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公开(公告)号：CN106635950A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201710006948.1
申请日：2017-01-05
Applicant: 南方医科大学珠江医院
IPC: C12N5/00
Abstract: 本发明公开了一种支原体污染的处理方法，其包括如下步骤：获取待处理的细胞；用含10ug/mL环丙沙星的培养基培养所述待处理的细胞；定时更新所述培养基，并且使所述待处理的细胞的生长密度保持在50％‑80％；检测不到支原体污染的情况之后停止使用所述培养基。本发明一种支原体污染的处理方法采用在培养基中添加环丙沙星的方法去除支原体，达到了在对细胞的影响小情况下，即并不是采用先灭活后丢弃方式，彻底清除支原体污染的目的，同时还具有停止使用环丙沙星后不复发的优势。
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公开(公告)号：CN105154471A
公开(公告)日：2015-12-16
申请号：CN201510489709.7
申请日：2015-08-11
Applicant: 南方医科大学珠江医院
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开一种低表达或不表达PERV的肝细胞的制备方法，其包括以下步骤：(1)分别制备含有应用于RNA干扰技术的siRNA的重组载体、应用于CRIPRS/Cas9技术的gRNA的重组载体和含有应用于所述CRIPRS/Cas9技术的Cas9的载体；(2)将所述三种载体共同转染至猪体细胞，培养所述经转染的猪体细胞，筛选并鉴定以获得单克隆转基因猪体细胞；(3)利用体细胞核移植技术获得含有所述转基因猪体细胞的核基因的转基因猪；(4)提取所述转基因猪的肝细胞。本发明低表达或不表达PERV的肝细胞的制备方法对PERV基因实现了转录前敲除和转录后抑制，技术方案有效可行。
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公开(公告)号：CN103710360A
公开(公告)日：2014-04-09
申请号：CN201310643626.X
申请日：2013-12-03
Applicant: 南方医科大学珠江医院
Abstract: 本发明公开一种提高HepGL肝癌细胞氨基甲酰磷酸合成酶表达的方法，包括步骤：将HepGL肝癌细胞中提取的CPS1基因组DNA进行重亚硫酸盐处理；对根据处理后DNA扩增的CPS1启动子区域进行甲基化特异性基因扩增；将扩增出的甲基化序列进行测序；根据甲基化位点周围的碱基序列构建TALENs表达质粒及与甲基化位点同源的非甲基化同源质粒，其中，同源质粒中同源非甲基化序列为CG突变为CA的突变序列；将TALENs表达质粒和同源质粒转染至HepGL肝癌细胞中；筛选发生转染的HepGL肝癌细胞，并对其进行Q-PCR和蛋白质印迹法处理，以检测细胞中CPS1的mRNA及蛋白的表达量。本发明方法能够增强HepGL肝癌细胞代谢氨的能力。
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公开(公告)号：CN103690997A
公开(公告)日：2014-04-02
申请号：CN201310654387.8
申请日：2013-12-05
Applicant: 南方医科大学珠江医院
IPC: A61L27/36
Abstract: 本发明公开一种用于制备去细胞肝脏支架的试剂盒，包括溶栓液、灌注液I、灌注液II、灌注液III及灌注液IV。溶栓液的各组分及浓度为：尿激酶100000IU/L、NaCL 9g/L；灌注液I的各组分及浓度为：EDTA 0.2g/L、NaCL 9g/L；灌注液II的各组分及浓度为：十二烷基硫酸钠5g/L、NaCL 9g/L；灌注液III的组分及浓度为：DNase I0.01g/L；灌注液IV的组分及浓度为：过氧乙酸0.01%。溶栓液、灌注液I、灌注液II、灌注液III及灌注液IV依次对肝脏进行灌注，可制备去细胞肝脏支架，此方法去肝脏细胞效果稳定，能够保留完整的细胞外基质结构及胶原蛋白等成分。
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公开(公告)号：CN103630679A
公开(公告)日：2014-03-12
申请号：CN201310597958.9
申请日：2013-11-22
Applicant: 南方医科大学珠江医院
IPC: G01N33/533
CPC classification number: G01N33/582 , G01N33/5014 , G01N33/5091
Abstract: 本发明公开了一种单核淋巴细胞体内示踪方法，包括步骤：采集食蟹猴腋窝处的淋巴结；利用密度梯度离心法获取淋巴结中的单核淋巴细胞；将单核淋巴细胞进行荧光染色；将染色后的单核淋巴细胞输注至食蟹猴掌侧大鱼际下方的结缔组织中；再次采集与所述输注位置同侧的食蟹猴腋窝处的淋巴结，并对再次采集的淋巴结采用流式细胞仪进行检测。通过上述方法，本发明能够使荧光染色后的单核淋巴细胞富集于淋巴结中，以便进行免疫示踪。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102311938B
