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公开(公告)号：CN102539772B
公开(公告)日：2014-08-06
申请号：CN201210002401.1
申请日：2012-01-06
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种检测伏马毒素B1的方法，包括以下步骤：将FB1半抗原与OVA偶联，得到偶联物FB1-OVA；将抗FB1单克隆抗体与免疫磁珠结合；将抗体-磁珠结合物加入EP管中，洗涤，将待侧样品的萃取液加入上述管中，震荡；去除上清液，洗涤，将OVA-FB1加入上述管中，震荡；去除上清液，洗涤，将抗FB1单克隆抗体加入上述管中，震荡；去除上清液，洗涤，将HRP标记羊抗鼠二抗加入上述管中，震荡；去除上清液，洗涤，加入发光底物，震荡，测定发光值；制作标准曲线，再根据待测样品的发光值，通过标准曲线得到对应的FB1浓度。本发明采用抗FB1单克隆抗体，与其他谷物中的真菌毒素无交叉反应，特异性强，减少了假阳性率。
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公开(公告)号：CN102565163B
公开(公告)日：2013-11-20
申请号：CN201210002341.3
申请日：2012-01-06
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N27/333 , G01N27/26
Abstract: 本发明公开了一种丝网印刷电极检测玉米赤霉烯酮的方法。所述丝网印刷电极的工作电极区域涂覆有Nafion-多壁碳纳米管-胶体金-壳聚糖混合物膜层。制备时将多壁碳纳米管活化后和Nafion混合；制备胶体金，利用壳聚糖将Nafion-多壁碳纳米管和胶体金混合均匀；将混合物涂覆工作电极的工作区域上，37℃干燥成膜。本发明检测ZEN的方法是鉴于待测样品若有ZEN毒素，则与抗ZEN抗体竞争结合，使与电极上ZEN-OVA结合的抗体量减少，由此使电极上HRP-羊抗鼠二抗量也减少，并影响ΔI；然后根据ZEN标准品绘制的标准曲线来判定谷物检测样品中ZEN的含量。本发明检测对象单一且针对性强，准确率高，灵敏度强。
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公开(公告)号：CN102313810A
公开(公告)日：2012-01-11
申请号：CN201110215365.2
申请日：2011-07-29
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/577 , G01N21/76
Abstract: 一种生物检测工程技术领域的检测玉米赤霉烯酮毒素的免疫化学发光方法，包括如下步骤：将ZEN半抗原与OVA偶联，得到偶联物ZEN-OVA；对待测样品进行萃取，得到萃取液；将ZEN-OVA以最佳包被浓度包被在96孔白板上，封闭后分别加入已知的不同浓度的ZEN纯品与抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的混合溶液，待测样品萃取液与抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的混合溶液，孵育；孵育后加入HRP标记的二抗，之后再加入发光底物，进行发光测定，得到结果；制作标准曲线；通过标准曲线得到待测样品萃取液中的ZEN浓度。本发明的方法可以快速检测出待测样品中含有的ZEN的量；同时，本发明的方法检测对象针对性强，准确率高。
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公开(公告)号：CN102279268A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110215377.5
申请日：2011-07-29
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/558
Abstract: 一种生物检测工程技术领域的同时检测玉米赤霉烯酮与伏马毒素的方法，包括如下步骤：1、制备偶联物ZEN-BSA和ZEN-OVA；FB1-KLH和FB1-OVA；2、分别制备抗ZEN的单克隆抗体和抗FB1的单克隆抗体；3、制备胶体金，分别标记抗ZEN的单克隆抗体和抗FB1的单克隆抗体；将标记后的单克隆抗体喷涂到金标垫上；4、在硝酸纤维素膜上进行点样；5、组装成试纸条；6、将待测样品的甲醇提取上清滴入试纸条的样本槽中，获取硝酸纤维素膜上各点样条带的显色结果，鉴定，得到结果。本发明的方法检测对象针对性强，准确率高；检测速度快，所需时间短，减少了使用两种检测方法检测两种毒素带来的人力、物力的损失，并且便于基层推广和运用。
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公开(公告)号：CN101650368A
公开(公告)日：2010-02-17
申请号：CN200910307803.0
申请日：2009-09-27
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/577
Abstract: 一种检测技术领域的用胶体金免疫层析试检测玉米赤霉烯酮毒素的方法，包括如下步骤：将ZEN半抗原通过活泼酯法分别与BSA和OVA偶联，得到ZEN的偶联物ZEN-BSA和ZEN-OVA；利用ZEN-BSA作为免疫原，采用常规方法制备抗ZEN的单克隆抗体；用柠檬酸三钠还原法制备40nm的胶体金，用该胶体金标记经过透析除盐处理的抗ZEN的单克隆抗体；将步骤三所得的已标记的单克隆抗体喷涂到金标垫上，将ZEN-OVA喷涂到T线，兔抗鼠的单克隆抗体喷涂到C线，组装成试纸条，干燥；将待测样品用甲醇提取，离心，取上清，将上清滴入试纸条的样本槽中，获取T线和C线的显色，鉴定，得到结果。本发明可特异性检测ZEN毒素，准确率高，检测速度快，所需时间仅为5～10分钟。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102539772A
