公开(公告)号：CN101240284A

公开(公告)日：2008-08-13

申请号：CN200710053340.0

申请日：2007-09-20

Applicant: 三峡大学

Inventor： 乐超银 ,  刘敏 ,  郭政红 ,  谢伟 ,  梁薇 ,  姚伟 ,  梁宏伟 ,  陈发菊 ,  陈凡 ,  戴建武

IPC: C12N15/57 ,  C12N9/48 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 一种葡萄球菌激酶及利用生物技术高效分泌表达重组葡萄球菌激酶的方法。它以金黄色葡萄球菌的总DNA为模板，通过PCR扩增，获得含信号肽的葡激酶(Sak)基因。该基因序列第33、34及36位氨基酸，不同于已报道的Sak基因。将该基因与载体pGEX－4T－1进行连接，转化宿主菌，获得的重组工程菌，经IPTG诱导可分泌表达具有纤溶酶原激活作用的重组葡激酶。采用本发明方法表达重组葡激酶蛋白，基因表达水平高，表达产物主要为分泌型蛋白，并以活性状态存在于菌体外胞质及胞外，因此，纯化工艺简单，产量高，生产成本低。

公开(公告)号：CN101024820A

公开(公告)日：2007-08-29

申请号：CN200710051497.X

申请日：2007-02-07

Applicant: 三峡大学

Inventor： 姚伟 ,  段真珍 ,  何正权 ,  余云芳 ,  陈发菊 ,  梁宏伟 ,  梁薇 ,  乐超银 ,  王玉兵 ,  陈凡 ,  戴建武

IPC: C12N5/04 ,  A01H4/00 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明公开了一种建立花生转基因受体体系的方法及应用。以花生幼叶为外植体接种在附加不同激素组合的诱导培养基上，诱导幼叶产生胚性愈伤组织，进而在附加不同激素组合的分化培养上分化培养，产生丛生芽或丛生芽组织块，最后转接到附加不同激素组合的生根培养基上生根培养，获得再生植株。选取继代培养后处于旺盛生长期的胚性愈伤组织块和丛生芽组织块作为受体，采用农杆菌介导法将外源基因导入受体细胞，经过恢复、筛选、分化、生根等步骤获得转基因植株。本发明能从绝大多数基因型的受体细胞中再生出转基因植株，且转化频率高，再生植株性状变异小。

公开(公告)号：CN1657630A

公开(公告)日：2005-08-24

申请号：CN200510059304.6

申请日：2005-03-25

Applicant: 三峡大学 ,  何正权

Inventor： 何正权 ,  段真珍 ,  梁薇 ,  陈凡 ,  戴建武 ,  陈发菊 ,  乐超银 ,  姚伟 ,  梁宏伟

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/65 ,  C12N15/61 ,  C12N15/74 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种以甘露糖作为筛选标记的转基因黄瓜的构建方法。该构建方法是利用植物表达载体将6－磷酸甘露糖异构酶基因导入黄瓜的外植体，经在含甘露糖的培养基上筛选和分化，得到转基因植株。使用甘露糖选择标记系统时，非转化细胞处于饥饿状态，而并非被杀死，所以选择培养过程中较少出现坏死组织，更有利于转基因组织的生长和再生。该选择标记系统具有产物安全、选择剂价格低廉、选择程序简单，而且不影响转化植物的代谢平衡，转基因植株生长旺盛，筛选效果显著等优点，在转基因植物研究及市场化过程中具有潜在的、广泛的应用前景，有望发展成为植物转化中主导选择标记系统。本发明为利用黄瓜作为植物生物反应器表达口服疫苗等提供了良好的技术平台。

公开(公告)号：CN100364393C

公开(公告)日：2008-01-30

申请号：CN200410008944.X

申请日：2004-03-19

Applicant: 三峡大学

Inventor： 陈发菊 ,  何正权 ,  黄权军 ,  乐超银 ,  陈凡 ,  张耘 ,  戴建武

IPC: A01N3/00 ,  A01G7/00 ,  A01H3/00

Abstract: 本发明公开了一种巴东木莲的繁殖方法，分为两步，先是将收集的花粉风干，进行人工辅助授粉，以提高其结实率；然后将收获的种子经去皮后，在0-10℃和80%-100%湿度下处理1-12月，提高种子萌发率。采用人工辅助授粉，巴东木莲的结实率可达100%，种子经处理后种子萌发率可以达到100%。本发明所述方法对于扩大巴东木莲的种群规模、保护和开发利用巴东木莲物种资源都具有重要意义。

公开(公告)号：CN1669406A

公开(公告)日：2005-09-21

申请号：CN200410008944.X

申请日：2004-03-19

Applicant: 三峡大学

Inventor： 陈发菊 ,  何正权 ,  黄权军 ,  乐超银 ,  陈凡 ,  张耘 ,  戴建武

IPC: A01H1/02 ,  A01G7/00 ,  A01C1/06

Abstract: 本发明公开了一种巴东木莲的繁殖方法，分为两步，先是将收集的花粉风干，进行人工辅助授粉，以提高其结实率；然后将收获的种子经去皮后，在0－10℃和80％－100％湿度下处理1－12月，提高种子萌发率。采用人工辅助授粉，巴东木莲的结实率可达100％，种子经处理后种子萌发率可以达到100％。本发明所述方法对于扩大巴东木莲的种群规模、保护和开发利用巴东木莲物种资源都具有重要意义。

公开(公告)号：CN101240284B

公开(公告)日：2012-05-30

申请号：CN200710053340.0

申请日：2007-09-20

Applicant: 三峡大学

Inventor： 乐超银 ,  刘敏 ,  郭政红 ,  谢伟 ,  梁薇 ,  姚伟 ,  梁宏伟 ,  陈发菊 ,  陈凡 ,  戴建武

IPC: C12N15/57 ,  C12N9/48 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 一种葡萄球菌激酶及利用生物技术高效分泌表达重组葡萄球菌激酶的方法。它以金黄色葡萄球菌的总DNA为摸板，通过PCR扩增，获得含信号肽的葡激酶(Sak)基因。该基因序列第33、34及36位氨基酸，不同于已报道的Sak基因。将该基因与载体pGEX-4T-1进行连接，转化宿主菌，获得的重组工程菌，经TPTG诱导可分泌表达具有纤溶酶原激活作用的重组葡激酶。采用本发明方法表达重组葡激酶蛋白，基因表达水平高，表达产物主要为分泌型蛋白，并以活性状态存在于菌体外胞质及胞外，因此，纯化工艺简单，产量高，生产成本低。