公开(公告)日：2013-11-06
申请号：CN201110276700.X
申请日：2011-09-16
Applicant: 南方医科大学珠江医院
IPC: C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种用于肝细胞培养的无血清培养基，其包含基础培养基和添加组分。其中，所述添加组分包括：胰岛素0.1～10μg/mL、转铁蛋白0.5～10μg/mL、亚硒酸钠5～10μg/L、表皮生长因子1～100ng/mL、肝细胞生长因子1～100ng/mL、纤粘连蛋白0.1～1μg/mL、地塞米松0.1～10nmol/mL和胰高血糖素0.05～5μg/mL。本发明所提供的无血清培养基不含有胎牛血清及不含任何动物来源成份，能提供细胞生长增值所需的充足营养与良好环境，各添加组份能通过各种机制在肝细胞培养过程中有效地代替血清成分，细胞生长良好，细胞形态、密度、活力、功能与含血清培养基基本相同。
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公开(公告)号：CN102010601B
公开(公告)日：2012-11-21
申请号：CN200910041767.8
申请日：2009-08-11
Applicant: 南方医科大学珠江医院
Abstract: 本发明提供一种以丝素蛋白、半乳糖基化壳聚糖为主要原料的肝细胞特异性大孔微载体及其制备方法和用途。该大孔微载体是由丝素蛋白和半乳糖基化壳聚糖在交联剂的作用下制得的球体，其中丝素蛋白的含量以重量百分数计占球体的50％-80％，半乳糖基化壳聚糖的含量以重量百分数计占球体的15％-40％，所述载体的直径为200-500μm，孔径为40-80μm。该微载体具有诱导和提高肝细胞在丝素/半乳糖基化壳聚糖(SF/GC)大孔微载体支架材料上的黏附性能，使其具有肝细胞特异性，适合于大规模培养肝细胞。
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公开(公告)号：CN101624473B
公开(公告)日：2012-10-10
申请号：CN200910041770.X
申请日：2009-08-11
Applicant: 南方医科大学珠江医院
Abstract: 本发明提供了一种新型的具有肝细胞特异性的丝素-半乳糖基化壳聚糖大孔微载体及其制备方法，以及利用它在微重力旋转培养条件下进行肝细胞培养的方法。本发明提供的新型微载体与常规的实心支架材料相比具有更大的表面积/体积，且窦隙结构与体内肝窦结构高度相似，因而更有利于肝细胞在支架材料上的黏附、更有利于细胞间的相互接触及氧气、营养成分的传送和代谢产物的排出，从而进一步提高体外肝细胞的培养密度和肝细胞功能。
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公开(公告)号：CN102579091A
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN201210035413.4
申请日：2012-02-16
Applicant: 南方医科大学珠江医院
IPC: A61B17/02
Abstract: 本发明涉及一种单孔腹腔镜下行脾脏切除手术的肝胃牵开装置，该牵开装置由把手(2)和设在把手(2)上的牵拉胃的牵开器及拨开肝脏的承托器组成，其中，所述的牵开器由具有轴向中心孔的操作杆1、多节杆1-2弯曲控制机构、夹持钳(3)和夹持钳(3)张开和闭合控制机构组成；所述的承托器由承托伞、承托伞的收拢和撑开机构以及逆止控制机构组成。本发明的牵开装置可同时进行拨开肝脏和牵拉胃的操作，显著减少了手术时伸入腹腔镜孔中的手术器械数量。
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公开(公告)号：CN102091360A
公开(公告)日：2011-06-15
申请号：CN201110021074.X
申请日：2011-01-18
Applicant: 南方医科大学珠江医院
IPC: A61M1/36
Abstract: 生物人工肝用往返翻转灌流型生物反应器及其处理方法。本发明公开一种生物反应容器，其包括圆柱形的容器体，所述容器体圆周侧壁的上端和下端分别设有液体进口，所述容器体的两个端部分别设有液体出口。所述容器体内的液体进口处设有一个压力缓冲环，所述容器体内两端部的液体出口处分别设细胞筛网。本发明还提供一种包括有所述生物反应容器的生物人工肝用往返翻转灌流型生物反应器及其处理方法。本发明的有益之处在于：微载体上培养的肝细胞能够均匀的分布在整个生物反应容器内部，在往返运动中对肝细胞损伤小，肝衰竭血浆能够充分接触，有效的避免灌流死腔和无效灌流，能够高效的对血浆进行解毒、并且操作简单、成本低、功效强，能够最大限度的发挥生物人工肝的治疗作用。
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