公开(公告)号：CN111616149B

公开(公告)日：2021-11-05

申请号：CN202010603514.1

申请日：2020-06-29

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 李一峰 ,  程之扬 ,  梁箫 ,  朱昕 ,  杨金龙

IPC: A01N43/08 ,  A01P1/00 ,  A01P17/00

Abstract: 本发明提供了一种2(5H)‑呋喃酮抑制海洋细菌微生物被膜形成在降低厚壳贻贝稚贝附着中的应用，2(5H)‑呋喃酮降低厚壳贻贝稚贝附着的方法包括：细菌在液体培养基中进行扩大培养后，得到初始细菌原液；经过离心后，弃去上清液，和灭菌过滤海水混合，重悬得到洗去培养基的菌液；将菌液和2(5H)‑呋喃酮加入至含灭菌玻片的无菌培养皿中进行细菌微生物被膜培养，再加入灭菌过滤海水冲洗载玻片，得到细菌微生物被膜，将其转移到无菌培养皿内并加入厚壳贻贝稚贝；本发明使用群体感应抑制剂2(5H)‑呋喃酮通过干扰微生物被膜形成，如EPS生物量和细菌代谢过程，进而显著降低了厚壳贻贝稚贝附着，从而为生物防污领域提供了依据。

公开(公告)号：CN111616149A

公开(公告)日：2020-09-04

申请号：CN202010603514.1

申请日：2020-06-29

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 李一峰 ,  程之扬 ,  梁箫 ,  朱昕 ,  杨金龙

IPC: A01N43/08 ,  A01P1/00 ,  A01P17/00

Abstract: 本发明提供了一种2(5H)-呋喃酮抑制海洋细菌微生物被膜形成在降低厚壳贻贝稚贝附着中的应用，2(5H)-呋喃酮降低厚壳贻贝稚贝附着的方法包括：细菌在液体培养基中进行扩大培养后，得到初始细菌原液；经过离心后，弃去上清液，和灭菌过滤海水混合，重悬得到洗去培养基的菌液；将菌液和2(5H)-呋喃酮加入至含灭菌玻片的无菌培养皿中进行细菌微生物被膜培养，再加入灭菌过滤海水冲洗载玻片，得到细菌微生物被膜，将其转移到无菌培养皿内并加入厚壳贻贝稚贝；本发明使用群体感应抑制剂2(5H)-呋喃酮通过干扰微生物被膜形成，如EPS生物量和细菌代谢过程，进而显著降低了厚壳贻贝稚贝附着，从而为生物防污领域提供了依据。

公开(公告)号：CN109456994A

公开(公告)日：2019-03-12

申请号：CN201811562874.0

申请日：2018-12-20

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 李一峰 ,  梁箫 ,  程之扬 ,  陈珂 ,  竹攸汀 ,  杨金龙

IPC: C12N15/87 ,  C12Q1/6851

Abstract: 本发明属于水产生物基因工程领域，公开了一种厚壳贻贝眼点幼虫的电穿孔转染方法，根据克隆得到厚壳贻贝甲状腺素受体基因全长序列设计siRNA，采用不同参数设置分析不同脉冲模式对甲状腺素受体基因的敲减情况；收集电穿孔转染后96h的幼虫，提取幼虫RNA；设计甲状腺素受体基因引物，利用荧光定量PCR检测甲状腺素受体基因的表达情况。本发明与未加siRNA和无义siRNA处理后进行比较，结果显示加入甲状腺素受体基因siRNA显著降低了该基因的表达量，敲减效率近100％。

公开(公告)号：CN109456994B

公开(公告)日：2021-05-11

申请号：CN201811562874.0

申请日：2018-12-20

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 李一峰 ,  梁箫 ,  程之扬 ,  陈珂 ,  竹攸汀 ,  杨金龙

IPC: C12N15/87 ,  C12Q1/6851

Abstract: 本发明属于水产生物基因工程领域，公开了一种厚壳贻贝眼点幼虫的电穿孔转染方法，根据克隆得到厚壳贻贝甲状腺素受体基因全长序列设计siRNA，采用不同参数设置分析不同脉冲模式对甲状腺素受体基因的敲减情况；收集电穿孔转染后96h的幼虫，提取幼虫RNA；设计甲状腺素受体基因引物，利用荧光定量PCR检测甲状腺素受体基因的表达情况。本发明与未加siRNA和无义siRNA处理后进行比较，结果显示加入甲状腺素受体基因siRNA显著降低了该基因的表达量，敲减效率近100％。

公开(公告)号：CN111575390A

公开(公告)日：2020-08-25

申请号：CN202010576937.9

申请日：2020-06-23

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 李一峰 ,  王林雨 ,  梁箫 ,  凌岚馨 ,  程之扬 ,  杨金龙

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供了一种厚壳贻贝不同发育阶段的荧光定量内参基因及其引物和应用，厚壳贻贝不同发育阶段的荧光定量内参基因为RPS23、CYTB5、EF-1α和α-Tubulin，RPS23基因的碱基序列如SEQ ID NO.1所示，CYTB5基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示，EF-1α基因的碱基序列如SEQ ID NO.3所示，α-Tubulin基因的碱基序列如SEQ ID NO.4所示；本发明从4个常用候选内参基因中筛选得到2个在不同发育阶段中表达相对最稳定的内参基因，以应用于厚壳贻贝不同发育阶段幼体的基因表达分析研究，从而为厚壳贻贝不同发育阶段幼体实验中功能基因表达的精确定量提供有力保证。