公开(公告)号：CN104928351B

公开(公告)日：2018-04-17

申请号：CN201410102734.0

申请日：2014-03-19

Applicant: 中国科学院生态环境研究中心

Inventor： 汪海林 ,  赵超 ,  赵柏林 ,  李翠平

IPC: C12Q1/6858

Abstract: 本发明为一种非疾病诊断用途的基于硼酸介导的聚合酶链反应检测DNA中5‑羟甲基胞嘧啶的生化分析方法。本发明结合葡萄糖基化反应，利用硼酸及其衍生物试剂可与葡萄糖基化5‑羟甲基胞嘧啶中的邻二醇发生的共价作用，显著增加被复制碱基单元的体积，有效抑制聚合酶扩增反应的特点，提出硼酸介导的DNA聚合酶链扩增反应，可特异性地识别特定基因/片段中的5‑羟甲基胞嘧啶。本发明涉及的方法不受酶切位点限制，可适用于各种生物样品DNA序列中5‑羟甲基胞嘧啶的生化分析鉴定。本方法具有广阔的应用前景，对于进一步阐明5‑羟甲基胞嘧啶的生物学功能具有重要意义。

公开(公告)号：CN104928351A

公开(公告)日：2015-09-23

申请号：CN201410102734.0

申请日：2014-03-19

Applicant: 中国科学院生态环境研究中心

Inventor： 汪海林 ,  赵超 ,  赵柏林 ,  李翠平

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明一种硼酸介导的聚合酶链反应检测DNA中5-羟甲基胞嘧啶的方法和试剂盒。本发明结合葡萄糖基化反应，利用硼酸及其衍生物试剂可与葡萄糖基化5-羟甲基胞嘧啶中的邻二醇发生的共价作用，显著增加被复制碱基单元的体积，有效抑制聚合酶扩增反应的特点，提出硼酸介导的DNA聚合酶链扩增反应，可特异性地识别特定基因/片段中的5-羟甲基胞嘧啶。在此基础上，发展了一种快速、灵敏测定5-羟甲基胞嘧啶的试剂盒，可应用于各种细胞分析；与传统的检测试剂盒相比，该方法不受酶切位点限制，可适用于各种序列中5-羟甲基胞嘧啶的分析鉴定。本试剂盒具有广阔的应用前景，对于进一步阐明5-羟甲基胞嘧啶的生物学功能具有十分重要的意义。