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公开(公告)号：CN113416741A
公开(公告)日：2021-09-21
申请号：CN202110694878.X
申请日：2021-06-22
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
IPC分类号： C12N15/38 , C12N7/01 , C12N15/65 , C12N15/113 , C07K14/035
摘要： 本发明提供了顺行跨单级示踪工具系统，用于绘制特定的脑核团内神经元的直接突触后靶标；所述顺行跨单级突触病毒示踪工具系统包括HSV‑1H129株(H129)衍生的gK突变型(gKmut)假型化的重组H129示踪病毒粒子，和AAV2/9衍生的重组AAV2/9辅助病毒粒子；所述H129衍生的重组示踪病毒粒子包含一个含有受损gK基因的重组的HSV‑1‑H129病毒基因组；所述AAV2/9衍生的重组AAV2/9辅助病毒粒子包含一个重组AAV2/9病毒基因组，其中含有一个HSV‑1‑H129野生型gK编码序列。本发明也提供了gK突变型假型化病毒粒子制备的方法。
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公开(公告)号：CN106520709A
公开(公告)日：2017-03-22
申请号：CN201610976316.3
申请日：2016-11-07
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
IPC分类号： C12N7/01
CPC分类号： C12N7/00 , C12N9/1211 , C12N2710/16621 , C12N2750/14121 , C12Y207/01021
摘要： 本 发 明 提 供 了 顺 行 跨 单 级 突 触(monosynaptic transneuronal)病毒示踪系统,用于绘制在一个特定的脑核团的特殊类型神经元的直接后突触靶标；所述顺行跨单级突触病毒示踪系统包括H129衍生的重组缺陷型HSV-1病毒，其包含整合的第一表达盒含有第一启动子、第一荧光蛋白编码序列，和抗性肽编码序列，其中第一表达盒代替整个或部分胸腺嘧啶核苷激酶(TK)基因序列，产生的H129衍生的重组缺陷型HSV-1 H129病毒丧失TK功能(H129-ΔTK-tdT)；和AAV9衍生的重组AAV9辅助病毒(AAV9-TK-GFP和AAV9-DIO-TK-GFP)，其包含整合的第二表达盒含有第二启动子、TK编码序列，连接子肽编码序列，和第二荧光蛋白编码序列，其中第二表达盒的TK表达使H129衍生的重组缺陷型HSV-1病毒复制；其中所述第一和第二荧光蛋白编码序列编码不同的荧光蛋白。
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公开(公告)号：CN105567618A
公开(公告)日：2016-05-11
申请号：CN201511029238.8
申请日：2015-12-31
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
CPC分类号： C12N7/00 , C12N15/65 , C12N15/66 , C12N2710/16621 , C12N2710/16631 , C12N2710/16643 , C12N2710/16652 , C12N2800/107 , C12Q1/06 , C12Q1/18 , G01N33/68
摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及HSV1-H129-BAC及其变体，该病毒及其突变体带有细菌人工染色体BAC，能在特定的细菌内保持低拷贝的自我复制，解决了因疱疹病毒基因组过大而不能长时间保存、不能自我复制、不方便进行分子生物学突变改造的缺点。且该病毒及其突变体还带有GFP报告基因，大大拓展了疱疹病毒作为工具病毒的应用前景。本发明还提供了H129-BAC及其变体的构建方法，通过该方法可使对H129进行改造获得H129-BAC，并赋予H129-BAC更多的变体种类；构建方法和H129及其变体组成了一个遗传改造平台,具有更多的应用可能。
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公开(公告)号：CN113416741B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202110694878.X
申请日：2021-06-22
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
IPC分类号： C12N15/38 , C12N7/01 , C12N15/65 , C12N15/113 , C07K14/035
