN104293677A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201410138594.2
申请日：2014-04-08
Applicant: 云南大学
Abstract: 本发明涉及一种具有杀线虫功能的食线虫真菌寡孢节丛孢基因工程菌株及其应用，属生物农药技术领域。本发明的生产菌株为：寡孢节丛孢基因工程菌株（Arthrobotrys oligosporaΔMad1），保藏号为CCTCC M 2013439。寡孢节丛孢基因工程菌株在制备用于防治线虫制剂中的应用。本发明的有益效果在于：1、寡孢节丛孢基因工程菌株与出发菌株具有相同的生长速率和形态。其与野生菌株的不同之处在于当其培养在在含有0.1%-0.5%的硝酸钠或者0.1%-0.%的尿素或者0.1%-0.5%的酵母提取物的水琼脂培养基上时会产生比出发菌株提高2倍以上的粘性三维菌网。2、当菌株培养在固体CMA培养基上时，其捕捉线虫的能力提高5倍以上，24小时线虫捕捉率达95%以上，能够在制备杀线虫制剂中应用。
-
公开(公告)号：CN101724569A
公开(公告)日：2010-06-09
申请号：CN200910218312.9
申请日：2009-12-09
Applicant: 云南大学
Abstract: 本发明涉及一种诱导捕食线虫真菌同步产生捕食器官的方法，属于应用微生物学领域。本发明方法包括线虫培养、线虫提取物制备，捕食线虫真菌培养和捕食器官诱导步骤。本发明通过培养线虫(秀丽隐杆线虫Caenorhabditis elegans)，利用超声波破碎和离心制备线虫提取物，利用线虫提取物诱导捕食线虫真菌同步产生大量捕食器官(106捕食器官/mg菌丝)。本发明操作简单易行，重复性好，可以获得大量同步的三维菌网，为进一步研究捕食线虫真菌捕食器官形成的分子机制提供了良好的实验材料。
-
公开(公告)号：CN1837353A
公开(公告)日：2006-09-27
申请号：CN200610010850.5
申请日：2006-04-26
Applicant: 云南大学
Abstract: 本发明涉及一种具有杀线虫功能的异形隔指孢菌剂及应用，属微生物农药技术领域。本发明的生产菌株为：Dactylell avarietas YMF1.00118，采用常规方法制备，其中液体发酵培养基配方为：0.1％葡萄糖，0.1％硫酸铵，0.05％硫酸镁，0.001％硫酸亚铁，1000ml土豆汁，pH 6.5。从液体发酵产物中提取杀线虫有效成分的方法是，将发酵培养物进行过滤处理，上清液用硫酸铵进行浓缩处理即可做为杀线虫的药液。本发明菌株通过液体发酵后，从代谢产物中提取杀线虫有效成分，制备为生物杀线剂。本发明产品对全齿复活线虫和秀丽隐杆线虫具有毒力高的突出优点，具有较好的潜在应用前景。
-
公开(公告)号：CN118726115A
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202410555414.4
申请日：2024-05-07
Applicant: 云南大学
IPC: C12N1/15 , C12N15/80 , C12N15/90 , C12N15/65 , C12N15/31 , C12Q1/6895 , C12N15/11 , A01N63/30 , A01P5/00 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了高杀线虫活性紫色紫孢菌工程菌ΔPlGyp1及其构建方法和应用，属于生物农药技术领域。本发明工程菌ΔPlGyp1为敲除紫色紫孢菌的PlGyp1基因后获得；工程菌的保藏编号为CGMCC No.41039，PlGyp1基因的序列如SEQ ID NO.1所示，PlGyp1氨基酸的序列如SEQ ID NO.2所示。本发明利用同源重组方法构建PlGyp1基因敲除载体；将供体质粒pPK2‑sur(氯密磺隆抗性基因)‑GFP、限制性内切酶XbaⅠ和BglⅡ和PlGyp1基因5’端同源重组片段及限制性内切酶BssHⅡ和3’端同源重组片段进行Infusion克隆反应得到PlGyp1基因敲除载体；将PlGyp1基因敲除载体转入农杆菌中得到含PlGyp1基因敲除载体的农杆菌；将含PlGyp1基因敲除载体的农杆菌转化紫色紫孢菌；筛选Gyp1转化子，并依次采用验证引物对Y5’F/Y5’R、Y3’F/Y3’R、Gyp1‑F/Gyp1‑R和sur‑F/sur‑R进行验证，即得高产孢量紫色紫孢菌的工程菌ΔPlGyp1。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110982715B
