公开(公告)号：CN118389473A

公开(公告)日：2024-07-26

申请号：CN202410492503.9

申请日：2024-04-23

Applicant: 上海应用技术大学

Inventor： 吴小梅 ,  侯现莉 ,  徐毅 ,  马宝娣

IPC: C12N9/78 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C02F3/34 ,  C12R1/19 ,  C02F101/18 ,  C02F101/38

Abstract: 本发明公开了一种高热稳定性高活性腈水解酶突变体及其应用，属于生物工程领域。将来源于敏捷食酸菌(Acidovorax facilis)72W的腈水基因进行定点突变，使其编码的氨基酸序列在第96位由赖氨酸K突变为精氨酸R，第349位由赖氨酸K突变为精氨酸R，第305位由缬氨酸V突变为亮氨酸L。本发明所述的腈水解酶突变体K96R/K349R/V305L对3‑氰基吡啶和氰化钾的比活分别是突变之前的2.2和3.5倍，在40℃、50℃、55℃下半衰期分别提高了2.3倍、3.3倍、3.8倍和2.3倍、3.5倍、4.0倍。本发明的腈水解酶突变体可以在较宽的温度范围内高效的催化水解底物3‑氰基吡啶和氰化钾中的氰基为相应的羧基，从而用于制备羧酸类医药化学品或降解含氰废水，能广泛应用于化工、制药和冶金等行业，具有广阔的应用前景。