公开(公告)号：CN105062971A

公开(公告)日：2015-11-18

申请号：CN201510450630.3

申请日：2015-07-28

Applicant: 中南民族大学

Inventor： 阳小飞 ,  蒋伟 ,  陈健 ,  王明明 ,  龚吉红 ,  梅颖

IPC: C12N5/0793 ,  C12N5/071 ,  G01N33/533

Abstract: 本发明提供了一种用于神经突触形成分析中的细胞共培养方法，包括以下步骤：将传代培养的非神经元细胞即HEK293 T细胞加入到体外环境中24孔原代培养的神经元细胞中，混合后培养24小时以上；采用PEI转染法，转染HEK293 T细胞，每个孔中所转染的外源基因均不相同，被转染后的HEK293 T细胞过表达外源基因，在此条件下进行共培养48小时以上；免疫染色突触前的标记蛋白synapsin，从而判断每一孔中是否形成突触结构。本发明所提供的共培养方法解决了现有技术中的不足，该方法操作简单、方便，成本相对较低，耗时短，可以很好的筛选基因及验证基因功能，可以广泛用于实验室。

公开(公告)号：CN105062971B

公开(公告)日：2018-07-13

申请号：CN201510450630.3

申请日：2015-07-28

Applicant: 中南民族大学

Inventor： 阳小飞 ,  蒋伟 ,  陈健 ,  王明明 ,  龚吉红 ,  梅颖

IPC: C12N5/0793 ,  C12N5/071 ,  G01N33/533

Abstract: 本发明提供了一种用于神经突触形成分析中的细胞共培养方法，包括以下步骤：将传代培养的非神经元细胞即HEK293 T细胞加入到体外环境中24孔原代培养的神经元细胞中，混合后培养24小时以上；采用PEI转染法，转染HEK293 T细胞，每个孔中所转染的外源基因均不相同，被转染后的HEK293 T细胞过表达外源基因，在此条件下进行共培养48小时以上；免疫染色突触前的标记蛋白synapsin，从而判断每一孔中是否形成突触结构。本发明所提供的共培养方法解决了现有技术中的不足，该方法操作简单、方便，成本相对较低，耗时短，可以很好的筛选基因及验证基因功能，可以广泛用于实验室。