纯化丙酮酸激酶的方法

    公开(公告)号:CN102010854A

    公开(公告)日:2011-04-13

    申请号:CN201010532789.7

    申请日:2010-11-01

    IPC分类号: C12N9/12

    摘要: 本发明提供一种纯化诊断用丙酮酸激酶的方法,其包括如下步骤:(1)将发酵液调节pH、匀浆,(2)稳定化处理,(3)热冷处理,(4)加酸碱处理,(5)用PEG(聚乙二醇)沉淀法将酶从含有杂离子的酶中沉淀出来,将沉淀重悬,继续用PEG沉淀法洗去其中残余的杂离子,(6)酶沉淀经重悬,加入单宁酸使残留的部分PEG和单宁酸结合生成沉淀并离心除去,上清经冷冻升华干燥获得符合试剂盒纯度要求的诊断酶。该方法简单易行,可以很方便地从含有钠、钾、氨等离子和杂蛋白的发酵粗酶液中将酶提纯出来,获得符合诊断原料要求的酶。该方法酶的得率高,杂离子水平可控制,无需上柱脱盐,无需透析,易于扩大生产。

    硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、其中间体及它们的制备方法

    公开(公告)号:CN102477057A

    公开(公告)日:2012-05-30

    申请号:CN201010570479.4

    申请日:2010-11-26

    CPC分类号: Y02P20/55

    摘要: 本发明提供了一种硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的全化学制备方法,并且提供了该制备方法形成的两种稳定中间体——单磷酸硫代烟酰胺-α-D-核苷(结构式(1)所示的化合物)和吗啡啉单磷酸腺苷以及二者的制备方法。本发明提供的硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的全化学制备方法无需任何生物合成的步骤和方法,避免了使用生物酶以及由生物酶带来的产品酶解的问题,从而具有成本低的优点;并且本发明提供的硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的全化学制备方法,可以同时分别合成所述稳定中间体,从而具有成本低且合成效率高的优点。

    截短型溶血链球菌溶菌素O及利用其的检测试剂盒

    公开(公告)号:CN102964435A

    公开(公告)日:2013-03-13

    申请号:CN201110255827.3

    申请日:2011-08-31

    摘要: 本发明提供一种截短型溶血链球菌溶菌素O基因与ASO检测试剂盒。本发明人克隆部分SLO基因片段,将该部分的SLO基因克隆到大肠杆菌等表达载体中,使之产量表达并利于纯化。具体而言,本发明人提供一种DNA序列,其碱基序列如SEQ ID NO:1所示。根据本发明,截短的SLO序列能使SLO蛋白的产量大大提高,每升细菌培养物能纯化得到150mg以上的SLO蛋白,纯度90%以上,经过免疫学实验证明,这一分段表达的SLO依然保持了特异的免疫原性。

    N-苯基靛红及其制备方法
    5.
    发明公开

    公开(公告)号:CN102372660A

    公开(公告)日:2012-03-14

    申请号:CN201010265919.5

    申请日:2010-08-27

    IPC分类号: C07D209/38

    摘要: 本发明涉及一种N-苯基靛红及其制备方法。本发明的N-苯基靛红的制备方法,包括:步骤a)使二苯胺溶解于硝基苯中,所述硝基苯是现实世界中存在的硝基苯,并不是理论上的不含有任何杂质的硝基苯;步骤b)使二苯胺转化为N-苯基靛红。本发明的N-苯基靛红的制备方法,不再使用苯作为溶剂,而是采用硝基苯作为溶剂来溶解二苯胺,然后进行反应而得到,因此,可以提高生成N-苯基靛红的反应的反应转化率。同时,由于副反应的减少,可以有效地利用原料,提高原料利用率,所以能够降低成本,具有客观的经济效益。

    截短型溶血链球菌溶菌素O及利用其的检测试剂盒

    公开(公告)号:CN102964435B

    公开(公告)日:2014-12-03

    申请号:CN201110255827.3

    申请日:2011-08-31

    摘要: 本发明提供一种截短型溶血链球菌溶菌素O基因与ASO检测试剂盒。本发明人克隆部分SLO基因片段,将该部分的SLO基因克隆到大肠杆菌等表达载体中,使之产量表达并利于纯化。具体而言,本发明人提供一种DNA序列,其碱基序列如SEQ ID NO:1所示。根据本发明,截短的SLO序列能使SLO蛋白的产量大大提高,每升细菌培养物能纯化得到150mg以上的SLO蛋白,纯度90%以上,经过免疫学实验证明,这一分段表达的SLO依然保持了特异的免疫原性。

    硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、其中间体及它们的制备方法

    公开(公告)号:CN102477057B

    公开(公告)日:2014-04-23

    申请号:CN201010570479.4

    申请日:2010-11-26

    CPC分类号: Y02P20/55

    摘要: 本发明提供了一种硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的全化学制备方法,并且提供了该制备方法形成的两种稳定中间体——单磷酸硫代烟酰胺-α-D-核苷(结构式(1)所示的化合物)和吗啡啉单磷酸腺苷以及二者的制备方法。本发明提供的硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的全化学制备方法无需任何生物合成的步骤和方法,避免了使用生物酶以及由生物酶带来的产品酶解的问题,从而具有成本低的优点;并且本发明提供的硫代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的全化学制备方法,可以同时分别合成所述稳定中间体,从而具有成本低且合成效率高的优点。

    纯化丙酮酸激酶的方法

    公开(公告)号:CN102010854B

    公开(公告)日:2012-11-14

    申请号:CN201010532789.7

    申请日:2010-11-01

    IPC分类号: C12N9/12

    摘要: 本发明提供一种纯化诊断用丙酮酸激酶的方法,其包括如下步骤:(1)将发酵液调节pH、匀浆,(2)稳定化处理,(3)热冷处理,(4)加酸碱处理,(5)用PEG(聚乙二醇)沉淀法将酶从含有杂离子的酶中沉淀出来,将沉淀重悬,继续用PEG沉淀法洗去其中残余的杂离子,(6)酶沉淀经重悬,加入单宁酸使残留的部分PEG和单宁酸结合生成沉淀并离心除去,上清经冷冻升华干燥获得符合试剂盒纯度要求的诊断酶。该方法简单易行,可以很方便地从含有钠、钾、氨等离子和杂蛋白的发酵粗酶液中将酶提纯出来,获得符合诊断原料要求的酶。该方法酶的得率高,杂离子水平可控制,无需上柱脱盐,无需透析,易于扩大生产。