公开(公告)号：CN107653260B

公开(公告)日：2020-11-17

申请号：CN201711093350.7

申请日：2017-11-08

Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所

Inventor： 刘志刚 ,  卢迈新 ,  蔡玉臻 ,  可小丽 ,  张德锋 ,  曹建萌

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/31 ,  A61K39/09 ,  A61P31/04

Abstract: 本发明涉及一种重组乳酸乳球菌的制备方法及应用。其特征在于，在乳酸乳球菌细胞中胞内表达或分泌表达罗非鱼源无乳链球菌表面免疫原性蛋白(Surface immunogenic protein，Sip)，重组表达Sip蛋白所用载体分别为pNZ8124和pNZ8148，载体中插入的Sip基因片段去除了信号肽区段并添加了组氨酸序列标签，重组蛋白由乳酸链球菌素(Nisin)诱导表达，最佳诱导条件为100ng/mL Nisin诱导4h，最佳口服免疫浓度为2.24×1010CFU/mL，口服剂量为100μL。本发明所公布的重组乳酸乳球菌应用于罗非鱼无乳链球菌的乳酸菌活载体疫苗具有血清型覆盖范围广，可直接口服，安全性好，操作简便，易于大规模群体免疫，免疫效果较好等优点。

公开(公告)号：CN107653260A

公开(公告)日：2018-02-02

申请号：CN201711093350.7

申请日：2017-11-08

Applicant: 中国水产科学研究院珠江水产研究所

Inventor： 刘志刚 ,  卢迈新 ,  蔡玉臻 ,  可小丽 ,  张德锋 ,  曹建萌

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/31 ,  A61K39/09 ,  A61P31/04

Abstract: 本发明涉及一种重组乳酸乳球菌的制备方法及应用。其特征在于，在乳酸乳球菌细胞中胞内表达或分泌表达罗非鱼源无乳链球菌表面免疫原性蛋白(Surface immunogenic protein，Sip)，重组表达Sip蛋白所用载体分别为pNZ8124和pNZ8148，载体中插入的Sip基因片段去除了信号肽区段并添加了组氨酸序列标签，重组蛋白由乳酸链球菌素(Nisin)诱导表达，最佳诱导条件为100ng/mL Nisin诱导4h，最佳口服免疫浓度为2.24×1010CFU/mL，口服剂量为100μL。本发明所公布的重组乳酸乳球菌应用于罗非鱼无乳链球菌的乳酸菌活载体疫苗具有血清型覆盖范围广，可直接口服，安全性好，操作简便，易于大规模群体免疫，免疫效果较好等优点。