公开(公告)号：CN118909966A

公开(公告)日：2024-11-08

申请号：CN202410615864.8

申请日：2024-05-17

申请人： 中国科学院深圳先进技术研究院

发明人： 文鹏杰 ,  王培培 ,  徐富强 ,  齐玉祥 ,  朱珍香 ,  韩丹

IPC分类号： C12N7/00 ,  C12N7/02 ,  C12N15/864 ,  C12N5/07 ,  C12N5/02

摘要： 本发明公开一种重组家蚕核型多角体病毒的制备方法、重组腺相关病毒制备系统和制备方法。本发明重组腺相关病毒制备系统包括：a)低血清悬浮培养BMN细胞和/或低血清悬浮培养BMN细胞的贴壁培养细胞，b)重组家蚕核型多角体病毒，所述重组家蚕核型多角体病毒感染宿主细胞或宿主至少可产生重组腺相关病毒包装所需的功能蛋白。本发明提供的重组腺相关病毒制备方法，通过利用重组家蚕核型多角体病毒感染悬浮培养或者悬浮转贴壁培养的BMN细胞。本发明基于家蚕杆状病毒表达系统制备的重组腺相关病毒滴度高、空壳率低、感染活性好。

公开(公告)号：CN118562888A

公开(公告)日：2024-08-30

申请号：CN202311779100.4

申请日：2023-12-22

申请人： 中国科学院深圳先进技术研究院

发明人： 文鹏杰 ,  王培培 ,  徐富强 ,  朱续涛 ,  韩丹 ,  朱珍香

IPC分类号： C12N15/866 ,  C12N15/35 ,  C12N15/66

摘要： 本发明公开一种重组杆粒制备系统及BmNPV‑rAAV重组杆粒，重组杆粒制备系统包括：a)包含可控丢失的辅助质粒和改造的杆状病毒基因组的DH10pureBac感受态细胞，b)可控丢失的转移载体。本发明BmNPV‑rAAV重组杆粒为包含重组腺相关病毒Cap基因表达框、核心表达元件ITR‑GOI及Rep基因表达框的单一BmNPV杆粒。本发明解决了Bac‑to‑Bac杆状病毒表达系统中辅助质粒和转移载体的残留问题，且技术流程简单。

公开(公告)号：CN117925723A

公开(公告)日：2024-04-26

申请号：CN202311741910.0

申请日：2023-12-18

申请人： 中国科学院深圳先进技术研究院

发明人： 文鹏杰 ,  王培培 ,  徐富强 ,  韩丹 ,  朱续涛 ,  齐玉祥

IPC分类号： C12N15/866 ,  C12N15/864 ,  C12N7/01 ,  C12N5/10

摘要： 本发明公开一种杆状病毒‑rAAV生产系统中转移载体pAAV‑Donor的制备方法及应用，制备方法包括：突变去除AAV Cap基因表达框中的IIS型限制酶识别位点；修饰获得的AAV Cap基因表达框；制备AAV‑Core、AAV‑Cap和AAV‑Rep骨架质粒；将经修饰的Cap基因表达框、异源功能性基因表达元件、经修饰的AAV Rep基因表达框依次插入至AAV‑Cap、AAV‑Core、AAV‑Rep骨架质粒的多克隆位点中，得到pAAV‑Rep、pAAV‑Cap和pAAV‑Core；将三个质粒通过Golden gate克隆技术一步组装，转化Stbl3感受态细胞，筛选阳性克隆，即得pAAV‑Donor。