一种穿刺组织的消化处理方案

    公开(公告)号:CN116814523A

    公开(公告)日:2023-09-29

    申请号:CN202310979254.1

    申请日:2023-08-05

    摘要: 本发明公开了一种穿刺组织的消化处理方案,包括组织的分离和悬浮、组织的酶消化、消化液的过滤和初步离心、去除红细胞、再次离心、清洗细胞团、丢弃上清和重复清洗和鉴定,本发明通过各种消化酶的组合方案,处理成可以达到单细胞文库上机标准的单细胞悬液,高效的单细胞分离、高纯度的细胞悬液、保留细胞活性以及低样本消耗,有效从有限的穿刺样品中分离出足够数量的单个细胞或小块细胞团,满足下游应用需求,温和的分离条件和多重清洗,可以最大限度保留细胞的活性,并且通过分离设备,有效分离消化液中的小块细胞团,同时最大限度保留细胞的活性,并去除多余的基质,获得高纯度准备用于下游应用的细胞悬液和油包细胞。

    一种穿刺组织的消化处理方案

    公开(公告)号:CN116814523B

    公开(公告)日:2024-04-09

    申请号:CN202310979254.1

    申请日:2023-08-05

    摘要: 本发明公开了一种穿刺组织的消化处理方案,包括组织的分离和悬浮、组织的酶消化、消化液的过滤和初步离心、去除红细胞、再次离心、清洗细胞团、丢弃上清和重复清洗和鉴定,本发明通过各种消化酶的组合方案,处理成可以达到单细胞文库上机标准的单细胞悬液,高效的单细胞分离、高纯度的细胞悬液、保留细胞活性以及低样本消耗,有效从有限的穿刺样品中分离出足够数量的单个细胞或小块细胞团,满足下游应用需求,温和的分离条件和多重清洗,可以最大限度保留细胞的活性,并且通过分离设备,有效分离消化液中的小块细胞团,同时最大限度保留细胞的活性,并去除多余的基质,获得高纯度准备用于下游应用的细胞悬液和油包细胞。

    一种多样品混合的单细胞建库方法

    公开(公告)号:CN117661123A

    公开(公告)日:2024-03-08

    申请号:CN202311638029.8

    申请日:2023-12-02

    摘要: 本申请涉及生物信息学技术领域,公开了一种多样品混合的单细胞建库方法,将每个样品的基因组DNA进行打断,获取集中带分布在500bp的DNA片段;对获取到的DNA片段加入与黏性末端结合的黏性引物,加入末端补平试剂进行混合反应;根据DNA片段设计初始引物,将若干个标签分别与设计得到的初始引物进行连接,得到融合引物;采用A接头将第一融合引物与DNA片段的首端进行连接,采用P接头将第二融合引物与DNA片段的末端进行连接;磁珠纯化;对首尾各具有不同融合引物的DNA片段进行PCR扩增;定量、混样后,进行琼脂糖凝胶分离纯化得到单细胞测序文。本申请,有利于降低成本,具有较高的可靠性。