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公开(公告)号：CN117285622A
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202311351414.4
申请日：2023-10-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种抗塞内卡病毒猪源Fab基因工程抗体及其制备方法和应用。利用单个B细胞抗体技术，从感染和免疫SVA的猪外周血中分选特异性结合SVA的单个B细胞，然后扩增获得SVA抗体IgG的VH和VL基因，并将其插入含CH1和CL的真核表达质粒中，在CHO‑S细胞中表达获得SVA特异性猪源Fab抗体，然后利用ELISA、病毒中和实验、WB和免疫荧光实验验证筛选出SVA高亲和力的特异性猪源Fab基因工程抗体。该技术获得抗体保留了重链和轻链可变区的天然配对，具有基因多样性好，效率高，自然宿主（猪）来源，需要细胞量少等优势。该技术获得的Fab抗体对研究SVA宿主特异性抗原位点的鉴定提供了重要支撑。
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公开(公告)号：CN116068175A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202211086588.8
申请日：2022-09-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 兰州兽研生物科技有限公司
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明提供了一种基于E2蛋白二聚体的猪瘟病毒管式化学发光抗体检测试剂盒及其应用，属于体外诊断产品技术领域。本发明提供的试剂盒包括猪瘟病毒管式化学发光抗体检测反应体系，其中包含的磁微粒混悬液中含有磁微粒偶联猪瘟病毒E2二聚体蛋白。与猪瘟病毒E2单聚体蛋白制备的试剂盒以及商品ELISA检测试剂盒相比，本发明所述试剂盒不仅能准确定量检测猪血清中猪瘟病毒的特异性抗体，并且具有自动化、高敏感性、高重复性检测特点，具有较高的市场竞争力。
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公开(公告)号：CN112725293B
公开(公告)日：2023-04-14
申请号：CN202110196505.X
申请日：2021-02-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/02 , G01N33/569 , G01N21/84 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于病毒双水相萃取技术领域，公开了一种双水相萃取浓缩纯化猪塞内卡病毒(SenecavirusA,SVA)粒子的方法，SVA繁殖；SVA的间接免疫荧光鉴定；三步双水相萃取方法的建立；SVA含量的测定；蛋白印迹试验；SVA的电子显微镜鉴定。本发明在SVA培养液中加入低浓度的聚乙二醇和无机盐后，除去细胞碎片，再加入聚乙二醇形成双水相体系即能够快速的获得浓缩纯化的猪SVA病毒粒子；通过双水相萃取技术可实现病毒粒子的快速分离，且病毒粒子回收率和纯度均较高，工艺简单、成本低；通过三步双水相萃取的方法，实现了从细胞培养液中浓缩纯化猪SVA病毒粒子的目的，并可在实验室和规模化生产中同时应用。
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公开(公告)号：CN112301042B
公开(公告)日：2022-09-16
申请号：CN202011215796.4
申请日：2020-11-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/41 , C12N15/63 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了A型塞内卡病毒SVA/HN/11/2017兰兽研全长感染性cDNA克隆及其构建方法及应用，属于病毒技术领域。本发明在对SVA/HN/11/2017兰兽研进行全基因组测定的基础上，在其基因组cDNA序列的5’端引入了T7启动子序列，在3’端引入Not I酶切位点序列，同时在2B基因处引入了Xho I酶切位点，消除了Xma I酶切位点，构建含SVA/HN/11/2017兰兽研全长cDNA的重组质粒。基于感染性cDNA克隆拯救得到的病毒在制备A型塞内卡病毒标记疫苗中的应用。本发明提供的感染性cDNA克隆及制备方法为深入开展SVA的基础和应用研究提供了有效的平台，具有重要的科学应用价值。
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公开(公告)号：CN114854698A
公开(公告)日：2022-08-05
申请号：CN202210682771.8
