一种硫酸盐还原菌直接倍比稀释PCR快速定量检测方法

    公开(公告)号:CN100372943C

    公开(公告)日:2008-03-05

    申请号:CN200510010459.0

    申请日:2005-10-21

    Inventor: 马放 魏利

    Abstract: 一种硫酸盐还原菌直接倍比稀释PCR快速定量检测方法,涉及水处理过程中硫酸盐还原菌(SRB)的定量检测方法。现在检测方法存在检测周期较长、不能有效的和即时的指导生产实践和检测费用较高等缺点。本发明依次包括以下步骤:(1)制备“菌体前处理缓冲液”;(2)菌体的制备;(3)倍比稀释;(4)进行冰上的PCR操作;(5)PCR在扩增仪上的扩增;(6)扩增产物于1.0%的琼脂糖电泳检测;(7)结果观察,查表记数。本发明所述方法记数结果准确、可有效的缩短计数时间、真实的反映生产实际情况、降低检测费用,利于推广应用。

    采用电气石载锰抑制硫酸盐还原菌的无机粉剂及制备方法

    公开(公告)号:CN101120682A

    公开(公告)日:2008-02-13

    申请号:CN200710072768.X

    申请日:2007-09-06

    Abstract: 采用电气石载锰抑制硫酸盐还原菌的无机粉剂及制备方法,它涉及抑菌剂及其制备方法。它解决了现有有机抗菌剂的安全性差,还存在耐热性差、易分解和使用寿命短的问题。本发明按质量百分比由电气石为60~99.99%、高锰酸钾固体或氯化锰固体或高锰酸钾固体和氯化锰固体的混合物为0.01~40%制成。制备方法为:采用纳米或亚微米电气石放入去离子水中搅拌;添加硝酸盐溶液;添加高锰酸钾固体或氯化锰固体或高锰酸钾固体和氯化锰固体的混合物和分散剂,搅拌;减压抽虑分离,用去离子水清洗;将粉末进行烘干;将粉末进行研磨、煅烧后粉末再次进行研磨后得无机抑菌粉剂。本发明不仅有效的提高了载锰量,而且提高了抑菌剂的杀菌效果。

    具有聚丙烯酰胺降解功能的硫酸盐还原细菌及其应用

    公开(公告)号:CN101104844A

    公开(公告)日:2008-01-16

    申请号:CN200710072029.0

    申请日:2007-04-13

    Inventor: 马放 魏利 李维国

    Abstract: 具有聚丙烯酰胺降解功能的硫酸盐还原细菌及其应用,本发明涉及一种微生物及其应用。本发明首次提出一种具有聚丙烯酰胺降解功能的硫酸盐还原细菌,本发明中的具有聚丙烯酰胺降解功能的硫酸盐还原细菌,命名为大庆沙门氏菌MF即Salmonella Daqing MF,在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,所属分类学属为沙门氏菌属Salmonella,所属分类学种为大庆沙门氏菌,保藏号为CGMCC No.1910。细菌为革兰氏阴性短杆菌,有荚膜,专性厌氧生长,细菌长短多变,在宽0.35μm~0.7μm×长0.7μm~1.6μm的范围之间,菌体无鞭毛;在固体培养基上生长时,为黑色圆形菌落,表面光滑,边缘不整齐。

    用于检测厌氧反硝化细菌的引物和荧光探针

    公开(公告)号:CN101086023A

    公开(公告)日:2007-12-12

    申请号:CN200710072335.4

    申请日:2007-06-08

    Inventor: 马放 魏利 姚杰

    Abstract: 用于检测厌氧反硝化细菌的引物和荧光探针,它涉及一种用于检测细菌的引物和探针。本发明解决了目前没有用于检测厌氧反硝化细菌的特意性引物和特意性探针,以及现有缺少特意性检测的方法存在记数准确率低、方法操作繁琐、费用高、周期长的问题。本发明的上游引物的基因序列为:5′-ATGCGTAGCCGACCTGAGA-3′;下游引物的基因序列为:5′-CGTCAGACTTTCGTCCATTGC-3′;荧光探针的基因序列为:5′-CGGGAGGCAGCAGT-3′,荧光探针的5′端标记报告荧光基团FAM,3′端标记淬灭荧光基团TAMRA-MGB。本发明为厌氧反硝化细菌的检测提供了一种特意性引物和特意性探针,能够提高检测的记数准确率、简化操作、降低费用、缩短了检测周期,在生产中具有实际意义。

    用于检测硫酸盐还原菌的引物和荧光探针

    公开(公告)号:CN101086021A

    公开(公告)日:2007-12-12

    申请号:CN200710072333.5

    申请日:2007-06-08

    Inventor: 魏利 马放 李维国

    Abstract: 用于检测硫酸盐还原菌的引物和荧光探针,它涉及用于检测微生物的引物和探针。它解决了目前SRB菌的定量检测方法存在检测时间长、非特异性高、检测结果偏低的缺陷。上游引物5′-GTTCCCTGCTCGTGCCCT-3′;下游引物5′-TTCCTTGAAGAAGATGTACGGGTT-3′。荧光探针由报告荧光基团、淬灭荧光基团和探针基因序列组成;探针基因序列为5′-AATGGTGGATGGAAGAAGGC-3′,探针基因序列5′端标记的报告荧光基团是FAM,探针基因序列 3′端标记的淬灭荧光基团是TAMRA。本发明引物和荧光探针特异性高,使用本发明的引物和荧光探针进行荧光定量PCR检测硫酸盐还原菌,检测时间短、从样本的模板DNA提取到荧光定量PCR检测全过程仅需6h。

