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公开(公告)号：CN107864759A
公开(公告)日：2018-04-03
申请号：CN201711045909.9
申请日：2017-10-31
Applicant: 中南林业科技大学
CPC classification number: A01G17/005
Abstract: 本发明提供一种锥栗的嫁接方法，包括以下步骤：接穗的选择：选择锥栗的结果母枝或者发育枝作为接穗；接穗的贮藏：将所述接穗下方的2/3埋于沙床中，上方的1/3露出，所述沙床设置于地窖或室内阴凉湿润的地方；砧木的选择：保留3～4个分枝的主枝作为砧木，其余分支从基部锯掉；嫁接：采用撕皮嵌合嫁接法对所述接穗和所述砧木进行嫁接。本发明提供的锥栗的嫁接方法，可以使锥栗嫁接成活率达到95％以上，而常规春季嫁接方法锥栗嫁接成活率一般为80％左右；嫁接方法易行，后期管理简单，嫁接后生长快，成形早，次年即可结果，可达到品种改换而迅速提高产量的目的；生产者易于接受，便于推广应用。
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公开(公告)号：CN111705033B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN202010651889.5
申请日：2020-07-08
Applicant: 中南林业科技大学
Abstract: 本发明公开了一种油茶愈伤悬浮培养及原生质体分离的方法，属于植物组织培养领域。本发明油茶愈伤悬浮培养的方法，以材料数量巨大的茎段作为外植体，将诱导得到的致密愈伤组织在含NAA、2,4‑D、6‑BA的培养基上继代培养得到了容易建立悬浮细胞系的疏松颗粒状愈伤组织；该方法解决了现有技术诱导的油茶茎段愈伤组织较为致密、不适合进行悬浮细胞培养的问题。本发明油茶原生质体分离的方法，将油茶愈伤原生质体悬浮于密度较大的蔗糖溶液中，通过离心使密度较大的碎片等杂质下沉、油茶原生质体上浮，从而实现其分离纯化；该方法解决了油茶愈伤原生质体无法通过离心收集纯化的问题，其纯化效率高，获得的原生质体清晰可见、纯度高。
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公开(公告)号：CN118667746A
公开(公告)日：2024-09-20
申请号：CN202410866857.5
申请日：2024-06-28
Applicant: 中南林业科技大学
Abstract: 本发明公开了一种油茶胚性愈伤组织原生质体分离与体细胞杂交的方法，属于植物生物技术领域。本发明方法包括以下步骤：将油茶胚性愈伤组织进行0～48h黑暗预处理，真空气压负0.09～0MPa下抽真空0～15min，加入含纤维素酶R‑10、离析酶R‑10的酶液进行酶解；酶解后的溶液过滤后离心去上清，用W缓冲液对原生质体进行清洗和重悬，静置去上清，得到油茶胚性愈伤组织原生质体；将油茶胚性愈伤组织原生质体和油茶叶肉原生质体调整为两种原生质体数量相同的混合液，加入等体积的融合剂，诱导原生质体融合。通过本发明获得的原生质体产量达3.16×106个/g·FW、活力高达93％以上，原生质体融合率达13.81％。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113549591B
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202110911066.6
申请日：2021-08-10
Applicant: 中南林业科技大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明公开了一种油茶叶肉原生质体分离与纯化方法，属于植物生物技术领域。本发明方法包括以下步骤：对油茶组培苗进行22～32h黑暗预处理，采集组培苗完全展开的叶片；去掉采集叶片的主脉和叶缘，切成叶条加入到含EME培养基的无菌瓶中，盖上封瓶膜，负压下抽真空10min～1h；吸出EME培养基、加入酶液；无菌瓶用封口膜封口后酶解6～14h；将酶解后的溶液通过无菌筛过滤，滤液离心后去上清，用W缓冲液对原生质体进行清洗和重悬，冰上静置沉淀后，吸去上清，得到纯净的原生质体。通过本发明方法获得的原生质体形态完整、稳定，产量高达2.8×107个/g·FW，原生质体活力高达91.7％以上。
