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公开(公告)号：CN114891909B
公开(公告)日：2024-11-08
申请号：CN202210166041.2
申请日：2022-02-23
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所 , 三亚中国农业科学院国家南繁研究院
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12N15/11
摘要： 本发明涉及转基因玉米VP3C1外源插入片段的旁侧序列及应用。本发明从转Bt vip3Aa‑m3基因的玉米植株中筛选到一个抗草地贪夜蛾虫效果显著的转基因事件VP3C1；通过染色体步移的方法获得了其左边界旁侧序列和右边界旁侧序列，分别如SEQ ID NO.1中第1‑756位所示和如SEQ ID NO.2中第359‑932位所示，VP3C1外源片段是双拷贝单位点反向插入，在玉米基因组上的5’旁侧序列、外源插入序列和3’旁侧序列如SEQ ID NO.3所示。两端的旁侧序列可以作为本转化事件的特异检测序列，通过两个旁侧序列设计引物，可以对转基因事件VP3C1特异性检测，并应用于检测试剂盒的开发。
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公开(公告)号：CN114891909A
公开(公告)日：2022-08-12
申请号：CN202210166041.2
申请日：2022-02-23
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所 , 三亚中国农业科学院国家南繁研究院
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12N15/11
摘要： 本发明涉及转基因玉米VP3C1外源插入片段的旁侧序列及应用。本发明从转Bt vip3Aa‑m3基因的玉米植株中筛选到一个抗草地贪夜蛾虫效果显著的转基因事件VP3C1；通过染色体步移的方法获得了其左边界旁侧序列和右边界旁侧序列，分别如SEQ ID NO.1中第1‑756位所示和如SEQ ID NO.2中第359‑932位所示，VP3C1外源片段是双拷贝单位点反向插入，在玉米基因组上的5’旁侧序列、外源插入序列和3’旁侧序列如SEQ ID NO.3所示。两端的旁侧序列可以作为本转化事件的特异检测序列，通过两个旁侧序列设计引物，可以对转基因事件VP3C1特异性检测，并应用于检测试剂盒的开发。
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公开(公告)号：CN109776659B
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN201910191397.X
申请日：2019-03-14
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： C07K14/325 , C12N15/31 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/46
摘要： 本发明涉及cry2Ah‑vp基因在抗黏虫中的应用。本申请人在Cry2Ah的第354位缬氨酸后面插入一个脯氨酸而从中得到Cry2Ah1‑vp突变体如SEQ ID No.1所示。密码子优化后获得cry2Ah‑vp基因，利用农杆菌介导法将cry2Ah‑vp基因转入玉米，获得了T0代转基因玉米。实验结果表明cry2Ah‑vp基因在转基因玉米不同组织中可以正常转录，六叶期Cry2Ah‑vp蛋白在玉米各个部位的表达量最高，叶片的表达量为2.20μg/g(鲜重)，抽雄期和灌浆期各部位也有较高表达。抗虫实验结果显示转基因玉米对黏虫有很好的杀虫活性，接虫3天后黏虫全部死亡；对玉米螟幼虫有明显的生长抑制作用。
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公开(公告)号：CN106318954A
公开(公告)日：2017-01-11
申请号：CN201610847168.5
申请日：2016-09-23
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
摘要： 本发明为“人工合成的对鳞翅目害虫高毒力的mcry1Ba、mcry1Ia基因序列及基因组合”，属生物防治技术领域。本发明提供的两种对鳞翅目害虫具有高毒力的Bt cry1Ba基因和Btcry1Ia基因的人工优化、改造并合成的新的DNA序列(见序列表SEQ ID NO1和SEQ ID NO2)，以利用植物偏好的密码子序列，提高Bt cry1Ba基因和Bt cry1Ia基因在转基因过程中的转化成功率，同时提高在转基因植物中的表达量和稳定表达的特性，通过双基因的组合应用提高基因的杀虫活性。本发明利用组成型表达的启动子构建了新的植物表达载体，转化率高，表达量高且稳定，可用于转基因植物的研究。
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公开(公告)号：CN112779273B
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202110008895.3
申请日：2021-01-05
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
摘要： 本发明涉及人工合成的对草地贪夜蛾高毒力杀虫基因及应用，以植物偏好的密码子优化苏云金芽胞杆菌的vip3Aa11基因，人工合成vip3Aa‑m3和vip3Aa‑m4基因，构建得到表达载体pBRI‑IRGT5901和表达载体pBRI‑IRGT5902。利用农杆菌介导法将所构建的表达载体转化玉米自交系品种，获得了抗草地贪夜蛾的玉米转化事件，Vip3Aa蛋白表达量约在0.2～7.1μg/g鲜重之间，且转vip3Aa‑m3基因玉米对草地贪夜蛾表现出高杀虫活性，外源基因和抗虫性状可以稳定遗传至下一代，获得的抗虫转基因玉米材料具有很好的应用价值，可以作为候选材料进行下一步抗草地贪夜蛾玉米的育种工作。
