公开(公告)号：CN118813831A

公开(公告)日：2024-10-22

申请号：CN202411232003.8

申请日：2024-09-03

Applicant: 上海海洋大学 ,  上海市环境科学研究院

Inventor： 谭娟 ,  李晨虹 ,  戚亿利 ,  王敏

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种基于多重PCR扩增的长江江豚环境DNA检测方法，包括以下步骤：(1)利用多重PCR方法建立检测长江江豚环境DNA用的引物组合；(2)水样抽提：采集水样，然后用微孔滤膜抽滤水样，抽滤后将滤膜放至灭菌离心管；(3)eDNA提取：利用CTAB法提取滤膜上的eDNA；(4)多重PCR扩增：利用步骤(1)中所述的引物组合对提取所得eDNA进行多重PCR扩增反应，得到扩增产物；(5)电泳检测：对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，电泳结束后在凝胶成像仪中观察亮带情况以判断有无长江江豚的存在。本发明利用多重PCR技术多位点引物组合，检测长江江豚环境DNA的存在，具有较高的特异性、灵敏性和准确性。

公开(公告)号：CN117721213A

公开(公告)日：2024-03-19

申请号：CN202311727119.4

申请日：2023-12-15

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 李晨虹 ,  王辉 ,  戚亿利 ,  凌海宁

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明属于分子生物学和分子生态学技术领域，具体公开了利用qPCR检测入侵物种鳄雀鳝的引物探针组合、试剂盒及方法。本发明创新了引物设计方法，筛选出四种优势鳄雀鳝qPCR引物探针组合，结合优化的PCR反应体系和条件，能够在多种鱼类DNA背景下检测出鳄雀鳝DNA，进而实现qPCR技术与环境eDNA检测的结合。本发明检测方法操作简便、灵敏性高、特异性强、短时间内实现结果可视，适合野外实时监测研究，真正实现无创野外实时监测鳄雀鳝群体动向。