摘要： 本发明提供了顺行跨单级示踪工具系统，用于绘制特定的脑核团内神经元的直接突触后靶标；所述顺行跨单级突触病毒示踪工具系统包括HSV‑1H129株(H129)衍生的gK突变型(gKmut)假型化的重组H129示踪病毒粒子，和AAV2/9衍生的重组AAV2/9辅助病毒粒子；所述H129衍生的重组示踪病毒粒子包含一个含有受损gK基因的重组的HSV‑1‑H129病毒基因组；所述AAV2/9衍生的重组AAV2/9辅助病毒粒子包含一个重组AAV2/9病毒基因组，其中含有一个HSV‑1‑H129野生型gK编码序列。本发明也提供了gK突变型假型化病毒粒子制备的方法。
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公开(公告)号：CN105567618B
公开(公告)日：2020-12-08
申请号：CN201511029238.8
申请日：2015-12-31
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及HSV1‑H129‑BAC及其变体，该病毒及其突变体带有细菌人工染色体BAC，能在特定的细菌内保持低拷贝的自我复制，解决了因疱疹病毒基因组过大而不能长时间保存、不能自我复制、不方便进行分子生物学突变改造的缺点。且该病毒及其突变体还带有GFP报告基因，大大拓展了疱疹病毒作为工具病毒的应用前景。本发明还提供了H129‑BAC及其变体的构建方法，通过该方法可使对H129进行改造获得H129‑BAC，并赋予H129‑BAC更多的变体种类；构建方法和H129及其变体组成了一个遗传改造平台,具有更多的应用可能。
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公开(公告)号：CN106544326B
公开(公告)日：2020-06-26
申请号：CN201610976085.6
申请日：2016-11-07
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
IPC分类号： C12N7/01
摘要： 本发明提供了一个重组单纯疱疹病毒1型(HSV‑1)毒株H129衍生的(H129‑derived)顺行跨多级突触、跨神经元的病毒示踪系统；所述示踪系统是一个重组单纯疱疹病毒1型(HSV‑1)毒株H129，包括两个或两个以上的荧光表达盒(fluorescence expression cassette)，插入到H129基因组的不同位点，其中每个荧光表达盒包含至少两个拷贝的荧光蛋白编码序列(fluorescent protein‑encoding sequence)，所述荧光蛋白编码序列前后排列，和至少一个连接子编码序列，两个荧光蛋白编码序列之间插入至少一个连接子编码序列,以便荧光蛋白编码序列和连接子序列转录成一个转录子；所述连接子编码序列编码一个连接子多肽；所述连接子多肽含有至少两个相邻氨基酸，他们间的肽键形成是非常低效的；因此，所述转录子被翻译时，由于所述连接子多肽阻碍肽键的形成，能够计量地产生至少两个非融合荧光蛋白。
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公开(公告)号：CN106544326A
公开(公告)日：2017-03-29
申请号：CN201610976085.6
申请日：2016-11-07
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
IPC分类号： C12N7/01
摘要： 本发明提供了一个重组单纯疱疹病毒1型(HSV‑1)毒株H129衍生的(H129‑derived)顺行跨多级突触、跨神经元的病毒示踪系统；所述示踪系统是一个重组单纯疱疹病毒1型(HSV‑1)毒株H129，包括两个或两个以上的荧光表达盒(fluorescence expression cassette)，插入到H129基因组的不同位点，其中每个荧光表达盒包含至少两个拷贝的荧光蛋白编码序列(fluorescent protein‑encoding sequence)，所述荧光蛋白编码序列前后排列，和至少一个连接子编码序列，两个荧光蛋白编码序列之间插入至少一个连接子编码序列,以便荧光蛋白编码序列和连接子序列转录成一个转录子；所述连接子编码序列编码一个连接子多肽；所述连接子多肽含有至少两个相邻氨基酸，他们间的肽键形成是非常低效的；因此，所述转录子被翻译时，由于所述连接子多肽阻碍肽键的形成，能够计量地产生至少两个非融合荧光蛋白。
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公开(公告)号：CN115806945A
公开(公告)日：2023-03-17
申请号：CN202211645082.6
申请日：2022-12-14
申请人： 中国科学院武汉病毒研究所
IPC分类号： C12N7/01 , C12N15/869 , C12N15/65 , C12N15/12 , C12N15/53
摘要： 本发明提供了一种基因工程改造的鼠巨细胞病毒(MCMV)‑K181毒株衍生的工具病毒，包括一个示踪因子表达盒，一个BAC骨架，其中所述BAC骨架和示踪因子表达盒一起插入到MCMV‑K181毒株基因组的M06开放阅读框和M07开放阅读框之间；所述示踪因子表达盒包括三个示踪因子编码序列，从5’到3’依次为第一荧光蛋白、第一连接子、第二荧光蛋白、第二连接子、荧光素酶、PolyA。
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