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公开(公告)号：CN111057707B
公开(公告)日：2022-05-20
申请号：CN201911247676.X
申请日：2019-12-09
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： C12N15/11 , C12Q1/6895
摘要： 本发明涉及转基因抗虫玉米2HVB4外源插入片段的旁侧序列及其检测方法。发明从转Bt cry2Ah‑vp基因的玉米植株中筛选到一个抗黏虫效果显著的转基因事件2HVB4；通过染色体步移的方法获得了其3’端边界序列和5’端边界序列，分别如SEQ ID NO.1中第947‑1849位所示和如SEQ ID NO.2中第1‑436位所示。两端的边界序列可以作为本转化事件的特异检测序列，通过两个边界序列设计引物，可以对转基因事件2HVB4特异性检测，并应用于检测试剂盒的开发。
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公开(公告)号：CN114032247B
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN202111312713.8
申请日：2021-11-08
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
摘要： 本发明为“杀虫基因cry2Ah‑vp和cry9Ee组合在抗虫植物中的应用”。本发明对鳞翅目害虫高毒力的cry2Ah‑vp和cry9Ee基因的改造并合成新的DNA序列，利用农杆菌介导法将两个基因分别转入玉米中，筛选得到高抗黏虫和玉米螟的2HVB5和9EG1转化事件。通过基因聚合方法将cry2Ah‑vp和cry9Ee基因进行组合，获得2HVB5/9EG1转基因玉米材料。实验结果表明cry2Ah‑vp和cry9Ee基因组合的转基因玉米对黏虫、玉米螟，尤其是抗性玉米螟具有高杀虫活性。本发明对于利用cry2Ah‑vp和cry9Ee基因转化植物协同表达培育抗虫植物、害虫防治及抗性治理具有非常重要的意义。
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公开(公告)号：CN109776659A
公开(公告)日：2019-05-21
申请号：CN201910191397.X
申请日：2019-03-14
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
IPC分类号： C07K14/325 , C12N15/31 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/46
摘要： 本发明涉及cry2Ah-vp基因在抗黏虫中的应用。本申请人在Cry2Ah的第354位缬氨酸后面插入一个脯氨酸而从中得到Cry2Ah1-vp突变体如SEQ ID No.1所示。密码子优化后获得cry2Ah-vp基因，利用农杆菌介导法将cry2Ah-vp基因转入玉米，获得了T0代转基因玉米。实验结果表明cry2Ah-vp基因在转基因玉米不同组织中可以正常转录，六叶期Cry2Ah-vp蛋白在玉米各个部位的表达量最高，叶片的表达量为2.20μg/g(鲜重)，抽雄期和灌浆期各部位也有较高表达。抗虫实验结果显示转基因玉米对黏虫有很好的杀虫活性，接虫3天后黏虫全部死亡；对玉米螟幼虫有明显的生长抑制作用。
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公开(公告)号：CN114032247A
公开(公告)日：2022-02-11
申请号：CN202111312713.8
申请日：2021-11-08
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
摘要： 本发明为“杀虫基因cry2Ah‑vp和cry9Ee组合在抗虫植物中的应用”。本发明对鳞翅目害虫高毒力的cry2Ah‑vp和cry9Ee基因的改造并合成新的DNA序列，利用农杆菌介导法将两个基因分别转入玉米中，筛选得到高抗黏虫和玉米螟的2HVB5和9EG1转化事件。通过基因聚合方法将cry2Ah‑vp和cry9Ee基因进行组合，获得2HVB5/9EG1转基因玉米材料。实验结果表明cry2Ah‑vp和cry9Ee基因组合的转基因玉米对黏虫、玉米螟，尤其是抗性玉米螟具有高杀虫活性。本发明对于利用cry2Ah‑vp和cry9Ee基因转化植物协同表达培育抗虫植物、害虫防治及抗性治理具有非常重要的意义。
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公开(公告)号：CN106701792B
公开(公告)日：2020-07-03
申请号：CN201710145166.6
申请日：2017-03-13
申请人： 中国农业科学院生物技术研究所
摘要： 本发明为“人工合成的对鳞翅目害虫高毒力杀虫基因及应用”，属生物防治技术领域。本发明提供的对鳞翅目害虫具有高毒力的mcry2Ah基因、mcry2Ah‑vp基因和mcry2Ah‑sp基因的人工优化、改造并合成的新的DNA序列(见SEQ ID NO2、SEQ ID NO3和SEQ ID NO4)，利用植物偏好的密码子序列，可以提高mcry2Ah基因、mcry2Ah‑vp基因和mcry2Ah‑sp基因在转基因植物中的表达量和稳定表达的特性，mcry2Ah‑sp表现出对抗性鳞翅目害虫的抗虫性高于其他改造基因，可以利用该基因序列转化植物防治害虫和延缓害虫抗性产生。
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