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公开(公告)号：CN110257434A
公开(公告)日：2019-09-20
申请号：CN201910531285.4
申请日：2019-06-19
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 利用Crispr/Cas9技术制备MyoG基因敲入和MSTN基因敲除的细胞克隆，属于基因工程技术领域，其特征在于：细胞克隆被分离纯化且经过2％马血清诱导分化后可以形成肌纤维；该骨骼肌卫星细胞具有融合为肌管的能力；MSTN基因敲除载体靶位点已成功连接，未发生碱基突变；实验组细胞经分化能够形成一定数目的肌管，表明干扰MyoG基因后，细胞依然能够分化成为肌管，但总体肌管融合率降低，形态和数目较对照组有极显著差异。
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公开(公告)号：CN103160510A
公开(公告)日：2013-06-19
申请号：CN201310113027.7
申请日：2013-04-02
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/113
Abstract: 一种肌细胞生成素（MyoG）基因的增强子，属于遗传工程技术领域，由调控元件E-box、SRE、KLF3、E-box、Sp1、E-box、Sp1、TEF-1组成，其特征在于MyoG基因增强子调控元件顺序为：E-box、SRE、KLF3、E-box、Sp1、E-box、Sp1、TEF-1；MyoG基因增强子“SE”的核酸序列如SeqIDNo:1所示，长度为147bp。在成肌细胞增殖和分化阶段均能促进MyoG基因表达的人工合成的增强子序列，且能够显著提高MyoG基因的表达活性。
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公开(公告)号：CN103146578A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201310106352.0
申请日：2013-03-29
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 转基因细胞培养装置，属于医疗和实验室设备技术领域，由瓶盖、瓶口、瓶头、瓶颈、瓶上面、瓶下面、瓶体、瓶腔、支撑柱、生长板、透液板、液盒上腔、生长板插孔、液盒、瓶底、瓶侧壁、透液板体、板间支撑、支撑轴、生长板卡槽、托层立壁、托层、吸液层、生长透液贴壁层、透液孔、支撑轴孔、挑拣装置组成，其特征在于：生长板由托层立壁、生长透液贴壁层、吸液层、托层、透液孔、支撑轴孔组成，生长透液贴壁层是一层纤维膜，上面有很多透液孔，以利接种在膜外表面上细胞的生长；吸液层可以吸附培养液；托层塑料前缘和两侧缘向上折起，形成托层立壁，以免培养液向外渗出。转基因细胞培养装置制作简单，功能多样，可操作性强，成本低廉，效果明显。
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公开(公告)号：CN116785406A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310776020.7
申请日：2023-06-28
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种通过注射Podocan蛋白促进小鼠骨骼肌损伤再生的方法，属于细胞生物学技术领域，主要包括三个方面的内容：首先是Podocan表达载体的构建，其次是Podocan表达载体的转染、Podocan蛋白纯化及鉴定，第三是注射Podocan蛋白对小鼠骨骼肌损伤再生影响的检测，其特征在于：所述的Podocan表达载体的核苷酸序列如Seq ID No:1所示，Podocan蛋白注射可以在肌纤维中有效表达，表达Podocan可以促进小鼠骨骼肌损伤再生。本发明制作简单，可操作性强，成本低廉，效果明显。
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公开(公告)号：CN103160510B
公开(公告)日：2014-10-08
申请号：CN201310113027.7
申请日：2013-04-02
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/113
Abstract: 一种肌细胞生成素（MyoG）基因的增强子，属于遗传工程技术领域，由调控元件E-box、SRE、KLF3、E-box、Sp1、E-box、Sp1、TEF-1组成，其特征在于MyoG基因增强子调控元件顺序为：E-box、SRE、KLF3、E-box、Sp1、E-box、Sp1、TEF-1；MyoG基因增强子“SE”的核酸序列如SeqIDNo:1所示，长度为147bp。在成肌细胞增殖和分化阶段均能促进MyoG基因表达的人工合成的增强子序列，且能够显著提高MyoG基因的表达活性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103194450A
公开(公告)日：2013-07-10
申请号：CN201310113028.1
申请日：2013-04-02
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/10 , C12N15/85
