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公开(公告)号:CN102242082B
公开(公告)日:2012-10-24
申请号:CN201110105382.0
申请日:2011-04-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了马流感病毒核蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明利用原核表达的马流感病毒(EIV)核蛋白(NP)为免疫原,细胞融合后通过有限稀释法克隆和间接ELISA法筛选,获得两株稳定分泌单抗的杂交瘤细胞株2G11和3E10。两株单抗均能产生较高的腹水效价,Western-blot分析表明,所获得的2株单抗均能特异性识别EIV NP重组蛋白;间接免疫荧光试验证明,2株单抗能够与天然EIV结合;ELISA测定,2株单抗与马动脉炎病毒、马疱疹病毒1型、马疱疹病毒4型、马乙型脑炎病毒均不发生交叉反应。本发明为抗EIV NP单抗的制备及后期EIV检测方法的建立提供了物质基础。
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公开(公告)号:CN101250529A
公开(公告)日:2008-08-27
申请号:CN200810084383.X
申请日:2008-03-20
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了编码马传染性贫血病毒可溶性受体的cDNA序列。所述的cDNA序列为SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明cDNA序列所表达的蛋白为可溶性的受体多肽,可有效抑制或降低马传染性贫血病毒在靶细胞内的复制水平,可用于预防或治疗马传染性贫血病。
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公开(公告)号:CN103602638A
公开(公告)日:2014-02-26
申请号:CN201310589569.1
申请日:2013-11-20
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种重组马流感病毒毒株、其制备方法及由其制备得到的疫苗。该重组马流感病毒包含:马流感病毒A/equine/xinjiang/3/07(H3N8)株的HA和NA基因,以及流感病毒A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai(H1N1)(A/PR/8/34(H1N1,简称PR8病毒)的PB2、PB1、PA、NP、M和NS六个内部基因。本发明的一种马流感重组病毒毒株、命名为rH3N8-PR,该毒株的保藏号为CGMCC NO.8161。本发明还公开了该马流感重组病毒的制备方法以及由其制得的疫苗。与亲本株相比,本发明的马流感重组病毒在鸡胚和MDCK细胞上均能产生很高的病毒滴度和血凝效价,而且对小鼠的致病性显著降低,实验结果表明由本发明的马流感重组病毒制得的疫苗具有良好的免疫原性和保护效力。
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公开(公告)号:CN101328508B
公开(公告)日:2010-08-18
申请号:CN200810132409.3
申请日:2008-07-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种诊断马流感病毒(EIV)和鉴定其亚型的多重RT-PCR方法,包括:以待检样品RNA为模板,以SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2,SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4两组核苷酸序列为多重引物进行RT-PCR反应;如果从样品中只扩增出了227bp的产物,则该样品为EIV的H7N7亚型;如果同时扩增出了227bp和595bp的产物,则该样品为EIV的H3N8亚型;如果未扩增出227bp的产物,则该样品不含有EIV。本发明根据RT-PCR技术原理,根据EIV只有两种HA亚型的特点,建立了多重Rt-PCR检测方法,其敏感性强、特异性高,可以用于EIV的快速诊断和亚型鉴定。
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公开(公告)号:CN1271015A
公开(公告)日:2000-10-25
申请号:CN99105852.6
申请日:1999-04-21
Applicant: 卫生部艾滋病预防与控制中心 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/49
CPC classification number: C07K14/005 , C12N2740/15022
Abstract: 本发明提供了马传染性贫血病毒(EIAV)驴白细胞弱毒疫苗株含有8258个碱基的前病毒DNA全长基因序列及其结构,其所编码的全部蛋白质的基因序列和氨基酸序列和蛋白质的二级结构,以及该疫苗毒株的调控序列和非必需区序列。这些序列和结构的数据可应用于包括艾滋病毒在内的所有慢病毒属病毒的疫苗研制和使用该属病毒作为载体进行的基因治疗,还可应用于对EIAV的血清学及分子生物学诊断方法及其所需试剂的研制。
