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公开(公告)号：CN105349484B
公开(公告)日：2019-03-08
申请号：CN201510864325.9
申请日：2015-12-01
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明涉及一种犀角金线鲃心脏细胞系的构建方法，该方法包括如下步骤：1)犀角金线鲃心脏组织的获取：采用青霉素和酒精联合对犀角金线鲃进行消毒；2)原代培养：采用含有谷氨酰胺、青霉素、链霉素、硫酸链霉素、两性霉素，渗透压为的280‑330mOsm/l的M199培养液进行培养；3)传代培养：传至第10代时，细胞培养液换成基础培养液，所述犀角金线鲃心脏细胞系建立成功。本发明的构建方法所获得的犀角金线鲃心脏细胞系形态为成纤维样，能够连续传代并直接应用于生物学特性研究，不仅能满足对犀角金线鲃这一珍稀物种种质资源保存和理论研究的需要，同时也是中国洞穴鱼类的首个心脏细胞系，为细胞水平的洞穴适应性研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN105309420B
公开(公告)日：2017-10-27
申请号：CN201510862404.6
申请日：2015-12-01
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
IPC: A01N1/02
Abstract: 一种滇池金线鲃精子超低温冷冻保存方法，该方法是以滇池金线鲃精子为研究对象，先对其精子质量进行评价，选择精子质量较好的精液样品进行超低温冷冻保存，冻精复苏后，先评价其精子质量，选择精子质量较好的精液样品进行人工授精。具体包括溶液配制、精液采集、精子质量评价、精液冷冻保存和冻精质量评价五个步骤。本发明的有益效果在于：成本低，操作简便易行；首次建立了适用于滇池金线鲃的精子质量评价体系，有助于随时监测塘养环境下的精子质量；建立了适用于滇池金线鲃的精子超低温冷冻保存方法，为遗传育种奠定基础；可用于规模化生产，对于开展鱼类资源恢复和重建具有重要意义；对仪器的要求较低，具有重大的推广意义。
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公开(公告)号：CN103409365A
公开(公告)日：2013-11-27
申请号：CN201310400091.3
申请日：2013-09-05
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明涉及一种短须裂腹鱼心脏细胞系的构建和超低温冷冻保存的方法，属于淡水水生生物细胞培养和超低温冷冻保存技术领域。该方法是以短须裂腹鱼心脏组织为材料，采用组织块法和两酶消化法，在含有胎牛血清和细胞生长因子，pH值为7.0-7.2 的M199培养液中培养；采用胰蛋白酶消化法进行传代培养；具体包括制备细胞培养液、原代培养及传代培养步骤。本发明的有益效果在于：1、操作简便；2、降低了纯组织块法对心脏细胞的损伤；3、构建的短须裂腹鱼心脏细胞系形态为成纤维样，生长状态良好，能够连续传代并直接应用于生物学特性研究，满足了对短须裂腹鱼种质资源保存和理论研究及应用的需要；4、该构建方法也适用于其他鱼类构建心脏细胞系。
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公开(公告)号：CN104805052B
公开(公告)日：2020-03-31
申请号：CN201510204471.9
申请日：2015-04-27
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明涉及一种软鳍新光唇鱼肌肉细胞系的构建方法，该构建方法包括如下步骤：1)软鳍新光唇鱼肌肉的获取：高锰酸钾和酒精联合对鱼体进行消毒；2)原代培养：采用含有硫酸卡那霉素、硫酸链霉素以及两性霉素B的DMEM培养液进行培养；3)传代培养：传至第10代时，细胞培养液换成基础培养液，所述软鳍新光唇鱼肌肉细胞系建立成功。本发明的构建方法所获得的软鳍新光唇鱼肌肉细胞系形态为不规则多角形，能够连续传代并直接应用于生物学特性研究，满足了对软鳍新光唇鱼种质资源保存和理论研究及应用的需要。
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公开(公告)号：CN106479960A
公开(公告)日：2017-03-08
申请号：CN201610970091.0
申请日：2016-10-27
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明涉及一种光倒刺鲃鳍细胞系的构建方法，该构建方法包括如下步骤：1)光倒刺鲃鳍的获取：采用亚甲基蓝和酒精联合对鱼体进行消毒；2)原代培养：采用含有细胞生长因子、胎牛血清、青霉素、链霉素、庆大霉素和两性霉素B的DMEM/F12或L-15培养液进行培养；3)传代培养：传至第8代时，细胞培养液换成基础培养液，所述光倒刺鲃鳍细胞系建立成功。本发明的构建方法所获得的光倒刺鲃鳍细胞系能够连续传代并直接应用于生物学特性研究，能满足对光倒刺鲃这一经济物种种质资源保存和理论研究的需要，还可以反复冻融，可应用于细胞生物学、病毒学、毒理学、分子生物学、遗传学和免疫学等重要研究。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104805052A
