公开(公告)号：CN102796701A

公开(公告)日：2012-11-28

申请号：CN201210266394.6

申请日：2012-07-30

Applicant: 成都恒春之源生物科技股份有限公司

Inventor： 张留 ,  李露莉 ,  钟婷婷 ,  李艳 ,  张婷

IPC: C12N5/0775 ,  C12N5/02

Abstract: 本发明公开了一种体外3D无支架悬浮培养扩增人脐带间充质干细胞的方法，包括以下步骤：对检测合格的脐带组织进行清洗；剪切；接种于细胞培养皿中；不加培养液于培养箱内静置培养；加入完全培养基培养；加入胰酶-EDTA溶液进行消化处理；将消化液进行离心，沉淀得到脐带间充质干细胞；接种至微孔板中，加入完全培养基，置于培养箱内静置培养；转移至搅拌生物反应器中，连续搅拌培养；消化处理得到脐带间充质干细胞单细胞悬液；重复培养，实现脐带间充质干细胞的扩大再培养。本发明因不受培养表面积限制而实现了细胞体外扩增最大化，能统一控制各聚集体的生长进度，保证营养的最大吸收度，而且还节省了附加材料的成本。

公开(公告)号：CN105018422A

公开(公告)日：2015-11-04

申请号：CN201510454775.0

申请日：2015-07-29

Applicant: 成都恒春之源生物科技股份有限公司

Inventor： 李露莉 ,  张留

IPC: C12N5/0775

Abstract: 本发明公开了一种人脐带间充质干细胞规模化制备的方法。本发明包括以下步骤：收集脐带及胎盘；取脐带分离提取hUC-MSC，前期使用传统含胎牛血清（fetal bovine serum，FBS）的DMEM/F12培养液进行扩增培养；后期以脐带同来源胎盘匀浆液（placental homogenate extraction，PHE)代替FBS用于hUC-MSC再培养，从而获得hUC-MSC原料细胞。本发明在未使用商品化无血清培养基的前提下，即可实现hUC-MSC体外规模化制备，同时又解决了牛血清残留问题，并节省大量成本。

公开(公告)号：CN105018422B

公开(公告)日：2018-08-28

申请号：CN201510454775.0

申请日：2015-07-29

Applicant: 成都恒春之源生物科技股份有限公司

Inventor： 李露莉 ,  张留

IPC: C12N5/0775

Abstract: 本发明公开了一种人脐带间充质干细胞规模化制备的方法。本发明包括以下步骤：收集脐带及胎盘；取脐带分离提取hUC‑MSC，前期使用传统含胎牛血清（fetal bovine serum，FBS）的DMEM/F12培养液进行扩增培养；后期以脐带同来源胎盘匀浆液（placental homogenate extraction，PHE)代替FBS用于hUC‑MSC再培养，从而获得hUC‑MSC原料细胞。本发明在未使用商品化无血清培养基的前提下，即可实现hUC‑MSC体外规模化制备，同时又解决了牛血清残留问题，并节省大量成本。