基于级联DNA链置换反应的微小核糖核酸检测方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN113293199B

    公开(公告)日:2023-07-04

    申请号:CN202110712732.3

    申请日:2021-06-25

    Inventor: 缪鹏 陈锡峰

    Abstract: 本发明公开了一种基于级联DNA链置换反应的微小核糖核酸检测方法及试剂盒,该方法包括:1)设计DNA探针组合物:探针A、探针B、探针C、探针D和探针E;2)通过DNA探针组合物与需检测miRNA浓度的样品反应,然后检测反应后体系的电化学信号,计算出样品中的目标miRNA的浓度。本发明的基于级联DNA链置换反应的微小核糖核酸检测方法,通过针对目标miRNA设计DNA探针组合物:探针A、探针B、探针C、探针D和探针E;利用级联链置换聚合反应可以极大地提高信号放大效率,实现对目标miRNA浓度的高灵敏检测;同时本发明的方法简单、快速,具有很好的推广应用前景。

    痕量微小核糖核酸的电化学检测方法

    公开(公告)号:CN113495091B

    公开(公告)日:2024-01-23

    申请号:CN202110590940.0

    申请日:2021-05-28

    Inventor: 缪鹏 柴华

    Abstract: 本发明公开了一种痕量微小核糖核酸的电化学检测方法,包括以下步骤:1)在电极表面修饰Probe A;2)将电极置于样品中;3)向步骤2)的样品中再加入Probe B和Probe C;4)将电极浸泡到表面修饰有DNA探针Probe D的金纳米颗粒溶液中;5)对电极进行电化学分析,通过电化学信号计算出样品中的待检测的miRNA的浓度。本发明利用目标miRNA在电极界面诱导的茎环结构DNA开环,释放杂交链式反应的触发链,实现电极表面的原位DNA纳米结构生长,同时在产物侧链捕获修饰有互补DNA序列的金纳米颗粒,最终通过检测纳米颗粒表面DNA末端修饰的电信号分子,能实现对靶miRNA浓度的高灵敏检测。

    痕量微小核糖核酸的电化学检测方法

    公开(公告)号:CN113495091A

    公开(公告)日:2021-10-12

    申请号:CN202110590940.0

    申请日:2021-05-28

    Inventor: 缪鹏 柴华

    Abstract: 本发明公开了一种痕量微小核糖核酸的电化学检测方法,包括以下步骤:1)在电极表面修饰Probe A;2)将电极置于样品中;3)向步骤2)的样品中再加入Probe B和Probe C;4)将电极浸泡到表面修饰有DNA探针Probe D的金纳米颗粒溶液中;5)对电极进行电化学分析,通过电化学信号计算出样品中的待检测的miRNA的浓度。本发明利用目标miRNA在电极界面诱导的茎环结构DNA开环,释放杂交链式反应的触发链,实现电极表面的原位DNA纳米结构生长,同时在产物侧链捕获修饰有互补DNA序列的金纳米颗粒,最终通过检测纳米颗粒表面DNA末端修饰的电信号分子,能实现对靶miRNA浓度的高灵敏检测。

    基于级联DNA链置换反应的微小核糖核酸检测方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN113293199A

    公开(公告)日:2021-08-24

    申请号:CN202110712732.3

    申请日:2021-06-25

    Inventor: 缪鹏 陈锡峰

    Abstract: 本发明公开了一种基于级联DNA链置换反应的微小核糖核酸检测方法及试剂盒,该方法包括:1)设计DNA探针组合物:探针A、探针B、探针C、探针D和探针E;2)通过DNA探针组合物与需检测miRNA浓度的样品反应,然后检测反应后体系的电化学信号,计算出样品中的目标miRNA的浓度。本发明的基于级联DNA链置换反应的微小核糖核酸检测方法,通过针对目标miRNA设计DNA探针组合物:探针A、探针B、探针C、探针D和探针E;利用级联链置换聚合反应可以极大地提高信号放大效率,实现对目标miRNA浓度的高灵敏检测;同时本发明的方法简单、快速,具有很好的推广应用前景。

    基于DNA四面体链置换反应的端粒酶检测组合物、试剂盒及系统

    公开(公告)号:CN119391829A

    公开(公告)日:2025-02-07

    申请号:CN202510008281.3

    申请日:2025-01-03

    Inventor: 陈锡峰 缪鹏

    Abstract: 本发明公开了一种基于DNA四面体链置换反应的端粒酶检测组合物、试剂盒及系统,该组合物包括:用于组装成三维DNA四面体的四条单链序列探针T1、T2、T3、T4,所述三维DNA四面体的顶部具有悬垂序列P0;均包含P0的部分互补序列的探针P1和P2;探针P3,其5’端标记有亚甲基蓝;以及链置换反应引物。本发明除具有较高的灵敏度外,还具有良好的选择性,可通过端粒酶活性对多种细胞进行区分;同时,本发明还具备筛选端粒酶抑制剂的能力;与常规检测方案相比,本发明不需要任何其他酶,只需要等温一锅法反应,可以避免复杂的操作和昂贵的试剂,因此,本发明对于端粒酶相关疾病的早期诊断和药物研发具有巨大的潜在实用价值。

