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公开(公告)号:CN115948396A
公开(公告)日:2023-04-11
申请号:CN202211146300.1
申请日:2022-09-20
Applicant: 中国科学院天津工业生物技术研究所 , 呼伦贝尔东北阜丰生物科技有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/77 , C12N1/21 , C12N9/06 , C12P13/24 , C12P13/14 , C12P13/08 , C12P13/10 , C12P21/00 , C12R1/15
Abstract: 本发明基于谷氨酸棒杆菌的gdh基因的野生型启动子,通过对其RBS区进行突变构建启动子文库,筛选获得具有增强活性的突变启动子,表现出比野生型更高的启动子活性。本发明的突变启动子可用于增强目的基因的表达,例如与gdh基因可操作地连接,可以增强谷氨酸脱氢酶的表达强度,由此提高了重组菌株的氨基酸例如谷氨酸生产效率,具有较高的应用价值。
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公开(公告)号:CN119061006A
公开(公告)日:2024-12-03
申请号:CN202310638648.0
申请日:2023-06-01
Applicant: 中国科学院天津工业生物技术研究所 , 呼伦贝尔东北阜丰生物科技有限公司
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及丙酮酸羧化酶基因启动子的突变体及其生产氨基酸中的应用。所述突变体在对应于SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的启动子的第355位至第365位存在突变,且相对于野生型的启动子具有增强的活性。本发明提供的具有增强的启动子活性的核酸分子表现出比野生型更高的启动子活性,可以用于目标基因的表达,尤其是与氨基酸生产相关基因的表达,例如与pyc基因可操作地连接,可以增强丙酮酸羧化酶的表达强度,由此提高了重组菌株的氨基酸生产效率,具有较高的应用价值。
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公开(公告)号:CN115948396B
公开(公告)日:2024-07-09
申请号:CN202211146300.1
申请日:2022-09-20
Applicant: 中国科学院天津工业生物技术研究所 , 呼伦贝尔东北阜丰生物科技有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/77 , C12N1/21 , C12N9/06 , C12P13/24 , C12P13/14 , C12P13/08 , C12P13/10 , C12P21/00 , C12R1/15
Abstract: 本发明基于谷氨酸棒杆菌的gdh基因的野生型启动子,通过对其RBS区进行突变构建启动子文库,筛选获得具有增强活性的突变启动子,表现出比野生型更高的启动子活性。本发明的突变启动子可用于增强目的基因的表达,例如与gdh基因可操作地连接,可以增强谷氨酸脱氢酶的表达强度,由此提高了重组菌株的氨基酸例如谷氨酸生产效率,具有较高的应用价值。
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公开(公告)号:CN119061043A
公开(公告)日:2024-12-03
申请号:CN202310643079.9
申请日:2023-06-01
Applicant: 中国科学院天津工业生物技术研究所
Abstract: 本发明公开了苏氨酸外排蛋白的筛选方法及苏氨酸外排蛋白的应用。本发明基于谷氨酸棒杆菌全基因组单基因过表达库的功能基因的高通量筛选方法,快速地筛选能加快将过量的L‑苏氨酸转运至胞外的L‑苏氨酸外排蛋白,从而提升菌株的L‑苏氨酸的产量。筛选到的谷氨酸棒杆菌中的6种L‑苏氨酸外排蛋白的过表达,发现与对照菌株相比,6个膜蛋白过表达菌株在所有时间点的胞内苏氨酸浓度都明显低于对照,胞外苏氨酸浓度都明显高于对照,表明筛选到的6个膜蛋白均可以外排L‑苏氨酸。此外,外排蛋白Cgl2078、Cgl2344和Cgl2656不能外排高丝氨酸,更有利于L‑苏氨酸的生产应用。
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公开(公告)号:CN115322990B
公开(公告)日:2024-09-20
申请号:CN202110505665.8
申请日:2021-05-10
Applicant: 中国科学院天津工业生物技术研究所
Abstract: 本公开属于生物技术和基因工程技术领域,具体涉及一种具有启动子活性的多核苷酸,包含具有启动子活性的多核苷酸的转录表达盒、重组表达载体、重组宿主细胞,以及调控目标基因转录的方法、制备蛋白的方法和生产目标化合物的方法。本公开提供的具有启动子活性的多核苷酸,为包含如SEQ ID NO:2‑4任一项所示序列的多核苷酸的突变体,与野生型启动子相比,突变体的启动子活性显著提高。将突变体应用于目标化合物的生产中,可以显著提高目标化合物的转化率,为氨基酸、有机酸等目标化合物的工业发酵提供了一种极具应用潜力的强组成型的启动子。
