一种检测DNA聚合酶封闭效果的方法

    公开(公告)号:CN115678977A

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN202110839525.4

    申请日:2021-07-23

    Inventor: 胡梦竹

    Abstract: 本发明公开了一种检测DNA聚合酶封闭效果的方法,属于生物技术领域。本发明方法包括以下步骤:将封闭后的DNA聚合酶、dNTP、回文底物、PCR缓冲液、双链DNA荧光染料混合后,放在荧光定量PCR仪中,在37℃下孵育30‑40分钟,用荧光定量PCR仪实时采集荧光信号,通过荧光信号判断封闭效果。所述的回文底物为长度70‑150bp的核苷酸,有一段回文序列,可以形成回文结构,在DNA聚合酶的作用下可以继续延伸直至3’端补平。本发明对DNA聚合酶封闭效果的评价更加灵敏,有利于达到更好的封闭效果,减少PCR扩增的非特异扩增。

    一种低宿主DNA含量Taq DNA聚合酶的制备试剂和方法

    公开(公告)号:CN115678870A

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN202110839527.3

    申请日:2021-07-23

    Inventor: 胡梦竹

    Abstract: 本发明公开了一种低宿主DNA含量Taq DNA聚合酶的制备试剂和方法,属于酶工程领域。本发明的试剂包含裂解结合缓冲液、洗脱缓冲液和宿主DNA去除液,裂解结合缓冲液含Tris‑HCl、氯化钠、咪唑,洗脱缓冲液含Tris‑HCl、氯化钠、咪唑,宿主DNA去除液含Tris‑HCl、氯化钠、热敏感dsDNase。本发明的试剂可对通过基因工程手段获得的Taq DNA聚合酶进行纯化,有效去除其中的宿主DNA含量。

    一种革兰氏阳性菌的核酸提取试剂盒及提取方法

    公开(公告)号:CN115678883A

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN202110822507.5

    申请日:2021-07-21

    Inventor: 付爱思 胡梦竹

    Abstract: 本发明公开了一种革兰氏阳性菌的核酸提取试剂盒及提取方法,属于分子生物学技术领域。本发明的核酸提取试剂盒包含裂解液、结合液、磁珠悬浮液、洗涤液1、洗涤液2、洗脱液;其中,裂解液含Tris‑HCl、氯化钠、溶菌酶、Triton‑X 100,结合液含Tris‑HCl、氯化钠、盐酸胍,洗涤液含Tris‑HCl、氯化钠、酸胍,洗涤液2含Tris‑HCl、EDTA、乙醇,洗脱液含Tris‑HCl、EDTA。本发明针对革兰氏阳性菌优化了试剂成分,能针对性地水解革兰氏阳性菌细胞壁中的肽聚糖层,使其充分裂解释放核酸,提高了核酸的提取浓度,有助于临床诊断中革兰氏阳性菌的检出。

    引物组及其用途
    4.
    发明公开

    公开(公告)号:CN112760414A

    公开(公告)日:2021-05-07

    申请号:CN202011045394.4

    申请日:2020-09-28

    Inventor: 刘然

    Abstract: 本发明提出了一种引物组,一种引物组,所述引物组用于SARS‑CoV‑2的S‑L分型,其特征在于,包括第一对引物及第一对探针,其核酸序列如下所示:第一对引物上游引物序列:GTGGATGAGGCTGGTTCT(SEQ ID NO:4);第一对引物下游引物序列:AACAACGCACTACAAGAC(SEQ ID NO:5);第一对探针第一序列:TCCTGTTCACCTTTTA(SEQ ID NO:6);第一对探针第二序列:CAGCTTCCTGTTTACCT(SEQ ID NO:7)。利用本发明提出的引物组可以对SARS‑CoV‑2进行高效准确地分型,并利用分型结果指导临床治疗。

    基于纳米孔测序平台的文库的构建方法、鉴定微生物的方法及应用

    公开(公告)号:CN111662958A

    公开(公告)日:2020-09-15

    申请号:CN202010306570.9

    申请日:2020-04-17

    Inventor: 辜家爽

    Abstract: 本发明涉及基因测序领域,具体涉及一种基于纳米孔测序平台的文库的构建方法、鉴定微生物的方法及应用。所提供的基于纳米孔测序平台的文库的构建方法包括:对来自于微生物的靶基因进行富集,以便获得富集产物,所述微生物包括选自细菌、真菌或者病毒中的至少一种;基于富集产物建库,以便获得测序文库。所提供的鉴定微生物的方法包括:基于上述测序文库,利用纳米孔测序平台进行测序,以便获得测序结果;将所述测序结果与参考数据库进行比对,基于比对结果确定待测样本中微生物。通过所提供的方法鉴定微生物,检测时间短,同时可以实现细菌,真菌,病毒的一次性广谱检测。且由于靶基因核酸得到富集,大大降低了检测数据,从而降低了检测成本。

