公开(公告)号：CN106350577A

公开(公告)日：2017-01-25

申请号：CN201610824309.1

申请日：2016-09-14

Applicant: 东南大学

Inventor： 卫伟 ,  陈昌慧 ,  刘松琴

IPC: C12Q1/48

CPC classification number: C12Q1/48

Abstract: 本发明公开了基于水溶性阳离子聚合物的荧光可视化定量检测端粒酶活性的方法，包括以下步骤：1）在缓冲溶液中加入端粒酶识别序列作为引物；2）端粒酶对引物进行扩增，形成的富G序列；3）在钾离子的作用下富G序列形成G-四链体；4）加入水溶性阳离子聚合物发生荧光能量共振转移；5）利用紫外可见灯观察颜色变化，并用荧光分光光度计对溶液的荧光强度进行检测。本发明利用阳离子聚合物和G-四链体上标记的荧光素FAM发生荧光能量共振转移，在紫外灯下溶液颜色由蓝色变为绿色，颜色变化明显，可对端粒酶活性进行半定量检测；用荧光分光光度计精确测量FAM荧光强度变化，实现对端粒酶活性的准确定量，方法灵敏度高。

公开(公告)号：CN106434851A

公开(公告)日：2017-02-22

申请号：CN201610824782.X

申请日：2016-09-14

Applicant: 东南大学

Inventor： 卫伟 ,  徐晓林 ,  范佳慧 ,  陈昌慧 ,  刘松琴

IPC: C12Q1/48

CPC classification number: C12Q1/485 ,  C12Q2326/12

Abstract: 本发明公开一种基于hemin-石墨烯复合材料的端粒酶活性检测方法。本方法步骤如下：1）合成hemin-石墨烯复合材料H-GNs；2）细胞的培养以及端粒酶的提取得到裂解后的细胞溶液；3）将裂解后的细胞溶液加入端粒酶扩增缓冲溶液，对端粒酶引物进行扩增，得到重复的富G序列的产物溶液；4）将hemin-石墨烯复合材料H-GNs与得到重复的富G序列的产物溶液作用，加入盐溶液，观察H-GNs的团聚变化得到产物，并利用紫外–可见光谱仪对产物进行检测。本发明利用了纳米材料的特性而且无需标记DNA探针，简化了检测方法，避免了标记DNA探针而导致检测成本高、操作烦琐，重现性差的缺陷。本发明具有成本低、快速、简便、灵敏度高的优点。

公开(公告)号：CN106350577B

公开(公告)日：2019-07-12

申请号：CN201610824309.1

申请日：2016-09-14

Applicant: 东南大学

Inventor： 卫伟 ,  陈昌慧 ,  刘松琴

IPC: C12Q1/48

Abstract: 本发明公开了基于水溶性阳离子聚合物的荧光可视化定量检测端粒酶活性的方法，包括以下步骤：1）在缓冲溶液中加入端粒酶识别序列作为引物；2）端粒酶对引物进行扩增，形成的富G序列；3）在钾离子的作用下富G序列形成G‑四链体；4）加入水溶性阳离子聚合物发生荧光能量共振转移；5）利用紫外可见灯观察颜色变化，并用荧光分光光度计对溶液的荧光强度进行检测。本发明利用阳离子聚合物和G‑四链体上标记的荧光素FAM发生荧光能量共振转移，在紫外灯下溶液颜色由蓝色变为绿色，颜色变化明显，可对端粒酶活性进行半定量检测；用荧光分光光度计精确测量FAM荧光强度变化，实现对端粒酶活性的准确定量，方法灵敏度高。

公开(公告)号：CN106442659B

公开(公告)日：2018-12-14

申请号：CN201610824784.9

申请日：2016-09-14

Applicant: 东南大学

Inventor： 卫伟 ,  范佳慧 ,  张雪红 ,  徐晓林 ,  陈昌慧 ,  刘松琴

IPC: G01N27/26

Abstract: 本发明公开基于苯胺沉积的电化学传感电极定量检测8‑OhdG活性的方法，包括以下步骤：带有巯基的DNA四面体结构的制备；带有巯基的DNA四面体结构在金电极上的修饰得到顶端连接8‑OHdG适体的巯基的DNA四面体结构的电极；G‑四链体电极的形成；聚苯胺沉积的电化学传感电极；利用电化学方法对产生的聚苯胺的电流信号进行检测从而检测8‑OhdG的活性。本发明极大地提高了8‑OHdG的检测灵敏度。与传统的以8‑OHdG还原峰为信号的电化学检测方法相比，检测限降低2个数量级。本发明无需制备复杂材料以及标记DNA探针，可避免材料制备及标记DNA探针而导致检测成本高、操作烦琐，重现性差的缺陷。本发明具有成本低、快速、简便、灵敏度高的优点。

公开(公告)号：CN106442659A

公开(公告)日：2017-02-22

申请号：CN201610824784.9

申请日：2016-09-14

Applicant: 东南大学

Inventor： 卫伟 ,  范佳慧 ,  张雪红 ,  徐晓林 ,  陈昌慧 ,  刘松琴

IPC: G01N27/26

CPC classification number: G01N27/26

Abstract: 本发明公开基于苯胺沉积的电化学传感电极定量检测8-OhdG活性的方法，包括以下步骤：带有巯基的DNA四面体结构的制备；带有巯基的DNA四面体结构在金电极上的修饰得到顶端连接8-OHdG适体的巯基的DNA四面体结构的电极；G-四链体电极的形成；聚苯胺沉积的电化学传感电极；利用电化学方法对产生的聚苯胺的电流信号进行检测从而检测8-OhdG的活性。本发明极大地提高了8-OHdG的检测灵敏度。与传统的以8-OHdG还原峰为信号的电化学检测方法相比，检测限降低2个数量级。本发明无需制备复杂材料以及标记DNA探针，可避免材料制备及标记DNA探针而导致检测成本高、操作烦琐，重现性差的缺陷。本发明具有成本低、快速、简便、灵敏度高的优点。