公开(公告)号：CN111394381A

公开(公告)日：2020-07-10

申请号：CN202010222429.0

申请日：2020-03-26

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 贾睿 ,  徐杨 ,  彭稳 ,  何培民

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/65

Abstract: 本发明提供了一种mOrange和vp28穿梭载体富集至卤虫无节幼体的方法，包括步骤：根据检索到的mOrange和vp28的基因通过序列组合、设计得到mOrange和vp28融合基因，进行密码子优化为优化后的mOrange和vp28融合基因；再和pRL489质粒连接，构建mOrange和vp28穿梭载体并转入大肠杆菌，大肠杆菌在含0.5wt％甲醛的磷酸盐溶液内灭活，最后将含有pRL489-vp28-mOrange质粒的大肠杆菌喂食到卤虫无节幼体内；本发明充分利用mOrange基因荧光特性，使得融合载体基因的表达易于检测分析，并通过荧光标记物这一特性减少了繁琐的分子、蛋白检测，从而节约时间与成本。

公开(公告)号：CN110577922A

公开(公告)日：2019-12-17

申请号：CN201910877034.1

申请日：2019-09-17

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 贾睿 ,  朱婵 ,  徐杨 ,  施定基 ,  何培民

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/34 ,  C12N15/74 ,  A23K10/16 ,  A23K50/80 ,  A23K40/30 ,  A23K40/10 ,  A23K40/00 ,  A61K35/748 ,  A61P31/20 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种vp19和vp28穿梭载体转基因蓝藻的构建方法及其用途，以对虾白斑综合症病毒的基因组DNA为模板，设计扩增引物后PCR扩增，所得vp19和vp28融合基因和pRL489质粒连接构建vp19和vp28穿梭载体，并将其转入大肠杆菌，与含有pR4-pRL-542质粒的大肠杆菌和纯化后的野生型蓝藻培养到对数生长中期混合，三亲接合转移后筛选蓝藻转化子，继续培养得到。以其为有效活性成分的口服制剂实现增强南美白对虾抵抗WSSV的用途，效果显著且易于控制成本，为对虾养殖中抵抗WSSV的有效药物提供基础。

公开(公告)号：CN110438054A

公开(公告)日：2019-11-12

申请号：CN201910682028.0

申请日：2019-07-26

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 贾睿 ,  朱婵 ,  徐杨 ,  何培民 ,  廖圣瑜

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了vp19转基因蓝藻及其在制备防治对虾白斑综合征病毒药物中的用途，通过vp19穿梭质粒转入蓝藻构建vp19转基因蓝藻，以对虾白斑综合症病毒的基因组DNA为模板，设计扩增引物进行PCR扩增，得到的vp19基因与pRL489质粒连接，构建vp19穿梭表达载体并转入大肠杆菌，将含有pR4-pRL-542质粒的大肠杆菌、含有pRL489-vp19质粒的大肠杆菌和纯化后的野生型蓝藻培养后按比例混合，三亲接合转移得到蓝藻转化子，继续培养。所得的vp19转基因蓝藻作为活性成分用于制备防治对虾白斑综合征病毒药物，有效使用剂量为1～20μg/尾，效果显著且易于控制成本。