公开(公告)号：CN108531491B

公开(公告)日：2019-09-06

申请号：CN201810338650.5

申请日：2018-04-16

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 周志刚 ,  常依娜 ,  包虹

IPC: C12N15/54 ,  C12N9/10 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明涉及缺刻缘绿藻溶血磷脂酸酰基转移酶(LPAAT)基因及其应用。本发明克隆了缺刻缘绿藻LPAAT这个被认为是TAG合成的关键酶的基因，并命名为MiLPAAT。进一步构建了MiLPAAT的原核表达载体，经转化大肠杆菌BL21并诱导培养后，纯化获得重组表达的MiLPAAT成熟蛋白，体外酶活性检测和酶催化反应产物的薄层色谱结果显示，重组的MiLPAAT成熟蛋白可以将LPA合成为PA，表明MiLPAAT编码的蛋白具有LPAAT的功能，能将LPA催化合成为PA，后者沿着肯尼迪途径，在藻细胞中可进一步被合成为TAG。本发明为利用MiLPAAT基因在粮油作物中过表达以增加三酰甘油的产量奠定了基础。

公开(公告)号：CN108531491A

公开(公告)日：2018-09-14

申请号：CN201810338650.5

申请日：2018-04-16

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 周志刚 ,  常依娜 ,  包虹

IPC: C12N15/54 ,  C12N9/10 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明涉及缺刻缘绿藻溶血磷脂酸酰基转移酶(LPAAT)基因及其应用。本发明克隆了缺刻缘绿藻LPAAT这个被认为是TAG合成的关键酶的基因，并命名为MiLPAAT。进一步构建了MiLPAAT的原核表达载体，经转化大肠杆菌BL21并诱导培养后，纯化获得重组表达的MiLPAAT成熟蛋白，体外酶活性检测和酶催化反应产物的薄层色谱结果显示，重组的MiLPAAT成熟蛋白可以将LPA合成为PA，表明MiLPAAT编码的蛋白具有LPAAT的功能，能将LPA催化合成为PA，后者沿着肯尼迪途径，在藻细胞中可进一步被合成为TAG。本发明为利用MiLPAAT基因在粮油作物中过表达以增加三酰甘油的产量奠定了基础。