AAVS1位点定点整合外源基因的人iPS细胞的构建方法

    公开(公告)号:CN107937441B

    公开(公告)日:2021-02-26

    申请号:CN201711123952.2

    申请日:2017-11-14

    Abstract: 本发明提供了一种AAVS1位点定点整合外源基因的人iPS细胞的构建方法,其包括:构建含有外源基因的第一重组质粒,并将其包装得到第一rAAV;构建含有AAV Rep78的第二重组质粒,并将其包装得到第二rAAV;第一rAAV和第二rAAV共同转导人成体细胞,将外源基因定点整合于人成体细胞19号染色体的AAVS1位点。采用本发明技术手段得到的基因工程化人成体细胞株能够稳定表达外源基因,将得到的基因工程化人成体细胞株在体外诱导成多能干细胞,能保持干细胞的多能性及分化潜能,并且稳定表达外源基因。本发明可用于赋予细胞新的功能,或用于纠正/补偿由于基因异常/缺陷所引起的疾病,或为干细胞基因治疗提供一种可行的方法。

    一种EGFR靶向性的嵌合抗原受体、CAR-NK细胞及其制备方法、应用

    公开(公告)号:CN111138548A

    公开(公告)日:2020-05-12

    申请号:CN201911158758.7

    申请日:2019-11-22

    Abstract: 本发明提供一种EGFR靶向性的嵌合抗原受体,EGFR靶向性的嵌合抗原受体包括抗EGFR抗体的抗原结合域,抗EGFR抗体的抗原结合域表达为EGFRscFv,EGFRscFv的核酸序列为SEQ ID NO:2。本发明还提供了CAR-NK细胞及其制备方法,使NK细胞表达EGFR靶向性的嵌合抗原受体的EGFRscFv,得EGFR靶向性的CAR-NK细胞。本发明还提供一种组合物、抗癌剂、应用。本发明提供的EGFR靶向性的CAR-NK细胞对三阴性乳腺癌EGFR靶点具有特异识别性,靶向杀伤EGFR阳性三阴性乳腺癌癌细胞并促进细胞因子的释放。CAR-NK细胞作为效应细胞识别肿瘤时,不需要自身白细胞抗原与肿瘤匹配,不会产生移植物抗宿主反应。CAR-NK疗法不会引发细胞因子风暴,更安全。CAR-NK细胞来源广泛,如外周血单个核细胞、诱导多能干细胞、脐带血、人类胚胎干细胞和NK-92细胞系。

    低毒、高细胞摄取率的细胞示踪剂、其制备方法及应用

    公开(公告)号:CN112107698A

    公开(公告)日:2020-12-22

    申请号:CN202011032195.X

    申请日:2020-09-27

    Abstract: 本发明公开了一种低毒、高细胞摄取率的细胞示踪剂、其制备方法及应用,该细胞示踪剂为PAA和PEG包覆的超小超顺磁氧化铁纳米颗粒,该细胞示踪剂通过热分解法合成超小超顺磁氧化铁纳米颗粒后,再依次包覆PAA和PEG得到。本发明的低毒、高细胞摄取率的细胞示踪剂,使用PAA和PEG包覆超小超顺磁氧化铁纳米颗粒得到,其可作为细胞示踪剂应用在核磁共振成像中;本发明的细胞示踪剂能够实现无转染试剂使用下对于人脂肪间充质干细胞的高效标记,并且对于人脂肪间充质干细胞和诱导多能干细胞没有明显的毒性,可用于实现对于移植入大鼠脑内的人脐带间充质干细胞的示踪。

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