Abstract: 一种提高肌细胞生成素（MyoG）基因启动子活性的方法，属于遗传工程技术领域，其特征在于通过克隆MyoG基因5′端调控区长度为2125bp的核酸序列，采用启动子缺失片段活性分析的方法获得1个长度为373bp，且具有较高肌肉特异性启动子活性的缺失片段即pGL3-MyoGpro373，又对其内部具有SP1正调控作用的启动子元件进行克隆，并将这两个片段进行串联，从而构建了一个含有两个拷贝数启动子调控元件的表达载体，称为pGL3-MyoGpro373-double，即具有“double”特征的启动子序列，其碱基组成Seq ID No:2所示。
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公开(公告)号：CN104862316A
公开(公告)日：2015-08-26
申请号：CN201510334716.X
申请日：2015-06-17
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/113
Abstract: 具有显著促进牛前脂肪细胞增殖生物功能的miRNA-2400，属于细胞生物学技术领域，通过对牛前脂肪细胞进行体外分离培养，采用免疫荧光染色法鉴定牛脂肪前体细胞，采用茎环荧光定量RT-PCR检测miRNA-2400的表达量，采用EdU检测miRNA-2400对前脂肪细胞增殖的影响；其特征在于在牛前脂肪细胞分化为脂肪细胞的过程中，随着分化天数和分化程度的增加，miRNA-2400表达量明显下降；miRNA-2400过表达后，前脂肪细胞增殖率明显提高，与增殖相关的基因CCND1表达量明显上升；结果表明：miRNA-2400是一种在调解脂肪细胞发育过程中具有显著促进前脂肪细胞增殖作用的小RNA。
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公开(公告)号：CN103146578B
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201310106352.0
申请日：2013-03-29
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 转基因细胞培养装置，属于医疗和实验室设备技术领域，由瓶盖、瓶口、瓶头、瓶颈、瓶上面、瓶下面、瓶体、瓶腔、支撑柱、生长板、透液板、液盒上腔、生长板插孔、液盒、瓶底、瓶侧壁、透液板体、板间支撑、支撑轴、生长板卡槽、托层立壁、托层、吸液层、生长透液贴壁层、透液孔、支撑轴孔、挑拣装置组成，其特征在于：生长板由托层立壁、生长透液贴壁层、吸液层、托层、透液孔、支撑轴孔组成，生长透液贴壁层是一层纤维膜，上面有很多透液孔，以利接种在膜外表面上细胞的生长；吸液层可以吸附培养液；托层塑料前缘和两侧缘向上折起，形成托层立壁，以免培养液向外渗出。转基因细胞培养装置制作简单，功能多样，可操作性强，成本低廉，效果明显。
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公开(公告)号：CN101886060A
公开(公告)日：2010-11-17
申请号：CN201010231364.2
申请日：2010-07-20
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/0775 , C12N5/10
Abstract: 牛肌卫星细胞的体外分离培养及诱导分化的方法，它涉及细胞的体外分离培养及诱导分化的方法。它解决了现有牛肌卫星细胞的分离培养存在成本高，传代稳定性不好，且诱导分化存在所获肌管数量少及不具有收缩功能的问题。方法：清洗组织，用胰蛋白酶和胶原酶液消化；过滤后离心，重悬细胞，接种后用差速贴壁法培养细胞；培养至汇合率为95%，用胰酶进行传代即完成。方法：获得PEI-质粒复合物；牛肌卫星细胞培养至汇合率为75%，清洗后加DMEM高糖培养液，将PEI-质粒复合物加到细胞表面，更换培养液A培养，再更换培养B诱导分化即完成。本发明牛肌卫星细胞的分离培养成本低，传代稳定性好，诱导分化所获肌管数量大且具有收缩功能。
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公开(公告)号：CN101669571A
公开(公告)日：2010-03-17
申请号：CN200910072989.6
申请日：2009-09-28
Applicant: 东北农业大学
IPC: A23K1/14
CPC classification number: Y02P60/877
Abstract: 本发明提供一种利用微生物发酵和酶解复合技术，采用常用蛋白饲料的乳酸菌混菌发酵结合酶解法生产蛋白饲料源小肽工艺。工艺流程：选择新鲜优质的豆粕、玉米蛋白粉、麦麸，使用粉碎机粉碎后过40目的筛子，称量后按比例进行混匀，称取一定量混合物，按5％蛋白质浓度与50℃去离子水混合，搅拌均匀，应用饱和Ca(OH) 2 调节pH为7.7，经封装置于55℃空气浴振荡器中，频率100r/min，萃取反应60min；利用微生物发酵和酶解复合技术采用常用蛋白饲料制得的小肽无苦味和异味，口感好，生产成本大大降低，小肽得率占蛋白质含量65％，蛋氨酸2.51％，提高1.67％，赖氨酸5.17％，提高1.76％，为其他蛋白饲料资源生产饲用小肽提供了有效的资料和数据。
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