公开(公告)号：CN109897887A

公开(公告)日：2019-06-18

申请号：CN201910006456.1

申请日：2019-01-04

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 缪鹏 ,  孟凡渝 ,  陈锡峰 ,  马筱一 ,  梅茜

IPC: C12Q1/6818 ,  C12Q1/48

Abstract: 本发明公开了一种基于FRET的端粒酶活性检测方法，包括以下步骤：首先设计荧光修饰的Flare DNA；再利用四个单链DNA:S1、S2、S3、S4，构建出DNA四面体结构；然后将DNA四面体与Flare DNA进行杂交，获得荧光DNA纳米探针；再将荧光DNA纳米探针与端粒酶混合反应，获取混合物的荧光光谱。本发明设计的基于FRET的荧光探针，可提供精确的检测结果，避免了假阳性信号的产生并使生物成像中系统波动的影响最小化。另一方面，三维(3D)DNA纳米结构具有优异的生物相容性和纳米级可控性，可以通过快速内吞途径进入细胞内，并保持细胞基本的完整性和稳定性，经过合理组装后可应用于生物传感和生物成像。

公开(公告)号：CN109797200A

公开(公告)日：2019-05-24

申请号：CN201910112888.0

申请日：2019-02-13

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 陈锡峰 ,  孟凡渝 ,  杨大威 ,  马筱一 ,  缪鹏

IPC: C12Q1/6825 ,  C12Q1/48

Abstract: 本发明公开了一种比率型端粒酶活性定量检测方法，该方法为：首先，在发夹DNA探针5’末端标记亚甲基蓝、在3’末端标记巯基，再通过金-巯键自组装在金电极表面；然后将5’端标记有二茂铁的TS引物与金电极表面的发夹DNA探针杂交，将得到的修饰有发夹DNA探针的金电极用于端粒酶检测。本发明是同时利用两个电化学探针进行端粒酶活性检测，构建出一种新型的比率型电化学生物传感器，显著提高了检测灵敏度，并克服了现有技术重复性差、稳定性差等存在的问题；本发明通过端粒酶催化产生的重复序列与探针序列互补，增强了检测特异性；本发明的方法简便易行，具有灵敏度高、快速准确、成本低的特点。

公开(公告)号：CN109897887B

公开(公告)日：2023-03-14

申请号：CN201910006456.1

申请日：2019-01-04

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 缪鹏 ,  孟凡渝 ,  陈锡峰 ,  马筱一 ,  梅茜

IPC: C12Q1/6818 ,  C12Q1/48

Abstract: 本发明公开了一种基于FRET的端粒酶活性检测方法，包括以下步骤：首先设计荧光修饰的Flare DNA；再利用四个单链DNA:S1、S2、S3、S4，构建出DNA四面体结构；然后将DNA四面体与Flare DNA进行杂交，获得荧光DNA纳米探针；再将荧光DNA纳米探针与端粒酶混合反应，获取混合物的荧光光谱。本发明设计的基于FRET的荧光探针，可提供精确的检测结果，避免了假阳性信号的产生并使生物成像中系统波动的影响最小化。另一方面，三维(3D)DNA纳米结构具有优异的生物相容性和纳米级可控性，可以通过快速内吞途径进入细胞内，并保持细胞基本的完整性和稳定性，经过合理组装后可应用于生物传感和生物成像。

公开(公告)号：CN109797200B

公开(公告)日：2022-07-19

申请号：CN201910112888.0

申请日：2019-02-13

Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所

Inventor： 陈锡峰 ,  孟凡渝 ,  杨大威 ,  马筱一 ,  缪鹏

IPC: C12Q1/6825 ,  C12Q1/48

Abstract: 本发明公开了一种比率型端粒酶活性定量检测方法，该方法为：首先，在发夹DNA探针5’末端标记亚甲基蓝、在3’末端标记巯基，再通过金‑巯键自组装在金电极表面；然后将5’端标记有二茂铁的TS引物与金电极表面的发夹DNA探针杂交，将得到的修饰有发夹DNA探针的金电极用于端粒酶检测。本发明是同时利用两个电化学探针进行端粒酶活性检测，构建出一种新型的比率型电化学生物传感器，显著提高了检测灵敏度，并克服了现有技术重复性差、稳定性差等存在的问题；本发明通过端粒酶催化产生的重复序列与探针序列互补，增强了检测特异性；本发明的方法简便易行，具有灵敏度高、快速准确、成本低的特点。