公开(公告)号：CN114045266A

公开(公告)日：2022-02-15

申请号：CN202111456116.2

申请日：2021-12-01

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  曹雪铭 ,  王宇 ,  雷红涛 ,  孙远明 ,  罗林 ,  王弘 ,  沈玉栋

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/12 ,  C07K14/77 ,  G01N33/577 ,  G01N33/543 ,  G01N33/533 ,  G01N33/53 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种抗米酵菌酸的单克隆抗体及其应用，所述单克隆抗体为基础的所建立的免疫分析法灵敏度高，可补充目前灵敏度低的需求。其中酶联免疫方法对米酵菌酸的线性检测范围为9.72～32.98ng/mL，检测限为5.79ng/mL；其中双模式‑比色荧光传感器分析方法中，比色法对米酵菌酸检测的线性检测范围为11.29～30.46ng/mL，检测限为8.45ng/mL，提高可视化检测的准确性，而荧光法对米酵菌酸检测的线性检测范围为8.49～46.19ng/mL，检测限为4.78ng/mL，两者的结合是独立响应但又相互确认而显示出对目标物的优异检测性能。

公开(公告)号：CN111499737B

公开(公告)日：2022-02-11

申请号：CN202010068524.X

申请日：2020-01-21

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  司睿 ,  雷红涛 ,  王锋 ,  张玉琪 ,  张瑾如 ,  徐振林 ,  肖治理

IPC: C07K16/12 ,  C12N15/13 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种特异性检测藻毒素类物质的纳米抗体及酶联免疫分析方法，所述纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本纳米抗体可以识别多种含藻毒素(NOD、MC‑LR、MC‑YR、MC‑WR和MC‑RR)，且检测结果准确、效果好、稳定性好、特异性好。该方法可以广泛的应用于饮用水中藻毒素的残留检测，避免了利用单克隆抗体和多克隆抗体建立免疫检测方法时候，目前单克隆抗体和多克隆抗体均表现稳定性差、易失活的缺点的不足，使酶联免疫分析检测法更具市场前景。本方法具有很大的应用推广价值。

公开(公告)号：CN111269319B

公开(公告)日：2021-10-29

申请号：CN202010108408.6

申请日：2020-02-21

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  杨媛媛 ,  沈玉栋 ,  张咏仪 ,  陈浩宇 ,  徐振林 ,  肖治理 ,  孙远明

IPC: C07K16/44 ,  C12N15/13 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种特异性纳米抗体Nb2F7及其应用。本发明提供了一种特异性纳米抗体Nb2F7，所述纳米抗体Nb2F7的VHH的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该纳米抗体Nb2F7能够特异性识别19‑NT，且具有优异的有机溶剂耐受性，不会受到在实际样品检测前处理过程中加入的有机溶剂的影响，检测结果准确度高，对19‑NT的检测范围为0.34ng/mL～8.32ng/mL，IC50为1.14ng/mL，最低检测限为0.16ng/mL，检测灵敏度高，且操作简单、所耗时间较短；另外，该纳米抗体Nb2F7的制备方法简单，具有普遍适用性；因此，该纳米抗体Nb2F7在检测19‑去甲睾酮、制备19‑去甲睾酮检测试剂/试剂盒中具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN111269320B

公开(公告)日：2021-09-14

申请号：CN202010108416.0

申请日：2020-02-21

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  王弘 ,  杨媛媛 ,  张咏仪 ,  陈浩宇 ,  徐振林 ,  肖治理 ,  孙远明

IPC: C07K16/44 ,  C12N15/13 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种特异性识别19‑去甲睾酮的纳米抗体NT8及其应用。本发明筛选得到了一种能与19‑NT特异性结合的纳米抗体NT8，所述纳米抗体NT8的VHH的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该纳米抗体NT8具有较高的热稳定性和有机耐受性，检测19‑NT的范围为0.48ng/mL～4.93ng/mL，IC50为1.53ng/mL，最低检测限(LOD)为0.13ng/mL，检测灵敏度强；基于该纳米抗体NT8，本发明还提供了一种19‑去甲睾酮免疫学检测方法，该方法应用于19‑NT残留的实际样品检测时的操作简单、所耗时间短、灵敏度强、准确度高；因此，该纳米抗体NT8在检测19‑去甲睾酮或制备19‑去甲睾酮检测试剂/试剂盒中具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN108794632B

公开(公告)日：2021-07-09

申请号：CN201810229096.7

申请日：2018-03-20

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  张玉琪 ,  张瑾如 ,  徐振林 ,  孙远明 ,  司睿 ,  沈玉栋 ,  杨金易 ,  肖治理

IPC: C07K16/44 ,  C12N15/13 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种广谱特异性识别二乙氧基有机磷农药的纳米抗体及酶联免疫分析方法。本发明首先构建了一种噬菌体展示纳米抗体文库，并从噬菌体展示纳米抗体文库中筛选得到一种针对二乙氧基有机磷农药的纳米抗体，该纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码该纳米抗体的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该纳米抗体能够检测多种二乙氧基有机磷农药，能够广谱特异性识别二乙氧基有机磷农药，且检测结果准确、效果好、稳定性好。该方法可以广泛的应用于农产品中二乙氧基有机磷农药残留的检测，有很大的应用推广价值。