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公开(公告)号:CN116891868A
公开(公告)日:2023-10-17
申请号:CN202310256561.7
申请日:2023-03-16
Applicant: 中国科学院天津工业生物技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种渗透压耐受性功能基因鉴定方法及功能基因的应用。本发明首先构建了一种基于谷氨酸棒杆菌全基因组单基因过表达库的功能基因筛选方法,用于高通量快速地筛选能提高菌株对高渗透压力的耐受性的功能基因。通过过表达这些功能基因提高菌株对高渗透压力的耐受性,从而提升菌株的氨基酸产量。
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公开(公告)号:CN115490761B
公开(公告)日:2023-06-09
申请号:CN202111283285.0
申请日:2021-11-01
Applicant: 中国科学院天津工业生物技术研究所
Abstract: 本公开属于生物技术和基因工程技术领域,具体涉及一种基于赖氨酸外排蛋白构建的重组微生物、重组微生物的构建方法、赖氨酸生产菌株,以及生产赖氨酸的方法。本公开发现如SEQ ID NO:4或如SEQ ID NO:6所示序列的多肽能够促进赖氨酸向胞外的排放,为赖氨酸高产菌株的改造提供了两种新型的赖氨酸外排蛋白。基于SEQ ID NO:4或如SEQ ID NO:6所示序列的多肽,本公开构建了重组微生物,重组微生物具有显著提高的赖氨酸的产量及糖酸转化率,适合对赖氨酸的大规模工业化生产,具有重要的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN115896133A
公开(公告)日:2023-04-04
申请号:CN202211027795.6
申请日:2022-08-25
Applicant: 中国科学院天津工业生物技术研究所
Abstract: 本发明提供的具有表达调控活性的多核苷酸,核苷酸序列如序列SEQ ID NO:3‑5任一项所示,是表达调控活性显著提高的谷氨酸棒杆菌来源的表达调控元件的突变体。与野生型表达调控元件相比,突变体的表达调控活性显著提高,将其与目标基因可操作地连接,可以显著提高目标基因的表达强度,且不会破坏基因组的稳定性,使目标基因能够稳定高效表达,进而稳定、高效的生产下游产物。
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公开(公告)号:CN115506035A
公开(公告)日:2022-12-23
申请号:CN202110859066.6
申请日:2021-07-28
Applicant: 中国科学院天津工业生物技术研究所
IPC: C40B50/06 , C40B40/06 , C12N15/113 , C12N15/77 , C12N1/21 , C12P13/04 , C12P7/40 , C12P7/48 , C12P7/46 , C12P7/56 , C12P7/52 , C12P7/54 , C12R1/15
Abstract: 本公开属于生物技术和基因工程技术领域,具体涉及谷氨酸棒杆菌启动子突变体文库的构建方法、具有启动子活性的多核苷酸,包含具有启动子活性的多核苷酸的启动子突变体文库、转录表达盒、重组表达载体、重组宿主细胞,以及调控目标基因转录的方法、制备蛋白的方法和生产目标化合物的方法。本公开首先提供了谷氨酸棒杆菌启动子突变体文库的构建方法,通过该方法可以获得一系列高活性的启动子突变体,通用性广,为目标基因的改造提供了具有高启动子活性的丰富的启动子元件。
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公开(公告)号:CN115490761A
公开(公告)日:2022-12-20
申请号:CN202111283285.0
申请日:2021-11-01
Applicant: 中国科学院天津工业生物技术研究所
Abstract: 本公开属于生物技术和基因工程技术领域,具体涉及一种基于赖氨酸外排蛋白构建的重组微生物、重组微生物的构建方法、赖氨酸生产菌株,以及生产赖氨酸的方法。本公开发现如SEQ ID NO:4或如SEQ ID NO:6所示序列的多肽能够促进赖氨酸向胞外的排放,为赖氨酸高产菌株的改造提供了两种新型的赖氨酸外排蛋白。基于SEQ ID NO:4或如SEQ ID NO:6所示序列的多肽,本公开构建了重组微生物,重组微生物具有显著提高的赖氨酸的产量及糖酸转化率,适合对赖氨酸的大规模工业化生产,具有重要的工业应用前景。
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