公开(公告)号：CN105274068A

公开(公告)日：2016-01-27

申请号：CN201510812047.2

申请日：2015-11-20

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 周志刚 ,  薛文斌 ,  刘凡

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N5/10 ,  C12P7/64

CPC classification number: C12N9/0071 ,  C12P7/6409 ,  C12P7/6427 ,  C12Y114/19

Abstract: 本发明涉及一种编码缺刻缘绿藻Δ9脂肪酸去饱和酶的DNA序列及其应用。通过对缺刻缘绿藻转录组高通量数据库的筛选，获得1条与已知物种Δ9FAD基因同源的contig序列，并由此设计引物，利用cDNA末端快速扩增技术克隆获得缺刻缘绿藻Δ9FAD基因的全长序列，在油酸合成缺陷型ole1突变株的酿酒酵母中异源表达该基因去叶绿体转运肽的ORF，对转基因酵母的脂肪酸进行GC-MS分析，在该转基因突变株酵母中检测到新产生的物质—棕榈油酸和油酸，从而证明该基因所编码的蛋白具有Δ9FAD的功能。本发明为在植物体中进行遗传操作，以实现PUFA的高效合成创造了条件。

公开(公告)号：CN105274068B

公开(公告)日：2018-07-31

申请号：CN201510812047.2

申请日：2015-11-20

Applicant: 上海海洋大学

Inventor： 周志刚 ,  薛文斌 ,  刘凡

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N5/10 ,  C12P7/64

Abstract: 本发明涉及种编码缺刻缘绿藻Δ9脂肪酸去饱和酶的DNA序列及其应用。通过对缺刻缘绿藻转录组高通量数据库的筛选,获得1条与已知物种Δ9FAD基因同源的contig序列,并由此设计引物,利用cDNA末端快速扩增技术克隆获得缺刻缘绿藻Δ9FAD基因的全长序列,在油酸合成缺陷型ole1突变株的酿酒酵母中异源表达该基因去叶绿体转运肽的ORF,对转基因酵母的脂肪酸进行GC‑MS分析,在该转基因突变株酵母中检测到新产生的物质——棕榈油酸和油酸,从而证明该基因所编码的蛋白具有Δ9FAD的功能。本发明为在植物体中进行遗传操作,以实现PUFA的高效合成创造了条件。