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公开(公告)号：CN111705033A
公开(公告)日：2020-09-25
申请号：CN202010651889.5
申请日：2020-07-08
Applicant: 中南林业科技大学
Abstract: 本发明公开了一种油茶愈伤悬浮培养及原生质体分离的方法，属于植物组织培养领域。本发明油茶愈伤悬浮培养的方法，以材料数量巨大的茎段作为外植体，将诱导得到的致密愈伤组织在含NAA、2,4-D、6-BA的培养基上继代培养得到了容易建立悬浮细胞系的疏松颗粒状愈伤组织；该方法解决了现有技术诱导的油茶茎段愈伤组织较为致密、不适合进行悬浮细胞培养的问题。本发明油茶原生质体分离的方法，将油茶愈伤原生质体悬浮于密度较大的蔗糖溶液中，通过离心使密度较大的碎片等杂质下沉、油茶原生质体上浮，从而实现其分离纯化；该方法解决了油茶愈伤原生质体无法通过离心收集纯化的问题，其纯化效率高，获得的原生质体清晰可见、纯度高。
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公开(公告)号：CN118892080A
公开(公告)日：2024-11-05
申请号：CN202411039606.6
申请日：2024-07-31
Applicant: 中南林业科技大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种利用秋水仙素诱导小果油茶染色体纯合加倍的方法，属于植物生物技术领域。本发明方法包括以下步骤：(1)小果油茶幼果经过清洗、消毒、剥去果皮后，取幼胚接种到胚性愈伤组织诱导培养基中诱导胚性愈伤组织40～60d；(2)将步骤(1)获得的黄白色小型颗粒状胚性愈伤组织接种到含秋水仙素的诱导培养基中，于黑暗环境下培养10～20d进行加倍诱导处理；(3)将步骤(2)中经加倍诱导处理后的愈伤组织接种到不定芽诱导培养基中进行不定芽诱导，于光照条件下培养150d后，通过倍性鉴定，得到加倍的组培苗。本发明以小果油茶为材料，建立了一套诱导效率高、嵌合体率低、能快速成苗的多倍体诱导方案。
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公开(公告)号：CN118318730A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202410622419.4
申请日：2024-05-20
Applicant: 中南林业科技大学
Abstract: 本发明公开了一种油茶辐射花粉授粉诱导单倍体的方法，属于植物组织培养领域。本发明方法包括以下步骤：对油茶花粉进行辐射处理；测定辐射花粉的活力与萌发率；利用辐射花粉进行杂交授粉；选取授粉后的幼胚接种至培养基进行胚抢救；对胚抢救获得的植株进行倍性鉴定筛选出单倍体。本发明创制了一种油茶单倍体培育的新途径，适用于油茶组和短柱茶组植物，可应用于油茶品种的选育，加快油茶育种进程。
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公开(公告)号：CN113549591A
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN202110911066.6
申请日：2021-08-10
Applicant: 中南林业科技大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明公开了一种油茶叶肉原生质体分离与纯化方法，属于植物生物技术领域。本发明方法包括以下步骤：对油茶组培苗进行22～32h黑暗预处理，采集组培苗完全展开的叶片；去掉采集叶片的主脉和叶缘，切成叶条加入到含EME培养基的无菌瓶中，盖上封瓶膜，负压下抽真空10min～1h；吸出EME培养基、加入酶液；无菌瓶用封口膜封口后酶解6～14h；将酶解后的溶液通过无菌筛过滤，滤液离心后去上清，用W缓冲液对原生质体进行清洗和重悬，冰上静置沉淀后，吸去上清，得到纯净的原生质体。通过本发明方法获得的原生质体形态完整、稳定，产量高达2.8×107个/g·FW，原生质体活力高达91.7％以上。
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