工程化的Cas12i核酸酶及其效应蛋白以及用途

    公开(公告)号:CN113151215B

    公开(公告)日:2022-11-18

    申请号:CN202110581290.3

    申请日:2021-05-27

    摘要: 本申请提供了一种工程化的Cas12i核酸酶;其包含一种、两种、三种或四种以下基于参比Cas12i核酸酶的突变:(1)将参比Cas12i核酸酶中与PAM相互作用的一个或多个氨基酸替换为带正电的氨基酸;和/或(2)将参比Cas12i核酸酶中参与打开DNA双链的一个或多个氨基酸替换为带芳香环的氨基酸;和/或(3)将参比Cas12i核酸酶中位于RuvC结构域并与单链DNA底物相互作用的一个或多个氨基酸替换为带正电的氨基酸;和/或(4)将参比Cas12i核酸酶中与DNA‑RNA双螺旋相互作用的一个或多个氨基酸替换为带正电的氨基酸;尤其所述参比Cas12i核酸酶为天然Cas12i核酸酶,例如天然Cas12i2核酸酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所定义。