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公开(公告)号：CN101213954B
公开(公告)日：2010-09-22
申请号：CN200810056483.1
申请日：2008-01-18
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一种用于获得免疫耐受禽类的方法，其是在禽类胚胎发育早期，将外源抗原引入到禽类胚胎中，诱导禽类免疫系统对注入的外源蛋白发生免疫宽容。采用本发明的方法，将外源抗原注射到鸡的胚胎中，可以在胚胎期成功诱导鸡免疫系统对注入的外源蛋白发生免疫宽容，进而获得了免疫耐受的雏鸡个体，其耐受率高达53.8％，免疫耐受的效果可以维持2个月以上，孵化率可达65％。
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公开(公告)号：CN100528969C
公开(公告)日：2009-08-19
申请号：CN200610169801.6
申请日：2006-12-28
Applicant: 中国农业大学
IPC: C09B61/00
Abstract: 本发明涉及一种从乌骨鸡中提取黑色素的方法，包括如下步骤：乌骨鸡切碎后用1～10M的盐酸溶液清洗5～30分钟，浸入液氮0.5～5分钟，将浸入液氮后的乌骨鸡粉碎成60～100目粉末，转入索氏提取器中，用1～10M的盐酸溶液热回流1.5～3小时，浸提液冷却至0～5℃析出沉淀，分别加入与浸提液等体积的丙酮蒸馏水洗涤3～4遍，干燥即得。本发明所述的方法通过液氮冷冻后粉碎的方法，在不改变黑色素物理化学性质的前提下，能充分有效的破坏组织中黑色素细胞的结构，有利于黑色素的快速释放，减短了提取黑色素所用的时间，保持了乌骨鸡黑色素近乎完整的形态结构。
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公开(公告)号：CN103013909A
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201210516784.4
申请日：2012-12-05
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N5/0735
Abstract: 本发明涉及一种高效分离禽类胚胎干细胞的方法。该方法包括以下步骤：1)将胚盘从种蛋中取出；2)将取出的胚盘消化、清洗并去除卵黄；3)将消化后的胚盘细胞进行原代培养；4)从原代培养的胚盘细胞中富集纯化胚胎干细胞。本发明的方法简单易行，准确有效，可重复性高并且成本低廉，整个分离培养体系中的设备或试剂均可自制或商品化，无需制备饲养层，无需酶消化及相关处理，无需血清，即使从一枚种蛋中也可分离培养出大约2万个纯化过的胚胎干细胞，可以供体外转染进行基因改造或表观修饰，为转基因家禽的制备夯实了技术基础，为生物反应器的发展和实现巨大商业化价值安装了助推加速器，具有极大的科研价值和推广意义。
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公开(公告)号：CN101720716B
公开(公告)日：2011-10-05
申请号：CN200810225332.4
申请日：2008-10-30
Applicant: 中国农业大学
IPC: A01K67/02
Abstract: 本发明公开了一种用于培育转基因禽的种蛋孵化方法。该方法是将蛋壳的赤道上有被封闭的开孔的种蛋，按照使被封闭的开孔朝上并处于所述种蛋的最高处的方式放置，进行静置孵化；至所述种蛋内的绒毛膜发育到包裹种蛋内的全部内容物时，再将所述种蛋大头朝上小头朝下放置，进行翻蛋孵化；然后再进行静置孵化直至出雏。本发明方法从根本上克服了传统方法中蛋清外溢的缺陷，保证了孵化过程中蛋内的水分和营养平衡，减少了由于蛋清外溢而造成鸡胚死亡的损失，保证了转基因鸡胚的正常发育，提高了转基因鸡胚的孵化率。本发明方法步骤简单，可操作性强，并且适合于其它开窗法转基因操作后的禽类种蛋的孵化，如鹌鹑，家鸭等。因此，本发明方法具有重要的应用价值，适合于推广。
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公开(公告)号：CN102703449B
公开(公告)日：2013-12-25
申请号：CN201210160720.5
申请日：2009-10-13
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/88 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种抑制鸡肌肉生成抑制素基因表达的siRNA及其应用。本发明提供了作用于肌肉生成抑制素基因的小干扰RNA，为如下a)或b)或c)：a)由序列表的序列1和序列表的序列2组成的双链RNA；b)由序列表的序列3和序列表的序列4组成的双链RNA；c)由序列表的序列5和序列表的序列6组成的双链RNA。本发明获得了有效抑制鸡MSTN基因表达的小干扰RNA，在分子生物学上通过实时荧光定量PCR证明它有效的降低了MSTN的表达；在胚胎学上通过显微注射试验成功获得了骨骼肌明显增大的雏鸡。以上结果说明，本发明的小干扰RNA可用于鸡的育种，从而提高肉鸡尤其是优质鸡的产肉量。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102041257A
公开(公告)日：2011-05-04