    一种梭状芽胞杆菌属大庆梭菌及其应用

    公开(公告)号:CN101054567A

    公开(公告)日:2007-10-17

    申请号:CN200710072004.0

    申请日:2007-04-06

    Inventor: 魏利 马放

    Abstract: 一种梭状芽胞杆菌属大庆梭菌及其应用,它涉及一种微生物及其应用。它解决了目前难于去除或降解油田污水中的聚丙烯酰胺的问题。梭状芽胞杆菌属大庆梭菌-WL保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日期为2007年1月10日,保藏号为CGMCC No.1911;大庆梭菌-WL为革兰氏阳性杆菌,内生芽孢,兼性厌氧,在pH 5.0~11.0、10~65℃的条件下生长,菌株长短多变,宽为0.4μm~0.8μm,长为1.4μm~4μm,无鞭毛。本发明梭状芽胞杆菌属大庆梭菌-WL属于一种新菌种。梭状芽胞杆菌属大庆梭菌-WL能以聚丙烯酰胺为唯一碳源,可用于生物降解聚丙烯酰胺。将10mL菌液浓度为6×106个/mL的梭状芽胞杆菌属大庆梭菌-WL加入90mL聚丙烯酰胺浓度为500mg/L的油田污水中培养20天后油田污水中聚丙烯酰胺的降解率为35%~76%。

    DNA前处理缓冲液及菌体DNA、核酸DNA的制备方法

    公开(公告)号:CN1752094A

    公开(公告)日:2006-03-29

    申请号:CN200510010457.1

    申请日:2005-10-21

    Inventor: 魏利 马放

    Abstract: DNA前处理缓冲液及菌体DNA、核酸DNA的制备方法,它涉及环境微生物样本直接用于PCR反应的DNA前处理缓冲液及菌体DNA、核酸DNA的制备方法。针对环境微生物样本中DNA提取的难度较大,得率小,甚至无法提取,样品损失较大,费用较高,不能全面真实反映环境样本中微生物的种类和数量的问题,本发明的DNA前处理缓冲液由贮存液和SDS制成。常规的污水(OD值≤0.1)菌体DNA制备:震荡、离心、弃上清液、剩余的样本中加入DNA前处理缓冲液、震荡、离心、弃上清液、震荡。对于污泥处理主要采用梯度离心的方法。一步法快速获得核酸DNA的方法是在菌体DNA的基础进行PCR扩增。本发明具有成本低廉、快速的优点。

    油田水质硫酸盐还原菌的定量检测方法

    公开(公告)号:CN1696306A

    公开(公告)日:2005-11-16

    申请号:CN200510009980.2

    申请日:2005-05-16

    Inventor: 马放 魏利 陈忠喜

    Abstract: 油田水质硫酸盐还原菌的定量检测方法,它涉及油田水系统中常规污水、含聚污水、地面工艺的水处理过程中硫酸盐还原菌(SRB)的培养及厌氧菌的计数。本发明的目的是为了解决现有的油田水质SRB菌检测中,检测周期长、不能全面真实的反映水中的SRB菌的数量、不能即时的指导生产、检测费用较高的问题。本发明选用在同一个稀释梯度下做三至五个平行样,吸取1mL注入备用的培养基中;将MPN的培养基放到摇床上,在38℃、180转/min条件下摇动;结果观察:第四天和第七天分别计数。本发明的方法具有记数更加准确,有效地缩短了计数时间,五管平行法四天可以实现初步计数,七天可以达到准确计数,真实的反应了生产实际情况、降低了检测费用的优点。

    一种基于厌氧悬浮填料的A/O工艺处理油田含聚污水的方法

    公开(公告)号:CN105417706B

    公开(公告)日:2018-04-27

    申请号:CN201511027517.0

    申请日:2015-12-30

    Abstract: 一种基于厌氧悬浮填料的A/O工艺处理油田含聚污水的方法,本发明涉及基于厌氧悬浮填料的A/O工艺处理油田含聚污水的方法。本发明是要解决工业中厌氧悬浮填料替代厌氧活性污泥,开发新型工艺解决污水回注中悬浮物和石油类去除的问题,而提供了一种基于厌氧悬浮填料的A/O工艺处理油田含聚污水的方法。一、培养厌氧活性污泥;二、在A/O工艺反应器中浮填填料挂膜;三、将带有浮填填料的A/O工艺反应器连续流运行处理含聚污水。本发明应用于污水处理领域。

    一种基于BESI技术的炼化废水反渗透浓缩液深度处理方法

    公开(公告)号:CN105541027B

    公开(公告)日:2018-03-30

    申请号:CN201511029118.8

    申请日:2015-12-30

    Abstract: 本发明是一种基于BESI技术的炼化废水反渗透浓缩液深度处理方法,涉及炼化废水深度处理领域。本发明针对炼化废水反渗透浓缩液深度处理技术的问题,进而提出一种基于BESI技术的炼化废水反渗透浓缩液深度处理方法。本发明方法针对储水池中的炼化废水,采用由厌氧段、兼性厌氧段、好氧段共同构成的BESI技术对炼化废水反渗透浓缩液进行处理;然后进行紫外杀菌处理和过滤处理,并将过滤出水作为BESI技术的最后出水,即深度处理后的废水反渗透浓缩液,出水达到一级A排放标准。本发明适用于炼化废水反渗透浓缩液深度处理。

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