公开(公告)号：CN114752549A

公开(公告)日：2022-07-15

申请号：CN202210510142.7

申请日：2022-05-11

Applicant: 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所

Inventor： 卢曾奎 ,  陈博雯 ,  窦晓宁 ,  李建烨 ,  岳耀敬 ,  袁超 ,  郭婷婷 ,  刘建斌 ,  杨博辉

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明属于动物细胞培养技术领域，本发明提供了一种绵羊原代肝细胞分离培养方法。本发明方法包括采用直接破碎法或酶消化法对绵羔羊肝脏组织进行处理，得肝细胞悬液；将上述所得肝细胞悬液离心后弃上清，得沉淀a；将上述所得沉淀a与红细胞裂解液混合，静置后离心弃上清，得沉淀b；将上述所得沉淀b与完全培养基混合，置于鼠尾胶原包被的6孔板中培养，得肝细胞培养物；弃去上述所得肝细胞培养物中的未贴壁肝细胞和死细胞，将剩余的贴壁细胞与完全培养基混合进行培养等步骤。本发明方法制备得到的绵羊原代肝细胞增殖稳定，形态特征典型，具有传代和增殖能力。

公开(公告)号：CN114752549B

公开(公告)日：2022-11-25

申请号：CN202210510142.7

申请日：2022-05-11

Applicant: 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所

Inventor： 卢曾奎 ,  陈博雯 ,  窦晓宁 ,  李建烨 ,  岳耀敬 ,  袁超 ,  郭婷婷 ,  刘建斌 ,  杨博辉

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明属于动物细胞培养技术领域，本发明提供了一种绵羊原代肝细胞分离培养方法。本发明方法包括采用直接破碎法或酶消化法对绵羔羊肝脏组织进行处理，得肝细胞悬液；将上述所得肝细胞悬液离心后弃上清，得沉淀a；将上述所得沉淀a与红细胞裂解液混合，静置后离心弃上清，得沉淀b；将上述所得沉淀b与完全培养基混合，置于鼠尾胶原包被的6孔板中培养，得肝细胞培养物；弃去上述所得肝细胞培养物中的未贴壁肝细胞和死细胞，将剩余的贴壁细胞与完全培养基混合进行培养等步骤。本发明方法制备得到的绵羊原代肝细胞增殖稳定，形态特征典型，具有传代和增殖能力。