申请号：CN200910235403.3
申请日：2009-10-13
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了一种抑制鸡肌肉生成抑制素基因表达的siRNA及其应用。本发明提供了作用于肌肉生成抑制素基因的小干扰RNA，为如下a)或b)或c)：a)由序列表的序列1和序列表的序列2组成的双链RNA；b)由序列表的序列3和序列表的序列4组成的双链RNA；c)由序列表的序列5和序列表的序列6组成的双链RNA。本发明获得了有效抑制鸡MSTN基因表达的小干扰RNA，在分子生物学上通过实时荧光定量PCR证明它有效的降低了MSTN的表达；在胚胎学上通过显微注射试验成功获得了骨骼肌明显增大的雏鸡。以上结果说明，本发明的小干扰RNA可用于鸡的育种，从而提高肉鸡尤其是优质鸡的产肉量。
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公开(公告)号：CN101720716A
公开(公告)日：2010-06-09
申请号：CN200810225332.4
申请日：2008-10-30
Applicant: 中国农业大学
IPC: A01K67/02
Abstract: 本发明公开了一种用于培育转基因禽的种蛋孵化方法。该方法是将蛋壳的赤道上有被封闭的开孔的种蛋，按照使被封闭的开孔朝上并处于所述种蛋的最高处的方式放置，进行静置孵化；至所述种蛋内的绒毛膜发育到包裹种蛋内的全部内容物时，再将所述种蛋大头朝上小头朝下放置，进行翻蛋孵化；然后再进行静置孵化直至出雏。本发明方法从根本上克服了传统方法中蛋清外溢的缺陷，保证了孵化过程中蛋内的水分和营养平衡，减少了由于蛋清外溢而造成鸡胚死亡的损失，保证了转基因鸡胚的正常发育，提高了转基因鸡胚的孵化率。本发明方法步骤简单，可操作性强，并且适合于其它开窗法转基因操作后的禽类种蛋的孵化，如鹌鹑，家鸭等。因此，本发明方法具有重要的应用价值，适合于推广。
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公开(公告)号：CN103013909B
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201210516784.4
申请日：2012-12-05
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N5/0735
Abstract: 本发明涉及一种高效分离禽类胚胎干细胞的方法。该方法包括以下步骤：1)将胚盘从种蛋中取出；2)将取出的胚盘消化、清洗并去除卵黄；3)将消化后的胚盘细胞进行原代培养；4)从原代培养的胚盘细胞中富集纯化胚胎干细胞。本发明的方法简单易行，准确有效，可重复性高并且成本低廉，整个分离培养体系中的设备或试剂均可自制或商品化，无需制备饲养层，无需酶消化及相关处理，无需血清，即使从一枚种蛋中也可分离培养出大约2万个纯化过的胚胎干细胞，可以供体外转染进行基因改造或表观修饰，为转基因家禽的制备夯实了技术基础，为生物反应器的发展和实现巨大商业化价值安装了助推加速器，具有极大的科研价值和推广意义。
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公开(公告)号：CN102703449A
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201210160720.5
申请日：2009-10-13
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/88 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种抑制鸡肌肉生成抑制素基因表达的siRNA及其应用。本发明提供了作用于肌肉生成抑制素基因的小干扰RNA，为如下a)或b)或c)：a)由序列表的序列1和序列表的序列2组成的双链RNA；b)由序列表的序列3和序列表的序列4组成的双链RNA；c)由序列表的序列5和序列表的序列6组成的双链RNA。本发明获得了有效抑制鸡MSTN基因表达的小干扰RNA，在分子生物学上通过实时荧光定量PCR证明它有效的降低了MSTN的表达；在胚胎学上通过显微注射试验成功获得了骨骼肌明显增大的雏鸡。以上结果说明，本发明的小干扰RNA可用于鸡的育种，从而提高肉鸡尤其是优质鸡的产肉量。
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公开(公告)号：CN101157804A
公开(公告)日：2008-04-09
申请号：CN200610169801.6
申请日：2006-12-28
Applicant: 中国农业大学
IPC: C09B61/00
Abstract: 本发明涉及一种从乌骨鸡中提取黑色素的方法，包括如下步骤：乌骨鸡切碎后用1～10M的盐酸溶液清洗5～30分钟，浸入液氮0.5～5分钟，将浸入液氮后的乌骨鸡粉碎成60～100目粉末，转入索氏提取器中，用1～10M的盐酸溶液热回流1.5～3小时，浸提液冷却至0～5℃析出沉淀，分别加入与浸提液等体积的丙酮蒸馏水洗涤3～4遍，干燥即得。本发明所述的方法通过液氮冷冻后粉碎的方法，在不改变黑色素物理化学性质的前提下，能充分有效的破坏组织中黑色素细胞的结构，有利于黑色素的快速释放，减短了提取黑色素所用的时间，保持了乌骨鸡黑色素近乎完整的形态结构。
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