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公开(公告)号：CN115322951B
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202210890208.X
申请日：2022-07-27
申请人： 广东博溪生物科技有限公司
摘要： 本发明涉及一种类痤疮表型的体外重组表皮模型的构建方法，所述构建方法包括以下步骤：步骤(1)：表皮细胞的准备；步骤(2)：表皮细胞的液下培养；步骤(3)：体外重组表皮模型的构建；步骤(4)：将痤疮丙酸杆菌定植于体外重组表皮模型。本发明提供的类痤疮体外重组表皮模型的构建方法，兼并了体外抑菌作用和细胞抗炎作用两种检测模型基础上，还可通过形态学直观表征“过度角化”现象。此外，体外检测的方式容易实现标准化和稳定化，可以避免种属差异和个体差异，同时提高检测效率。
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公开(公告)号：CN107287153B
公开(公告)日：2023-11-07
申请号：CN201710460521.9
申请日：2017-06-18
申请人： 广东博溪生物科技有限公司
IPC分类号： C12N5/071
摘要： 本发明公开了一种人表皮细胞的差别消化方法，具体涉及组织细胞学领域。已去除皮下疏松结缔组织的人表皮组织经D‑H酶消化液消化；消化完成后加入血清终止液，过滤收集至离心管；倾出上清后用PBS轻柔吹打至细胞悬液完全混匀，分别取上半部分与下半部分适量悬液滴入不同的EP管，进行细胞计数并检测细胞活力；离心后接种至表皮细胞培养液，经37℃ 5%CO2培养箱培养获得表皮细胞。该方法简单，快速，获取细胞数量多且纯度高，可建立活力较高的人表皮细胞库，供临床移植和体外重建人体皮肤模型所需。
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公开(公告)号：CN116515660A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202210689560.7
申请日：2022-06-16
申请人： 广州星际悦动股份有限公司 , 广东博溪生物科技有限公司
摘要： 本发明提出了应用于评价口腔产品功效的离体牙菌斑生物膜模型和方法，所述牙菌斑生物膜模型包括：基底；牙菌斑生物膜，所述牙菌斑生物膜形成于所述基底表面，所述牙菌斑生物膜中的微生物为口腔变异链球菌。本发明的离体牙菌斑生物膜模型中牙菌斑生物膜粘度适中，菌斑含量均一，应用于评价口腔产品功效，具有准确性高、重复性强、稳定性好等优点，应用前景好。
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公开(公告)号：CN107287151B
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN201710460505.X
申请日：2017-06-18
申请人： 广东博溪生物科技有限公司
IPC分类号： C12N5/071
摘要： 本发明公开了一种含黑色素细胞的体外皮肤测试模型的构建方法，使用人表皮角质形成细胞的培养基作为基础液，分别配置培养基a和培养基b；将角质形成细胞与黑素细胞分别采用培养基a制成细胞悬液，分别接种到均匀接种到Transwell小室中，再加入培养基a在37℃，5%CO2培养箱中进行浸没式培养1~5天，形成含黑色素细胞的表皮层结构；将其置于培养器皿内的培养支架表面，加入培养基b进行气液面培养，置于37℃、5%CO2培养箱中培养5~15天，得到所述含黑色素的皮肤测试模型。该方法模型稳定性高，黑素细胞对外界的刺激更为灵敏，可准确用于化妆品的安全与功效评价的检测，同时原料成本低，制作周期短，稳定性良好，可大量生产。
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公开(公告)号：CN113862215A
公开(公告)日：2021-12-31
申请号：CN202110575607.2
申请日：2021-05-26
申请人： 广东博溪生物科技有限公司
摘要： 本发明提供了一种用于构建人阴道粘膜模型培养基的配制方法，以DMEM和F12按体积比1～3:1混合的培养基为基础液，在其中添加10％胎牛血清，添加2.0～6.0μmol/mL的谷氨酰胺，15～30μg/mL腺嘌呤，5～15μg/mL胰岛素，0.5～2.0μg/mL氢化可的松，25～100μg/mL维生素C，1～10ng/mL成纤维细胞生长因子和5～20ng/mL转铁蛋白。
