公开(公告)号：CN111748539B

公开(公告)日：2021-10-22

申请号：CN202010531552.0

申请日：2020-06-11

Applicant: 中国农业科学院农产品加工研究所

Inventor： 逄晓阳 ,  李伟勋 ,  杨兰 ,  吕加平 ,  芦晶 ,  张书文 ,  朱青 ,  徐琛

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/113 ,  C12N15/74 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90

Abstract: 本发明公开了一种CRISPR/LpCas9基因编辑系统及其应用，CRISPR/LpCas9基因编辑系统包括：LpCas9蛋白和sgRNA复合体，能精确定位靶向DNA序列，并产生切割，使DNA发生双链断裂损伤；所述LpCas9蛋白具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；所述sgRNA具有SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列，或者基于SEQ ID NO:2改造的sgRNA序列。本发明能有效解决spCas9应用于副干酪乳杆菌上存在的异源密码子偏好性和细胞毒性的问题；通过导入人为设计的CRISPR RNA和修复模板在细胞中或体外进行基因编辑，有效解决了菌株因自身特性或携带代表质粒较大等原因所导致的转化效率过低的问题，同时其在基因编辑领域具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN111748539A

公开(公告)日：2020-10-09

申请号：CN202010531552.0

申请日：2020-06-11

Applicant: 中国农业科学院农产品加工研究所

Inventor： 逄晓阳 ,  李伟勋 ,  杨兰 ,  吕加平 ,  芦晶 ,  张书文 ,  朱青 ,  徐琛

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/113 ,  C12N15/74 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90

Abstract: 本发明公开了一种CRISPR/LpCas9基因编辑系统及其应用，CRISPR/LpCas9基因编辑系统包括：LpCas9蛋白和sgRNA复合体，能精确定位靶向DNA序列，并产生切割，使DNA发生双链断裂损伤；所述LpCas9蛋白具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；所述sgRNA具有SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列，或者基于SEQ ID NO:2改造的sgRNA序列。本发明能有效解决spCas9应用于副干酪乳杆菌上存在的异源密码子偏好性和细胞毒性的问题；通过导入人为设计的CRISPR RNA和修复模板在细胞中或体外进行基因编辑，有效解决了菌株因自身特性或携带代表质粒较大等原因所导致的转化效率过低的问题，同时其在基因编辑领域具有广阔的应用前景。