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公开(公告)号：CN112481277B
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN202011574583.0
申请日：2020-12-28
Applicant: 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
IPC: C12N15/29 , C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/82
Abstract: 一种金花茶CnFLS+反义F3’H双基因载体构建促进植物黄酮醇合成的方法，属于基因工程技术领域。该方法包括：1）克隆金花茶CnFLS基因，合成烟草反义表达F3’H基因的干扰序列；2）构建CnFLS+反义F3’H双基因载体；3）将CnFLS+反义F3’H双基因载体转入大肠杆菌，测序正确后提取质粒转入农杆菌中，采用农杆菌介导的叶盘法转化本氏烟草；4）采用PCR鉴定转基因烟草阳性株系，测定阳性株系中黄酮醇、多酚的含量。本发明过表达金花茶的CnFLS基因，同时设计干扰F3’H基因的表达，CnFLS基因过表达促进合成黄酮醇，反义干扰F3’H基因的表达可抑制多酚、花青苷的合成，进而能使植物的花色变黄。
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公开(公告)号：CN112553249A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011574754.X
申请日：2020-12-28
Applicant: 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
Abstract: 一种金花茶CnFLS+CnUFGT14双基因载体构建促进植物黄酮醇苷合成的方法，属于基因工程技术领域。该方法包括：1）克隆金花茶CnFLS和CnUFGT14基因；2）构建双基因载体；3）将双基因载体转入大肠杆菌，测序正确后提取质粒转入农杆菌中，叶盘法转化本氏烟草；4）PCR鉴定转基因烟草阳性株系，测定阳性株系中黄酮醇苷、多酚的含量。本发明通过过表达金花茶的CnFLS基因，同时过表达CnUFGT14基因的合理设计，将CnFLS基因促进合成的黄酮醇，进而被CnUFGT14基因糖苷化形成稳定的黄酮醇苷，提高了植物中黄酮醇苷的含量，同时一定程度上抑制了多酚、花青苷的合成，进而能使植物的花色变黄。
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公开(公告)号：CN112481277A
公开(公告)日：2021-03-12
申请号：CN202011574583.0
申请日：2020-12-28
Applicant: 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
IPC: C12N15/29 , C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/82
Abstract: 一种金花茶CnFLS+反义F3’H双基因载体构建促进植物黄酮醇合成的方法，属于基因工程技术领域。该方法包括：1）克隆金花茶CnFLS基因，合成烟草反义表达F3’H基因的干扰序列；2）构建CnFLS+反义F3’H双基因载体；3）将CnFLS+反义F3’H双基因载体转入大肠杆菌，测序正确后提取质粒转入农杆菌中，采用农杆菌介导的叶盘法转化本氏烟草；4）采用PCR鉴定转基因烟草阳性株系，测定阳性株系中黄酮醇、多酚的含量。本发明过表达金花茶的CnFLS基因，同时设计干扰F3’H基因的表达，CnFLS基因过表达促进合成黄酮醇，反义干扰F3’H基因的表达可抑制多酚、花青苷的合成，进而能使植物的花色变黄。
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公开(公告)号：CN112553249B
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202011574754.X
申请日：2020-12-28
Applicant: 中国林业科学研究院亚热带林业研究所
Abstract: 一种金花茶CnFLS+CnUFGT14双基因载体构建促进植物黄酮醇苷合成的方法，属于基因工程技术领域。该方法包括：1）克隆金花茶CnFLS和CnUFGT14基因；2）构建双基因载体；3）将双基因载体转入大肠杆菌，测序正确后提取质粒转入农杆菌中，叶盘法转化本氏烟草；4）PCR鉴定转基因烟草阳性株系，测定阳性株系中黄酮醇苷、多酚的含量。本发明通过过表达金花茶的CnFLS基因，同时过表达CnUFGT14基因的合理设计，将CnFLS基因促进合成的黄酮醇，进而被CnUFGT14基因糖苷化形成稳定的黄酮醇苷，提高了植物中黄酮醇苷的含量，同时一定程度上抑制了多酚、花青苷的合成，进而能使植物的花色变黄。
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