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公开(公告)号：CN103981214B
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201410235525.3
申请日：2014-05-28
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种将外源基因导入粳稻品种8m30的水稻细胞的方法。具体地讲，本发明是通过农杆菌介导，将外源基因导入到闭颖授粉的粳稻品种8m30中。在遗传转化过程中，本发明采用了特制的培养基以及比常规介导方法更好地转化方式。通过PCR检测鉴定，表明外源基因已导入8m30中。该方法成功实现了闭颖授粉的粳稻品种的遗传转化，在加快性状改良过程同时，可避免花粉外传导致的基因漂移。
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公开(公告)号：CN104017821B
公开(公告)日：2016-07-06
申请号：CN201410209304.9
申请日：2014-05-16
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明涉及一种定向编辑颜色决定基因OsCHI创制褐壳水稻材料的方法，包含以下步骤：在颖壳颜色决定基因OsCHI外显子区选取靶标片段并构建植物CRISPR/Cas9打靶重组载体，将该重组载体导入水稻细胞并再生成苗，在载体中的表达框的作用下对水稻细胞进行剪切，触发水稻细胞DNA的自我修复功能。再通过对再生株系基因组目标片段的测序，获取携带两个等位OsCHI基因同时发生功能缺失突变的株系，经过颖壳颜色鉴定，即为所创制的褐壳水稻材料。实验表明，本方法可利用颖壳颜色决定基因OsCHI快速创制褐壳水稻材料。
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公开(公告)号：CN103849621B
公开(公告)日：2015-12-30
申请号：CN201410111492.1
申请日：2014-03-24
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N1/21 , A01H5/00 , C12R1/01
Abstract: 本发明提供一种植物冷诱导表达启动子Poscold1及其应用。本发明还提供了含有该启动子的表达盒、植物表达载体、宿主菌和转化子。具体而言，本发明将上述启动子应用在植物转基因工程中。本发明提供的启动子可以在冷诱导的条件下启动外源基因在植物中表达，适用于任何植物，尤其能够驱动外源基因在水稻植株中诱导表达，因此可以用于提高和改善水稻的生长特性，从而培育出理想的耐冷水稻品种。
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公开(公告)号：CN105002176A
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201510547897.4
申请日：2015-08-28
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供了一种用于水稻温敏不育基因tms5的功能标记、利用该功能标记检验样品是否为含有tms5基因的方法、利用该功能标记基因判断两系温敏水稻的种子纯度的方法以及其在培育不育系中的应用。本发明根据水稻tms5基因突变位点序列，在PCR引物中引入错配碱基，使含有tms5基因(突变型)的水稻PCR扩增产物出现一个限制性内切酶Rsa I的酶切位点，而不含有tms5基因(野生型)的水稻PCR产物则没有这一酶切位点。通过Rsa I酶切PCR产物，可将含有tms5基因的水稻PCR扩增产物酶切成两个片段，而不含的却无法被切开，从而进行区分。本发明采用直接酶切tms5扩增产物的设计，与前人相比，一方面简化了检测流程，另一方面也避免了假阳性结果的出现。
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公开(公告)号：CN103882023B
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201410123833.7
申请日：2014-03-27
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N1/21 , A01H5/00
Abstract: 本发明提供了一种植物干旱胁迫诱导表达启动子PosDro2及其应用。本发明还提供了含有该启动子的表达盒、植物表达载体、宿主菌和转化子。本发明将上述启动子应用在植物转基因工程中。本发明所克隆的水稻启动子PosDro2能够调控基因在干旱胁迫诱导的条件下在植株中集中表达，在实际应用中具有显著价值。通过该启动子对农作物品种进行基因改造，如通过该启动子调控目标基因在植株中在干旱胁迫诱导的条件下表达，可以提高和改善水稻的生长特性和抗旱能力，代替35S等组成型启动子，从而培育出理想的生物安全性高的转基因耐旱植物品种。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104004782A
公开(公告)日：2014-08-27
申请号：CN201410209121.7
申请日：2014-05-16
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明涉及一种延长水稻生育期的育种方法，包含以下步骤：在水稻生育期决定基因Ehd3外显子区选取靶标片段并构建植物CRISPR/Cas9打靶重组载体，导入水稻细胞并再生成苗；利用载体中的表达框实现对水稻细胞中Ehd3外显子区DNA的剪切，从而引起水稻细胞的自我修复；通过对再生株系基因组目标片段的测序，获取携带两个等位Ehd3基因同时发生功能缺失突变的株系，经过表型鉴定，确认再生植株生育期的延长。实验表明，本方法可快速获得生育期延长的水稻材料。
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公开(公告)号：CN103993039A
公开(公告)日：2014-08-20
申请号：CN201410245505.4
申请日：2014-06-04
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种利用PMI(phosphomannose isomerase，磷酸甘露糖异构酶)筛选标记将外源基因导入闭颖授粉粳稻的方法。具体而言，本发明通过含有pCAMBIA1381-PMI载体的农杆菌菌株EHA105介导，以甘露糖为筛选剂，将外源基因导入到闭颖授粉的粳稻品种8m30中。通过PCR检测鉴定，表明外源基因已导入8m30中。该方法成功实现了闭颖授粉的粳稻品种的遗传转化，且无需使用抗生素或除草剂筛选，在加快性状改良过程同时，避免花粉外传导致的基因漂移，提高了环境友好程度。
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公开(公告)号：CN103993038A
公开(公告)日：2014-08-20
申请号：CN201410245313.3
申请日：2014-06-04
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明提供一种利用PMI(phosphomannose isomerase，磷酸甘露糖异构酶)筛选标记将外源基因导入闭颖授粉籼稻的方法。具体而言，本发明通过含有pCAMBIA1381-PMI载体的农杆菌菌株EHA105介导，以甘露糖为筛选剂，将外源基因导入到闭颖授粉的籼稻品种9m90中。导入结束后，通过PCR检测鉴定，证实外源基因已导入9m90中。该方法成功实现了闭颖授粉的籼稻品种的遗传转化，且无需使用抗生素或除草剂筛选，在加快性状改良过程同时，避免花粉外传导致的基因漂移，提高了环境友好程度。
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公开(公告)号：CN103981215A
公开(公告)日：2014-08-13
申请号：CN201410225911.4
申请日：2014-05-23
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于基因工程的骨干质粒载体，所述骨干质粒载体中，向导RNA表达框和Cas9核酸酶表达框位于同一双元载体中，向导RNA表达框由水稻U6启动子，壮观霉素抗性基因、人工合成的sgRNA骨架序列和Poly-T终止子依次构成；Cas9核酸酶表达框由ZmUBI启动子，水稻偏好密码子改造后的Cas9编码序列和35s终止子依次构成。本发明还提供了利用所述质粒载体构建的含有靶标序列的重组载体，及其在水稻基因打靶中的应用。
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公开(公告)号：CN103981211A
公开(公告)日：2014-08-13
申请号：CN201410209551.9
申请日：2014-05-16
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明涉及一种创制闭颖授粉水稻材料的育种方法，包含以下步骤：在水稻闭颖授粉决定基因DEP2外显子区选取靶标片段并构建植物CRISPR/Cas9打靶重组载体，导入水稻细胞并再生成苗，通过剪切造成水稻细胞DEP2基因出现功能缺失突变，在通过对再生株系基因组目标片段的测序，获取携带两个等位DEP2基因同时发生功能缺失突变的株系，经过表型鉴定，确认再生植株开花授粉由开颖转为闭颖。实验表明，本方法可快速获得闭颖授粉水稻材料。
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