公开(公告)号：CN104597253A

公开(公告)日：2015-05-06

申请号：CN201510053654.5

申请日：2015-02-02

Applicant: 东南大学

Inventor： 刘松琴 ,  赵芳 ,  卢菊生 ,  张雪红 ,  尚秋伟

IPC: G01N33/68

CPC classification number: G01N33/68 ,  G01N21/76

Abstract: 本发明公开了一种采用大豆过氧化物酶偶联蛋白分子制备生物探针的方法，包括如下步骤：步骤一、利用氧化剂氧化大豆过氧化物酶中的糖苷键；步骤二、将蛋白与步骤一得到的大豆过氧化物酶反应形成希夫氏碱，形成稳定的酶-蛋白分子；步骤三、提纯步骤二得到的酶-蛋白分子，得到所述生物探针。本发明使用大豆过氧化物酶代替现有技术中的HRP作为标记酶制备生物探针，一方面此酶的热稳定性比HRP高，发光信号比HRP强，可以持续较长时间的强化学发光，检测灵敏度能够获得大大提高。其次，本发明制备的五种生物探针，可用于多项蛋白的检测，同时由于大豆过氧化物酶原料来源广，价格低廉，其产业化研究具有广泛的应用前景和重要的意义。

公开(公告)号：CN106442659B

公开(公告)日：2018-12-14

申请号：CN201610824784.9

申请日：2016-09-14

Applicant: 东南大学

Inventor： 卫伟 ,  范佳慧 ,  张雪红 ,  徐晓林 ,  陈昌慧 ,  刘松琴

IPC: G01N27/26

Abstract: 本发明公开基于苯胺沉积的电化学传感电极定量检测8‑OhdG活性的方法，包括以下步骤：带有巯基的DNA四面体结构的制备；带有巯基的DNA四面体结构在金电极上的修饰得到顶端连接8‑OHdG适体的巯基的DNA四面体结构的电极；G‑四链体电极的形成；聚苯胺沉积的电化学传感电极；利用电化学方法对产生的聚苯胺的电流信号进行检测从而检测8‑OhdG的活性。本发明极大地提高了8‑OHdG的检测灵敏度。与传统的以8‑OHdG还原峰为信号的电化学检测方法相比，检测限降低2个数量级。本发明无需制备复杂材料以及标记DNA探针，可避免材料制备及标记DNA探针而导致检测成本高、操作烦琐，重现性差的缺陷。本发明具有成本低、快速、简便、灵敏度高的优点。

公开(公告)号：CN106442659A

公开(公告)日：2017-02-22

申请号：CN201610824784.9

申请日：2016-09-14

Applicant: 东南大学

Inventor： 卫伟 ,  范佳慧 ,  张雪红 ,  徐晓林 ,  陈昌慧 ,  刘松琴

IPC: G01N27/26

CPC classification number: G01N27/26

Abstract: 本发明公开基于苯胺沉积的电化学传感电极定量检测8-OhdG活性的方法，包括以下步骤：带有巯基的DNA四面体结构的制备；带有巯基的DNA四面体结构在金电极上的修饰得到顶端连接8-OHdG适体的巯基的DNA四面体结构的电极；G-四链体电极的形成；聚苯胺沉积的电化学传感电极；利用电化学方法对产生的聚苯胺的电流信号进行检测从而检测8-OhdG的活性。本发明极大地提高了8-OHdG的检测灵敏度。与传统的以8-OHdG还原峰为信号的电化学检测方法相比，检测限降低2个数量级。本发明无需制备复杂材料以及标记DNA探针，可避免材料制备及标记DNA探针而导致检测成本高、操作烦琐，重现性差的缺陷。本发明具有成本低、快速、简便、灵敏度高的优点。