公开(公告)日：2022-11-01
申请号：CN201910716588.3
申请日：2019-08-05
Applicant: 云南大学
Abstract: 本发明公开了高产孢量紫色紫孢菌基因工程菌ΔPlflbD及其构建方法与应用，属生物农药技术领域。本发明基因工程菌ΔPlflbD为敲除紫色紫孢菌的PlflbD基因；基因工程菌的保藏编号为CCTCC M 2019347，PlflbD基因的序列如SEQ ID NO.1所示，PlflbD氨基酸的序列如SEQ ID NO.2所示。本发明构建PlflbD基因敲除载体；将供体质粒、受体、PflbD基因5’端同源重组片段和3’端同源重组片段进行Gateway BP反应得到PlflbD基因敲除载体；将PlflbD基因敲除载体转入农杆菌中；再将农杆菌转化紫色紫孢菌；筛选flbD转化子，并依次采用验证引物对引物flbD验证5/flbD验证3和随机引物对随机插入验证5/随机插入验证3进行验证，即得高产孢量紫色紫孢菌的基因工程菌ΔPlflbD。
-
公开(公告)号：CN104293677B
公开(公告)日：2016-09-21
申请号：CN201410138594.2
申请日：2014-04-08
Applicant: 云南大学
Abstract: 本发明涉及一种具有杀线虫功能的食线虫真菌寡孢节丛孢基因工程菌株及其应用，属生物农药技术领域。本发明的生产菌株为：寡孢节丛孢基因工程菌株（Arthrobotrys oligosporaΔMad1），保藏号为CCTCC M2013439。寡孢节丛孢基因工程菌株在制备用于防治线虫制剂中的应用。本发明的有益效果在于：1、寡孢节丛孢基因工程菌株与出发菌株具有相同的生长速率和形态。其与野生菌株的不同之处在于当其培养在含有0.1%‑0.5%的硝酸钠或者0.1%‑0.%的尿素或者0.1%‑0.5%的酵母提取物的水琼脂培养基上时会产生比出发菌株提高2倍以上的粘性三维菌网。2、当菌株培养在固体CMA培养基上时，其捕捉线虫的能力提高5倍以上，24小时线虫捕捉率达95%以上，能够在制备杀线虫制剂中应用。
-
公开(公告)号：CN104651241B
公开(公告)日：2017-10-10
申请号：CN201510129251.4
申请日：2015-03-24
Applicant: 云南大学
Abstract: 本发明涉及一种提高捕食线虫真菌寡孢节丛孢产生捕食器官的方法，属于应用微生物学领域。本发明通过在寡孢节丛孢孢子悬液中加入硝酸钠，寡孢节丛孢孢子悬液中至终浓度20mM，以此来提高寡孢节丛孢捕食器官数量和杀线虫能力。本发明的有益效果在于：在寡孢节丛孢孢子悬液中加入NaNO3后，寡孢节丛孢产生大量捕食器官，杀线虫能力显著提高，在加入线虫12h时，线虫死亡率达到了85.88％；在加入线虫24h时，添加硝酸钠的比不添加的平板上产生的捕食器官数量多了5倍以上，线虫死亡率达到了99.80％。
-
公开(公告)号：CN104651241A
公开(公告)日：2015-05-27
申请号：CN201510129251.4
申请日：2015-03-24
Applicant: 云南大学
Abstract: 本发明涉及一种提高捕食线虫真菌寡孢节丛孢产生捕食器官的方法，属于应用微生物学领域。本发明通过在寡孢节丛孢孢子悬液中加入硝酸钠，寡孢节丛孢孢子悬液中至终浓度20mM，以此来提高寡孢节丛孢捕食器官数量和杀线虫能力。本发明的有益效果在于：在寡孢节丛孢孢子悬液中加入NaNO3后，寡孢节丛孢产生大量捕食器官，杀线虫能力显著提高，在加入线虫12h时，线虫死亡率达到了85.88％；在加入线虫24h时，添加硝酸钠的比不添加的平板上产生的捕食器官数量多了5倍以上，线虫死亡率达到了99.80％。
-
公开(公告)号：CN101724569B
公开(公告)日：2011-12-21
申请号：CN200910218312.9
申请日：2009-12-09
Applicant: 云南大学
Abstract: 本发明涉及一种诱导捕食线虫真菌同步产生捕食器官的方法，属于应用微生物学领域。本发明方法包括线虫培养、线虫提取物制备，捕食线虫真菌培养和捕食器官诱导步骤。本发明通过培养线虫(秀丽隐杆线虫Caenorhabditis elegans)，利用超声波破碎和离心制备线虫提取物，利用线虫提取物诱导捕食线虫真菌同步产生大量捕食器官(106捕食器官/mg菌丝)。本发明操作简单易行，重复性好，可以获得大量同步的三维菌网，为进一步研究捕食线虫真菌捕食器官形成的分子机制提供了良好的实验材料。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
16
records
(took 0.017 seconds)