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201210002401.1
申请日：2012-01-06
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种检测伏马毒素B1的方法，包括以下步骤：将FB1半抗原与OVA偶联，得到偶联物FB1-OVA；将抗FB1单克隆抗体与免疫磁珠结合；将抗体-磁珠结合物加入EP管中，洗涤，将待侧样品的萃取液加入上述管中，震荡；去除上清液，洗涤，将OVA-FB1加入上述管中，震荡；去除上清液，洗涤，将抗FB1单克隆抗体加入上述管中，震荡；去除上清液，洗涤，将HRP标记羊抗鼠二抗加入上述管中，震荡；去除上清液，洗涤，加入发光底物，震荡，测定发光值；制作标准曲线，再根据待测样品的发光值，通过标准曲线得到对应的FB1浓度。本发明采用抗FB1单克隆抗体，与其他谷物中的真菌毒素无交叉反应，特异性强，减少了假阳性率。
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公开(公告)号：CN102520177A
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201110402715.6
申请日：2011-12-07
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/531
Abstract: 本发明涉及一种定量检测玉米赤霉烯酮的方法，包括如下步骤：1、制备偶联物ZEN-BSA和ZEN-OVA；2、制备抗ZEN的单克隆抗体；3、制备胶体金，标记抗ZEN的单克隆抗体；将标记后的单克隆抗体喷涂到金标垫上；4、在硝酸纤维素膜上进行点样；5、组装成试纸条；6、绘制ZEN浓度与显色值的标准曲线，将待测样品的显色值带入标准曲线中，得到待测样品中ZEN的含量。本发明检测对象单一且针对性强，准确率高，检测速度快，所需时间短，不需经培训的专业人员就可使用本发明方法来检测，满足粮食储存销售机构、出入境、海关等检验部门快速、正确地判断玉米赤霉烯酮含量的要求，并且便于基层推广和运用。
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公开(公告)号：CN102384977A
公开(公告)日：2012-03-21
申请号：CN201110239694.0
申请日：2011-08-19
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种玻碳电极免疫检测玉米赤霉稀酮的方法，包括如下步骤：将ZEN半抗原通过活泼酯法与OVA偶联，得到偶联物ZEN-OVA；对待侧样品进行萃取，得到萃取液；将ZEN-OVA包被在酶标反应板上，封闭后分别加入已知的不同浓度的ZEN纯品与抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的混合溶液，待测样品萃取液与抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的混合溶液，孵育；孵育后加入ALP标记的二抗，之后再加入底物缓冲液和终止液，进行氧化峰电流测定，得到结果；制作标准曲线，通过标准曲线得到待测样品萃取液中的ZEN浓度。本发明可以快速、准确检测出待测样品中含有的ZEN量，同时相比传统的ELISA方法还具有仪器便携，利于现场检测的特点。
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公开(公告)号：CN101661043A
公开(公告)日：2010-03-03
申请号：CN200910307796.4
申请日：2009-09-27
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/577
Abstract: 一种生物检测工程技术领域的用胶体金免疫层析试验快速检测伏马毒素的方法，包括如下步骤：将伏马毒素半抗原通过戊二醛法分别与KLH和OVA偶联；利用所得伏马毒素-KLH偶联物，采用常规方法制备抗伏马毒素的单克隆抗体；用柠檬酸三钠还原法制备40nm的胶体金，用该胶体金标记经过透析除盐处理的抗伏马毒素的单克隆抗体；将得到的单克隆抗体蛋白喷涂到金标垫上，将伏马毒素-OVA偶联物喷涂到T线，兔抗鼠的单克隆抗体喷涂到C线，组装成试纸条，干燥；将待测样品用甲醇提取，离心，取上清，将上清滴入试纸条的样本槽中，获取T线和C线的显色，鉴定，得到结果。本发明的方法检测特异性强，准确率高；检测速度快，所需时间短，只需5～10分钟。
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公开(公告)号：CN102608324B
公开(公告)日：2014-08-06
申请号：CN201210002342.8
申请日：2012-01-06
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N33/64
Abstract: 本发明涉及一种基于多重放大系统的检测玉米赤霉烯酮的方法，包括以下步骤：将ZEN半抗原与OVA偶联，得到偶联物ZEN-OVA，再与biotin偶联，得到偶联物OVA-ZEN-biotin；将抗ZEN单克隆抗体与免疫磁珠结合；将抗体-磁珠结合物加入EP管中，洗涤，将待侧样品的萃取液加入上述EP管中，震荡，去除上清液，洗涤，再加入OVA-ZEN-biotin，震荡，去除上清液，洗涤，再加入SA-HRP，震荡，去除上清液，洗涤，最后加入发光底物，震荡，测定发光值；制作标准曲线，再根据待测样品的发光值，通过标准曲线得到对应的ZEN浓度。本发明采用抗ZEN单克隆抗体，与其他谷物中的真菌毒素无交叉反应，特异性强，减少了假阳性率。
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