公开(公告)号：CN105907716A

公开(公告)日：2016-08-31

申请号：CN201610296462.1

申请日：2016-05-06

Applicant: 上海市第一人民医院

Inventor： 王刚阳 ,  沈尊理 ,  蔡郑东 ,  华莹奇 ,  马政文 ,  金羽青 ,  沈华 ,  曹玲玲

IPC: C12N5/079

CPC classification number: C12N5/0622

Abstract: 本发明涉及细胞生物学领域，公开了一种从成年猕猴周围神经中分离、纯化雪旺细胞的方法，包括下述步骤：第一步，神经的获取及体外预变性：无菌情况下取成年猕猴腓肠和腓总神经段，去除神经外膜，采用含有复合因子的SCCM预变培养基培养获得成年猕猴腓肠神经；第二步，细胞的原代培养：NB4和dispase混合消化神经，离心后，重悬于含有SCCM的laminin的培养皿中，孵育；第三步，雪旺细胞的纯化：将细胞孵育后，加入dispase消化后收集细胞悬液，在含有Ara?C纯化培养液进行孵育；然后纯化、离心后种植在含有SCCM的生长培养基中。预变性时加入细胞增殖因子提高细胞产量，缩短纯化时间，获得高纯度的成年动物雪旺细胞。