公开(公告)日：2015-07-29
申请号：CN201510204471.9
申请日：2015-04-27
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明涉及一种软鳍新光唇鱼肌肉细胞系的构建方法，该构建方法包括如下步骤：1)软鳍新光唇鱼肌肉的获取：高锰酸钾和酒精联合对鱼体进行消毒；2)原代培养：采用含有硫酸卡那霉素、硫酸链霉素以及两性霉素B的DMEM培养液进行培养；3)传代培养：传至第10代时，细胞培养液换成基础培养液，所述软鳍新光唇鱼肌肉细胞系建立成功。本发明的构建方法所获得的软鳍新光唇鱼肌肉细胞系形态为不规则多角形，能够连续传代并直接应用于生物学特性研究，满足了对软鳍新光唇鱼种质资源保存和理论研究及应用的需要。
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公开(公告)号：CN105409845B
公开(公告)日：2018-09-11
申请号：CN201510863420.7
申请日：2015-12-01
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
IPC: A01K61/10 , A01K61/17 , A23K50/80 , A23K10/20 , A23K20/174 , A23K20/24 , A23K10/30 , A23K10/22 , A23K10/18
Abstract: 本发明涉及一种短须裂腹鱼人工繁殖的方法，该方法主要包括饵料配制、亲鱼来源、亲鱼驯养、亲鱼选择、人工授精、鱼卵孵化和鱼苗饲养七个步骤。本发明的有益效果在于：不使用催产剂，短须裂腹鱼也能产卵产精且可获得较高的受精率和孵化率；从根本上解决了塘养环境下野生鱼类雌雄不发育或发育不同步的问题；减少了对短须裂腹鱼亲鱼的损害并降低了养殖成本；更加合理、高效，提高了孵化率并减少了鱼卵资源的浪费；提高了鱼苗的存活率同时也降低了鱼苗的畸形率。
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公开(公告)号：CN106508891A
公开(公告)日：2017-03-22
申请号：CN201610976570.3
申请日：2016-10-27
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明涉及一种大理裂腹鱼肾脏细胞系的构建方法，该方法包括如下步骤：1)大理裂腹鱼肾脏组织的获取：采用高锰酸钾和酒精联合对大理裂腹鱼进行消毒；2)原代培养：采用含有细胞生长因子、青霉素、链霉素、两性霉素B，渗透压为的280-300mOsm/L的L-15或DMEM/F12培养液进行培养；3)传代培养：传至第10代时，细胞培养液换成基础培养液，所述大理裂腹鱼肾脏细胞系建立成功。本发明的构建方法所获得的大理裂腹鱼肾脏细胞系形态为成纤维样，能够连续传代并直接应用于生物学特性研究，不仅能满足对大理裂腹鱼这一珍稀物种种质资源保存和理论研究的需要，同时也是大理裂腹鱼的首个细胞系，为大理裂腹鱼细胞水平的高原适应性研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN105349484A
公开(公告)日：2016-02-24
申请号：CN201510864325.9
申请日：2015-12-01
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明涉及一种犀角金线鲃心脏细胞系的构建方法，该方法包括如下步骤：1)犀角金线鲃心脏组织的获取：采用青霉素和酒精联合对犀角金线鲃进行消毒；2)原代培养：采用含有谷氨酰胺、青霉素、链霉素、硫酸链霉素、两性霉素，渗透压为的280-330mOsm/l的M199培养液进行培养；3)传代培养：传至第10代时，细胞培养液换成基础培养液，所述犀角金线鲃心脏细胞系建立成功。本发明的构建方法所获得的犀角金线鲃心脏细胞系形态为成纤维样，能够连续传代并直接应用于生物学特性研究，不仅能满足对犀角金线鲃这一珍稀物种种质资源保存和理论研究的需要，同时也是中国洞穴鱼类的首个心脏细胞系，为细胞水平的洞穴适应性研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN105331576A
公开(公告)日：2016-02-17
申请号：CN201510860377.9
申请日：2015-12-01
Applicant: 中国科学院昆明动物研究所
Abstract: 本发明涉及一种安水金线鲃脾脏细胞系的构建方法，该构建方法包括如下步骤：1)安水金线鲃脾脏的获取：采用酒精直接对鱼体进行消毒；2)原代培养：采用含有谷氨酰胺、胎牛血清、青霉素、链霉素、庆大霉素和两性霉素B的L-15培养液进行培养；3)传代培养：传至第8代时，细胞培养液换成基础培养液，所述安水金线鲃脾脏细胞系建立成功。本发明的构建方法所获得的安水金线鲃脾脏细胞系能够连续传代并直接应用于生物学特性研究，不仅能满足对安水金线鲃这一珍稀物种种质资源保存和理论研究的需要，更重要的是该细胞系是中国首个洞穴鱼类的细胞系，为细胞水平的洞穴适应性研究奠定了基础。
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