    分离的核酸及其用途、引物组、试剂、试剂盒和检测方法

    公开(公告)号:CN115678896A

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN202110824336.X

    申请日:2021-07-21

    Inventor: 付爱思

    Abstract: 本发明涉及分离的核酸及其用途、引物组、试剂、试剂盒和检测方法。分离的核酸具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列或具有与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列70%以上同源性的核苷酸序列,用于检测新金色分枝杆菌,引物组包括第一引物对上游引物序列:5’‑CTGACCAATCACTACTACC‑3’(SEQ ID NO:2),第一引物对下游引物序列:5’‑CCATGTACTGGTTCTTGG‑3’(SEQ ID NO:3),第一探针:5’‑AGTTGATCGACAGCACCTCCG‑3’(SEQ ID NO:4)。本发明中分离的核酸在新金色分枝杆菌中的保守性高,通过检测上述核酸能准确鉴定出新金色分枝杆菌,且通过上述核酸设计的引物组具有特异性强、灵敏度高的优点。

    一种高血糖血脂的血液核酸提取试剂盒

    公开(公告)号:CN115678885A

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN202110831973.X

    申请日:2021-07-22

    Inventor: 付爱思 胡梦竹

    Abstract: 本发明公开了一种高血糖血脂的血液核酸提取试剂盒,属于分子生物学技术领域。本发明的血液核酸提取试剂盒包含裂解液、磁珠悬浮液、洗涤液1、洗涤液2、洗涤液3,洗脱液;其中,裂解液含Tris‑醋酸、吐温20、EDTA、异硫氰酸胍,洗涤液含Tris‑醋酸、吐温20、异硫氰酸胍,洗涤液2含Tris‑醋酸、盐酸胍,洗涤液3含Tris‑醋酸、EDTA、乙醇,洗脱液含Tris‑醋酸、EDTA。本发明试剂盒中的成分能针对性地去除血液中的糖类和脂类物质,尤其适合高血糖血脂患者的血液样本核酸提取,提取的核酸纯度高,有利于下游检测的顺利开展。

    纳米孔测序方法及系统
    9.
    发明授权

    公开(公告)号:CN115948520B

    公开(公告)日:2025-02-28

    申请号:CN202211160641.4

    申请日:2022-09-22

    Inventor: 付爱思 任意 王险

    Abstract: 本发明涉及测序技术领域,具体涉及纳米孔测序方法及系统。本发明提供的纳米孔测序方法选择本身测序质量较高的序列进行进一步校正分析,获取更加准确的结果。同时,采用实时增量更新的方法,进行多次校正分析,最终统计多次结果,以获得最为准确信息。这样,兼顾了准确性和分析速度,大幅提高了校正程序的性能。本发明提供的纳米孔测序方法具有高准确性,解决近似物种鉴定准确性问题;校准结果可重复性,解决结果不稳定,受数据量和数据质量影响问题;实现校准结果质量可预测性,解决物种鉴定可信度评估问题;提高校准速度,实现数据的实时校准问题。

    一种有效去除植物样本中多糖多酚的基因组提取试剂及方法

    公开(公告)号:CN115678887A

    公开(公告)日:2023-02-03

    申请号:CN202110833336.6

    申请日:2021-07-22

    Inventor: 付爱思 胡梦竹

    Abstract: 本发明公开了一种有效去除植物样本中多糖多酚的基因组提取试剂及方法,属于分子生物学技术领域。本发明的提取试剂包含裂解液1、裂解液2、洗涤液1、洗涤液2、洗脱液;其中,裂解液1含Tris‑HCl、CTAB、Triton X‑100、NaCl、EDTA、PVP,裂解液2含Tris‑HCl、EDTA、TritonX‑100、DTT、柠檬酸钠、NaCl,洗涤液1含Tris‑HCl、EDTA、盐酸胍,洗涤液2含Tris‑HCl、EDTA、乙醇,洗脱液含Tris‑HCl、EDTA。本发明可有效去除植物样本中的多糖和多酚类次生代谢产物,提取的DNA纯度高,保证下游实验的顺利进行。

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