公开(公告)号：CN113430192A

公开(公告)日：2021-09-24

申请号：CN202010637504.X

申请日：2020-07-05

Applicant: 东北林业大学

Inventor： 曾凡锁 ,  齐凤慧 ,  岳国华 ,  田红梅 ,  郭樱杰 ,  肖英 ,  刘华领 ,  詹亚光

IPC: C12N15/01 ,  C12N5/04

Abstract: 本发明公开了一种建立水曲柳悬浮细胞诱变技术体系的方法，以水曲柳种子下胚轴为外植体，使用添加1mg/L 6‑BA与4mg/L TDZ的WPM培养基诱导愈伤组织，再使用添加2mg/L 6‑BA与4mg/L TDZ的WPM培养基对愈伤组织继代培养，将获得的愈伤组织接种至液体培养基中获得悬浮细胞系。通过化学诱变剂诱变处理悬浮细胞，然后进行非生物胁迫处理筛选诱变细胞细胞。使用0.10％(V/V)甲基磺酸乙酯(EMS)或10μmol/L zebularine诱变处理悬浮细胞14d，细胞鲜重达到最大值；分别使用100mmol/L氯化钠、75mmol/L甘露醇和40μmol/L氯化镉胁迫处理水曲柳悬浮细胞，获得相应抗性的水曲柳诱变细胞系。该方法的建立能够丰富水曲柳的种质资源，对化学诱变在林木育种方面的应用具有指导意义，为进一步通过诱变获得水曲柳优良品系和新品种提供了技术支撑。