公开(公告)号：CN112939832A

公开(公告)日：2021-06-11

申请号：CN202110170648.3

申请日：2021-02-08

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  张政 ,  杨金易 ,  徐振林 ,  王弘 ,  雷红涛 ,  孙远明

IPC: C07C323/52 ,  C07C319/20 ,  C07C319/28 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K14/79 ,  C07K14/795 ,  C07K14/47 ,  C07K16/44 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种泰妙菌素半抗原TMLO、人工抗原、抗体及其制备方法和应用。本发明首先提供了一种泰妙菌素半抗原TMLO，进一步利用该泰妙菌素半抗原与载体蛋白偶联得到的人工抗原作为免疫原免疫小鼠，制备得到泰妙菌素单克隆抗体。本发明制备得到的抗体的效价、特异性、亲和力都比较好，其对泰妙菌素的最低检测限为0.09ng/mL，IC50为0.53ng/mL，线性范围为0.21～1.35ng/mL；具有简便快速、特异性强、线性范围广，灵敏度高的特点，在泰妙菌素的快速有效检测中具有良好的应用前景和广阔的发展空间。

公开(公告)号：CN110734497B

公开(公告)日：2021-05-28

申请号：CN201911025013.3

申请日：2019-10-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  吴会玲 ,  傅慧君 ,  陈子键 ,  沈玉栋 ,  孙远明 ,  肖治理 ,  王弘

IPC: C07K16/44 ,  C12N15/13 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  G01N33/577 ,  G01N33/543 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种直接识别异丙威的单链抗体及其制备方法和应用，该单链抗体氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示；其编码基因核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。利用该单链抗体异丙威的ELiSA检测方法，可实现大量样品的快速检测筛选，降低成本；该单链抗体能通过基因工程技术体外表达，可在细菌中大规模经济化生产，避免单克隆细胞的丢失风险；该单链抗体与抗原的结合可被游离的半抗原异丙威竞争性抑制，具有很好的抗原结合活性。该基因工程抗体在异丙威的免疫检测和大量样品的快速检测筛选方面具有很好的应用前景。

公开(公告)号：CN112695052A

公开(公告)日：2021-04-23

申请号：CN202011568864.5

申请日：2020-12-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  李虹辉 ,  杨金易 ,  王弘 ,  徐振林 ,  孙远明

IPC: C12N15/70 ,  C12P21/02 ,  C07K19/00 ,  C07K1/22 ,  C07K1/34 ,  C07K1/36

Abstract: 本发明公开了一种重组人糖皮质激素受体GRα‑His蛋白及其表达和纯化方法。本发明通过构建重组人糖皮质激素受体GRα蛋白的原核表达载体，使重组人糖皮质激素受体GRα在大肠杆菌中高效表达，表达的重组蛋白以融合蛋白形式存在，经纯化、鉴定获得重组人糖皮质激素受体GRα‑His蛋白。本发明的重组人糖皮质激素受体GRα‑His蛋白通过SPR技术检测与糖皮质激素药物(氢化可的松、地塞米松、泼尼松)结合，显示其均具有较强的亲和力，其亲和力分别为2.99×10‑5M、5.41×10‑4M、1.51×10‑4M，有利于检测动物源性食品药品中糖皮质激素的残留。

公开(公告)号：CN110054576B

公开(公告)日：2021-03-12

申请号：CN201910300552.7

申请日：2019-04-15

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 雷红涛 ,  许晶晶 ,  沈兴 ,  徐振林 ,  孙远明 ,  杨金易 ,  沈玉栋 ,  王弘 ,  肖治理

IPC: C07C319/18 ,  C07C321/14 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  C07K16/06 ,  G01N33/535 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明公开了一种异丙甲草胺手性半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法和应用。所述异丙甲草胺手性半抗原具有如式(I)所示的分子结构：本发明首先将消旋异丙甲草胺与3‑巯基丙酸反应，得到半抗原；再将此半抗原进行手性拆分，拆分为四个立体异构体半抗原αRS‑、αRR‑、αSS‑、αSR‑MMPA，然后分别与载体蛋白偶联制得人工抗原。将这4种人工抗原分别免疫动物获取对映选择性抗体，得到的4种抗体对其对映体药物进行检测的IC50分别为28.89ng/mL、13.34ng/mL、27.07ng/mL、5.68ng/mL，特异性强、灵敏度高，可用于食品安全的现场快速检测，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN112028786A

公开(公告)日：2020-12-04

申请号：CN202010807300.6

申请日：2020-08-12

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 罗林 ,  罗双子 ,  徐振林 ,  孙远明 ,  杨金易 ,  蔡泽伟 ,  沈玉栋 ,  王弘 ,  雷红涛

IPC: C07C229/38 ,  C07C227/18 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53 ,  G01N33/543 ,  G01N33/58 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明提供一种酪胺半抗原、人工抗原、抗体及其制备与应用。酪胺半抗原具有式I所示的分子结构（式I），酪胺人工抗原具有式II所示的分子结构（式II）。本发明解决了现有技术中酪胺人工抗原、抗体制备方案不合理、重复性差的缺陷。利用本发明半抗原制得的人工抗原免疫动物得到的抗血清的效价可达1：1000，最低检测限为26.8ng/mL，半抑制浓度低至391.0ng/mL，所述抗体具有特异性高、灵敏度好、准确度高、线性范围广等显著优点。