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公开(公告)号:CN101250529B
公开(公告)日:2011-08-17
申请号:CN200810084383.X
申请日:2008-03-20
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了编码马传染性贫血病毒可溶性受体的cDNA序列。所述的cDNA序列为SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明cDNA序列所表达的蛋白为可溶性的受体多肽,可有效抑制或降低马传染性贫血病毒在靶细胞内的复制水平,可用于预防或治疗马传染性贫血病。
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公开(公告)号:CN101892200A
公开(公告)日:2010-11-24
申请号:CN201010139024.7
申请日:2010-03-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了抗H3N8亚型马流感病毒单克隆抗体及其用途。本发明分泌抗H3N8亚型马流感病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株的微生物保藏号是CGMCC No.3543。通过EL1SA和Western-blot方法鉴定证明:本发明单克隆抗体与马传染性贫血病毒、马动脉炎病毒、正常鸡胚尿囊液均无交叉反应,本发明H3N8/10的腹水ELISA效价为1∶1.6×104。本发明抗H3N8亚型的单克隆抗体可应用于马A型流感病毒的抗原性分析、血清学诊断、疫苗质量监测及流行病学调查等方面。
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公开(公告)号:CN101665841A
公开(公告)日:2010-03-10
申请号:CN200810214354.0
申请日:2008-09-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种区分马传染性贫血中国弱毒疫苗株与美洲流行毒株的方法,包括:(1)从感染了待检测毒株的马外周血白细胞中提取DNA;(2)以该DNA为模板,以P1/P3为引物进行第一轮PCR扩增;(2)以P2/P3为引物进行第二轮PCR扩增;(3)PCR产物进行双酶切分析;如果酶切出了340bp,190bp和150bp片段,则该检测毒株为美洲流行毒株;如果仅切出了340bp片段,则该检测毒株为中国弱毒疫苗株。本发明方法可以对阿根廷代表毒株感染马和中国疫苗免疫马进行准确的区分,可以灵敏特异的检测感染马传贫病毒的马匹,能够鉴别到0.2ng细胞染色体DNA中的病毒特异性DNA片段,而且只用5-7小时就可以快速的进行区分。
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公开(公告)号:CN1301866A
公开(公告)日:2001-07-04
申请号:CN99127532.2
申请日:1999-12-30
Applicant: 卫生部艾滋病预防与控制中心 , 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/11 , C12N15/49 , C12N15/63 , C07K14/155 , A61K39/21 , A61K48/00 , G01N33/569 , G01N33/68 , A61P31/12
Abstract: 本发明涉及马传染性贫血病毒的称为辽系野毒株的一种强毒株和称为驴胎皮肤细胞适应株的一种经过多次马属动物细胞传代得到的减毒疫苗株的全长前病毒DNA序列。各功能基因的DNA序列及其编码的蛋白质序列及各功能基因及蛋白产物的应用。所述的两种毒株是我国自行分离得到的。
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公开(公告)号:CN103898070A
公开(公告)日:2014-07-02
申请号:CN201410076834.0
申请日:2014-03-04
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/04 , C12N15/866 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种H3N8亚型马流感重组病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用。本发明的疫苗中含有由SEQ?ID?NO.1和SEQ?ID?NO.2所述核苷酸序列用昆虫/杆状病毒表达系统表达后所得的重组病毒样颗粒蛋白和药物学上可接受的载体、佐剂或赋形剂。本发明的重组病毒样颗粒与天然病毒粒子的形态结构类似,具有良好的免疫原性,由其制备得到的疫苗免疫小鼠后能够诱导小鼠产生良好的保护性免疫反应,且没有活病毒的任何危险,同时还能够区分自然感染者和免疫者,不干扰流行病学调查,因此,本发明的一种H3N8亚型马流感病毒样颗粒疫苗可以作为预防和治疗马流感的候选疫苗。
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