公开(公告)号：CN102121013B

公开(公告)日：2013-01-09

申请号：CN200910073285.0

申请日：2009-11-27

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 王君伟 ,  魏双施 ,  马波 ,  高明春 ,  王巍

IPC: C12N15/21 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 可高效表达的成熟鸡α干扰素多肽的制备方法，它涉及鸡α干扰素多肽的制备方法。它解决了现有重组鸡α干扰素基因不能在大肠杆菌中表达或者表达量很低，以及重组鸡α干扰素在制备中复性效果差的问题。方法：一、将成熟鸡α干扰素基因中的稀有密码子全部同义替换为大肠杆菌偏好性密码子，经合成得优化后的鸡α干扰素基因；二、克隆到表达载体中，然后转化到大肠杆菌感受态细胞中，经筛选后诱导表达，离心后得湿菌，再进行包涵体的提取和溶解；三、进行复性及纯化，收集蛋白。本发明成熟鸡α干扰素基因能在大肠杆菌中高效表达，表达量可达总菌体蛋白的30％，复性效果好。

公开(公告)号：CN101603043A

公开(公告)日：2009-12-16

申请号：CN200910072332.X

申请日：2009-06-19

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 王君伟 ,  王巍 ,  马波 ,  高明春

IPC: C12N15/21

Abstract: 一种鹅干扰素－α多肽基因，它涉及一种鹅干扰素－α基因。它解决了目前天然的鹅干扰素－α基因在大肠杆菌内不能表达的问题。本发明鹅干扰素－α多肽基因序列如SEQ ID NO：1所示。本发明木糖还原酶基因序全长505bp，10bp处有起始密码子ATG，496bp处有终止密码子TAA，有489bp完整的开放阅读框。本发明鹅干扰素－α多肽基因能够在大肠杆菌表达系统中高效表达鹅干扰素－α成熟多肽。本发明的鹅干扰素－α多肽基因转录后mRNA的二级结构明显优于天然鹅干扰素－α多肽基因，提高了鹅干扰素－α在大肠杆菌系统中的表达量，实现了高效表达。

公开(公告)号：CN101603043B

公开(公告)日：2011-05-04

申请号：CN200910072332.X

申请日：2009-06-19

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 王君伟 ,  王巍 ,  马波 ,  高明春

IPC: C12N15/21

Abstract: 一种鹅干扰素-α多肽基因，它涉及一种鹅干扰素-α基因。它解决了目前天然的鹅干扰素-α基因在大肠杆菌内不能表达的问题。本发明鹅干扰素-α多肽基因序列如SEQ ID NO：1所示。本发明木糖还原酶基因序全长505bp，10bp处有起始密码子ATG，496bp处有终止密码子TAA，有489bp完整的开放阅读框。本发明鹅干扰素-α多肽基因能够在大肠杆菌表达系统中高效表达鹅干扰素-α成熟多肽。本发明的鹅干扰素-α多肽基因转录后mRNA的二级结构明显优于天然鹅干扰素-α多肽基因，提高了鹅干扰素-α在大肠杆菌系统中的表达量，实现了高效表达。

公开(公告)号：CN102121013A

公开(公告)日：2011-07-13

申请号：CN200910073285.0

申请日：2009-11-27

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 王君伟 ,  魏双施 ,  马波 ,  高明春 ,  王巍

IPC: C12N15/21 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 可高效表达的成熟鸡α干扰素基因及其多肽的制备方法，它涉及鸡α干扰素基因及其多肽的制备方法。它解决了现有重组鸡α干扰素基因不能在大肠杆菌中表达或者表达量很低，以及重组鸡α干扰素在制备中复性效果差的问题。可高效表达的成熟鸡α干扰素基因的序列见SEQ ID NO：1。方法：一、将成熟鸡α干扰素基因中的稀有密码子全部同义替换为大肠杆菌偏好性密码子，经合成得优化后的鸡α干扰素基因；二、克隆到表达载体中，然后转化到大肠杆菌感受态细胞中，经筛选后诱导表达，离心后得湿菌，再进行包涵体的提取和溶解；三、进行复性及纯化，收集蛋白。本发明成熟鸡α干扰素基因能在大肠杆菌中高效表达，表达量可达总菌体蛋白的30％，复性效果好。