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公开(公告)号：CN107271667B
公开(公告)日：2019-01-22
申请号：CN201710415171.4
申请日：2017-06-05
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种蓝舌病病毒型特异性竞争ELISA检测试剂盒及其应用。所述试剂盒包括以下两组组分：组分I中包括包被蓝舌病病毒抗原I的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体I，所述的单克隆抗体I由杂交瘤细胞株8B3G11分泌产生；组分II中包括包被蓝舌病病毒抗原II的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体II，所述的单克隆抗体II由杂交瘤细胞株8B5D4分泌产生。本发明利用制备的两株8型BTV VP2单克隆抗体8B5D4以及8B3G11建立了蓝舌病病毒型特异性检测的联合竞争ELISA检测方法，该检测方法短时间内可以用于初步区分不同型蓝舌病感染的动物血清，实验条件要求低，适合于大规模的BTV血清抗体检查。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106190986A
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201610533234.1
申请日：2016-07-07
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/569
CPC classification number: C07K16/10
Abstract: 本发明公开了一种抗蓝舌病病毒血清4型VP2蛋白的单克隆抗体，分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株及用途。本发明以pET-28a为载体构建表达的VP2-4B蛋白作为免疫原免疫小鼠，以pMAL-c5x为载体构建表达的VP2-4B蛋白作为抗原，筛选阳性杂交瘤细胞，最终筛选得到一株能够稳定分泌抗BTV4-VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，实验证明，该杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体BTV4-VP2-1B6能够与BTV4-VP2蛋白发生特异性反应，而与其他血清型VP2蛋白不发生反应。本发明的单克隆抗体BTV4-VP2-1B6为建立BTV4与其他血清型的血清学鉴别诊断方法奠定了基础。
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公开(公告)号：CN106749557B
公开(公告)日：2020-02-11
申请号：CN201611112486.3
申请日：2016-12-06
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K14/14 , C12N15/46 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种蓝舌病病毒VP7蛋白群特异性抗原表位多肽及其应用。本发明使用前期制备的蓝舌病病毒VP7蛋白单克隆抗体3H7细胞株，利用噬菌体展示肽技术对3H7细胞株识别的抗原表位进行筛选。经过3轮淘选后进行测序，结果表明3H7细胞株识别的抗原表位为QYHAM。进一步合成短肽利用间接ELISA对3H7细胞株进行鉴定，实验结果表明3H7细胞株识别的抗原表位为QYHAM；氨基酸序列比对显示该表位在不同来源的25型蓝舌病病毒毒株间保守。本发明鉴定了蓝舌病病毒VP7蛋白群特异性抗原表位多肽，为建立针对蓝舌病病毒的竞争ELISA方法奠定了基础，鉴定出的抗原表位也可应用于今后疫苗设计中，对于我国蓝舌病的防治具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN106749557A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611112486.3
申请日：2016-12-06
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K14/14 , C12N15/46 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种蓝舌病病毒VP7蛋白群特异性抗原表位多肽及其应用。本发明使用前期制备的蓝舌病病毒VP7蛋白单克隆抗体3H7细胞株，利用噬菌体展示肽技术对3H7细胞株识别的抗原表位进行筛选。经过3轮淘选后进行测序，结果表明3H7细胞株识别的抗原表位为QYHAM。进一步合成短肽利用间接ELISA对3H7细胞株进行鉴定，实验结果表明3H7细胞株识别的抗原表位为QYHAM；氨基酸序列比对显示该表位在不同来源的25型蓝舌病病毒毒株间保守。本发明鉴定了蓝舌病病毒VP7蛋白群特异性抗原表位多肽，为建立针对蓝舌病病毒的竞争ELISA方法奠定了基础，鉴定出的抗原表位也可应用于今后疫苗设计中，对于我国蓝舌病的防治具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN106190986B
公开(公告)日：2019-05-17
申请号：CN201610533234.1
申请日：2016-07-07
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种抗蓝舌病病毒血清4型VP2蛋白的单克隆抗体，分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株及用途。本发明以pET‑28a为载体构建表达的VP2‑4B蛋白作为免疫原免疫小鼠，以pMAL‑c5x为载体构建表达的VP2‑4B蛋白作为抗原，筛选阳性杂交瘤细胞，最终筛选得到一株能够稳定分泌抗BTV4‑VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，实验证明，该杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体BTV4‑VP2‑1B6能够与BTV4‑VP2蛋白发生特异性反应，而与其他血清型VP2蛋白不发生反应。本发明的单克隆抗体BTV4‑VP2‑1B6为建立BTV4与其他血清型的血清学鉴别诊断方法奠定了基础。
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公开(公告)号：CN107271667A
公开(公告)日：2017-10-20
申请号：CN201710415171.4
申请日：2017-06-05
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/577
CPC classification number: G01N33/56983 , G01N33/558 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种蓝舌病病毒型特异性竞争ELISA检测试剂盒及其应用。所述试剂盒包括以下两组组分：组分I中包括包被蓝舌病病毒抗原I的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体I，所述的单克隆抗体I由杂交瘤细胞株8B3G11分泌产生；组分II中包括包被蓝舌病病毒抗原II的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体II，所述的单克隆抗体II由杂交瘤细胞株8B5D4分泌产生。本发明利用制备的两株8型BTV VP2单克隆抗体8B5D4以及8B3G11建立了蓝舌病病毒型特异性检测的联合竞争ELISA检测方法，该检测方法短时间内可以用于初步区分不同型蓝舌病感染的动物血清，实验条件要求低，适合于大规模的BTV血清抗体检查。
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