    基于环状双足DNA步行策略的核酸检测方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN114410750B

    公开(公告)日:2024-10-15

    申请号:CN202210073540.7

    申请日:2022-01-21

    Inventor: 缪鹏 柴华

    Abstract: 本发明公开了一种基于环状双足DNA步行策略的核酸检测方法及试剂盒,该试剂盒包括Probe A、Probe B、Probe D、Probe E、聚合酶、切刻内切酶、辅酶因子、Tris‑HCl、EDTA、TCEP、NaCl、巯基己醇、磷酸缓冲液、dNTPs以及NEB buffer 2.1。本发明提供的基于环状双足DNA步行策略的核酸检测方法及试剂盒,构建了可再生的DNA修饰金电极界面,通过茎环结构与哑铃结构DNA在目标核酸与相关酶催化反应下构建的环状DNA结构,能进行电极界面的双足步行反应,可实现目标核酸的超灵敏定量分析,检测限能够达到2.2aM,且具有高选择性特点,能很好的应用于核酸分析检测。

    细胞培养系统
    7.
    发明公开
    细胞培养系统 审中-实审

    公开(公告)号:CN118562616A

    公开(公告)日:2024-08-30

    申请号:CN202410926198.X

    申请日:2024-07-11

    Abstract: 本发明涉及生物制药技术领域,公开了一种细胞培养系统,该系统包括:细胞培养组件、液路控制组件和控制装置;液路控制组件包括液路层和气路层,液路层包括多个液体入口流道、主流道和多个液体出口流道,至少部分液体出口流道与细胞培养腔连通,气路层包括多个气路通道;液体入口流道的底部包括与对应的气路通道连通的第一通孔,第一通孔被弹性薄膜密封;液体出口流道的底部包括与对应的气路通道连通的第二通孔,第二通孔被弹性薄膜密封;控制装置用于控制气路通道中的气体填充和排放,以控制液体入口流道和/或液体出口流道的通断。本发明精确调控各类液体试剂的输运时序和剂量的气动薄膜微阀的结构简单、体积小,方便集成。

    一种基于质量编码的核酸检测试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN116751844A

    公开(公告)日:2023-09-15

    申请号:CN202310692357.X

    申请日:2023-06-13

    Abstract: 本发明涉及一种基于质量编码的核酸检测试剂盒及其应用,属于生物检测技术领域。本发明提供了一种核酸检测试剂盒,包括至少两种检测试剂以及双链特异性核酸酶,检测试剂包括修饰有检测探针的磁性纳米颗粒,检测探针包括互补片段以及质量标签,每种检测试剂的互补片段能够与不同靶标核酸特异性结合,使得检测探针与靶标核酸形成杂合体,质量标签为特定长度的单链核酸片段,每种检测试剂的质量标签长度不同,使得杂合体被双链特异性核酸酶识别并降解后,能够释放靶标核酸并产生不同长度的单链核酸片段。此核酸检测试剂盒基于双链特异性核酸酶介导的信号放大策略,联合磁性纳米颗粒进行质量编码标签的生成,通过质谱进行高灵敏多重核酸定量检测。

    基于环状双足DNA步行策略的核酸检测方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN114410750A

    公开(公告)日:2022-04-29

    申请号:CN202210073540.7

    申请日:2022-01-21

    Inventor: 缪鹏 柴华

    Abstract: 本发明公开了一种基于环状双足DNA步行策略的核酸检测方法及试剂盒,该试剂盒包括Probe A、Probe B、Probe D、Probe E、聚合酶、切刻内切酶、辅酶因子、Tris‑HCl、EDTA、TCEP、NaCl、巯基己醇、磷酸缓冲液、dNTPs以及NEB buffer 2.1。本发明提供的基于环状双足DNA步行策略的核酸检测方法及试剂盒,构建了可再生的DNA修饰金电极界面,通过茎环结构与哑铃结构DNA在目标核酸与相关酶催化反应下构建的环状DNA结构,能进行电极界面的双足步行反应,可实现目标核酸的超灵敏定量分析,检测限能够达到2.2aM,且具有高选择性特点,能很好的应用于核酸分析检测。

    T4多聚核苷酸激酶的定量检测方法

    公开(公告)号:CN110487867B

    公开(公告)日:2022-03-08

    申请号:CN201910620789.3

    申请日:2019-07-10

    Abstract: 本发明公开了一种T4多聚核苷酸激酶的定量检测方法,包括步骤:首先设计巯基化单链DNA探针a、探针b和5’端修饰氨基的探针c,探针a通过金‑巯键固定于金电极表面;探针a 5’端的羟基可被T4多聚核苷酸激酶催化磷酸化,DNA探针a接着与探针b、探针c杂交,探针c的3’端与探针a的5’端的磷酸基团在T4 DNA连接酶作用下发生连接反应;再进行加热变性处理,探针c仍然保留在电极表面,探针c末端的氨基可进一步捕获银纳米颗粒,最后通过检测银纳米颗粒的溶出伏安信号得到T4多聚核苷酸激酶的定量检测结果。本发明具有灵敏度高,选择性好,快速以及成本低的特点,检测限为0.01U/mL。

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