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公开(公告)号：CN113201482A
公开(公告)日：2021-08-03
申请号：CN202110442485.X
申请日：2015-09-25
申请人： 广东博溪生物科技有限公司
发明人： 卢永波
IPC分类号： C12N5/071 , C12N5/077 , C12N5/0775
摘要： 本发明制备的一种含微血管管腔双层皮肤，具有两层皮肤结构，自上而下分别为表皮层，含有微血管管腔的真皮层；表皮层由表皮细胞生发复层组成，含有微血管管腔的真皮层由成纤维细胞、脐带间充质干细胞、脐静脉内皮细胞构建而成，其通过将成纤维细胞、脐带间充质干细胞以及脐静脉内皮细胞以一定比例混合，使用多次接种法，利用细胞自身胞外基质分泌能力和旁分泌系统，一方面形成皮肤真皮的组织学结构，另一方面促进内皮细胞的增殖，迁移，管腔形成及稳定。这种模拟正常人体皮肤组配，通过细胞间相互作用和相互影响达到真皮层构成及真皮内微管腔形成的组织构建方法，避免了人为添加外源支架及血管前新生因子所带来结构和功能的不稳定以及操作的繁琐。
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公开(公告)号：CN107326005B
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN201710460511.5
申请日：2017-06-18
申请人： 广东博溪生物科技有限公司
IPC分类号： C12N5/071
摘要： 本发明实施例提供一种无外源支架的真皮构建方法及培养液，涉及组织工程技术领域，通过优化培养体系，在其中添加一些能够促进成纤维细胞增殖和ECM分泌的活性成分，构建出一种细胞密度高、厚度大、稳定性好的无外源支架的真皮替代物。无外源支架的真皮由成纤维细胞及其自身分泌的细胞外基质构成，该无外源支架的真皮构建方法包括：步骤一：成纤维细胞的分离培养；步骤二、真皮层构建。
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公开(公告)号：CN107164315B
公开(公告)日：2020-11-20
申请号：CN201710460515.3
申请日：2017-06-18
申请人： 广东博溪生物科技有限公司
IPC分类号： C12N5/074
摘要： 本发明实施例提供一种用于体外皮肤刺激性检测的重组表皮模型的构建方法，涉及组织工程技术领域，该方法操作简便，工艺稳定，便于规模化生产，产品脂质组成类似于天然人体皮肤，屏障功能完整，方便用于检测化妆品刺激性。该方法包括：步骤一、表皮干细胞分离和大规模培养；步骤二、组织工程表皮构建。
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公开(公告)号：CN107326003B
公开(公告)日：2020-09-25
申请号：CN201710460499.8
申请日：2017-06-18
申请人： 广东博溪生物科技有限公司
摘要： 本发明公开一种利用无血清培养体系在体外构建的3D模型及其构建方法，涉及组织工程学生物材料技术领域，由于该3D模型的种子细胞选择多样，体外构建重复性佳，可实现产业化制备。该模型是应用细胞生物学和工程学原理，使用组织分离的原代角膜上皮细胞，或角膜缘干细胞，或永生化角膜上皮细胞，或原代口腔黏膜上皮细胞，或口腔黏膜鳞状癌细胞株TR146，经体外扩增后，采用无血清培养基，及液下‑气液面分段培养法，使其复层化，形成的体外模型。
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公开(公告)号：CN107164306B
公开(公告)日：2020-09-08
申请号：CN201710460502.6
申请日：2017-06-18
申请人： 广东博溪生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种角膜模型低温保存用固体培养基及制备方法和使用方法，所述固体培养基由基础培养基和琼脂糖水溶液按照1:1的体积比混合均匀后凝固制成；所述琼脂糖水溶液的质量浓度为0.5%～5%；所述基础培养基以DMEM培养液和F12培养液的混合溶液为基础液，添加胎牛血清、维甲酸、人表皮生长因子、胰岛素、氢化可的松、腺嘌呤、三碘甲状腺氨酸、谷氨酰胺和低温保护剂；所述低温保护剂为HEPES、蔗糖、甘氨酸、丙氨酸、腺苷、维生素E、维生素C、透明质酸和硫酸软骨素的混合物。本发明的固体培养基具有减少组织细胞低温缺氧损伤的优点，能够有效保证角膜模型测试结果的准确性，同时方便操作及长途运输。
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