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公开(公告)号：CN103710360A
公开(公告)日：2014-04-09
申请号：CN201310643626.X
申请日：2013-12-03
Applicant: 南方医科大学珠江医院
Abstract: 本发明公开一种提高HepGL肝癌细胞氨基甲酰磷酸合成酶表达的方法，包括步骤：将HepGL肝癌细胞中提取的CPS1基因组DNA进行重亚硫酸盐处理；对根据处理后DNA扩增的CPS1启动子区域进行甲基化特异性基因扩增；将扩增出的甲基化序列进行测序；根据甲基化位点周围的碱基序列构建TALENs表达质粒及与甲基化位点同源的非甲基化同源质粒，其中，同源质粒中同源非甲基化序列为CG突变为CA的突变序列；将TALENs表达质粒和同源质粒转染至HepGL肝癌细胞中；筛选发生转染的HepGL肝癌细胞，并对其进行Q-PCR和蛋白质印迹法处理，以检测细胞中CPS1的mRNA及蛋白的表达量。本发明方法能够增强HepGL肝癌细胞代谢氨的能力。
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