申请日：2022-06-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 李平花 , 卢曾军 , 查晶晶 , 马雪青 , 孙普 , 李冬 , 白兴文 , 曹轶梅 , 李坤 , 袁红 , 付元芳 , 包慧芳 , 刘在新 , 赵志荀 , 王健 , 张克强 , 陈应理 , 张强
Abstract: 本发明提供了一种复制滴度提高的O型口蹄疫病毒株及其构建方法和应用，属于生物制品技术领域。本发明通过口蹄疫病毒的反向遗传操作技术，在嵌合口蹄疫病毒O/XJ/CHA/2017株主要免疫基因重组病毒骨架上，进一步用口蹄疫病毒O/NXYCh/CHA/2018株的G‑H环基因替换其对应基因，构建的重组病毒rHN/XJ/NXGH引起100％致感染细胞病变的时间显著缩短到12h，感染细胞12h的复制滴度提高了5倍以上。重组病毒连续传代，遗传稳定性良好，且G‑H环的替换没有影响疫苗的免疫原性。因此，本发明提供的重组口蹄疫病毒株rHN/XJ/NXGH有潜力作为疫苗候选株，用于我国O型口蹄疫的有效防控。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113336845A
公开(公告)日：2021-09-03
申请号：CN202110598030.7
申请日：2021-05-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/10 , G01N33/543 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明提供了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白(N)的猪源单个B细胞抗体及竞争ELISA抗体检测试剂盒，属于病毒检测技术领域。本发明提供了PRRSVN蛋白的猪源单个B细胞抗体C8。试验表明以FMDV的3A表位单抗3A24作为包被抗体，捕获3AN融合蛋白后形成包被酶标板，以C8单抗作为检测抗体，采用竞争ELISA反应模式检测猪血清PRRSV抗体，制备的PRRSV抗体检测试剂盒，具有很好的敏感性和特异性，为PRRSV血清流行病学调查提供了一种新工具。
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公开(公告)号：CN112029735A
公开(公告)日：2020-12-04
申请号：CN202010893827.5
申请日：2020-08-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/86 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种口蹄疫病毒非结构蛋白3B优势表位缺失标记毒株及其制备方法和应用，属于生物技术和生物制品技术领域。口蹄疫病毒非结构蛋白3B优势表位缺失标记毒株，在非结构蛋白3B基础上发生优势表位完全缺失得到的口蹄疫病毒；所述非结构蛋白3B基础上发生优势表位完全缺失包括3B1中由GPYAGP突变为GPAAP、3B2中由GPYAGP突变为GPAAP和3B3中GPYEGP突变为GPYEAA。所述标记毒株在制备区分感染和疫苗免疫的口蹄疫标记疫苗中的应用，可以满足免疫预防和鉴别诊断的目的，用于我国FMD的有效预防、控制和净化。
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公开(公告)号：CN109682980B
公开(公告)日：2020-11-24
申请号：CN201910163194.X
申请日：2019-03-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明提供了一种检测口蹄疫病毒O型保护性抗体的试剂盒和检测方法，属于免疫学技术领域，所述试剂盒包括以下组分：捕获抗体；检测抗体；生物素；FMDV O型146S抗原；Strep‑HRP；TMB底物；包被缓冲液和封闭液；所述捕获抗体和检测抗体为口蹄疫病毒O型牛源广谱中和抗体。本发明提供的检测试剂盒和方法结合了病毒中和试验和液湘阻断ELISA两种方法的优点，检测方法操作简单，检测结果可靠精确。
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公开(公告)号：CN105777909B
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201610120101.1
申请日：2016-03-03
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , A61K39/135 , A61K47/64 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种猪趋化因子介导的A型口蹄疫靶向性复合表位蛋白，其氨基酸序列为序列表中SEQ ID No.2。本发明还提供包含上述猪A型口蹄疫靶向性复合表位蛋白的疫苗。应用本发明的疫苗免疫动物，一周后均可检测到FMDV特异性抗体，抗体效价不断升高，免疫四周时抗体效价最高。用1000个猪半数感染量（PID50）的A/SEA/97系HNXX株猪体适应毒攻击后，本发明的疫苗免疫组猪均可完全抵抗强毒攻击，攻毒后10天内无一头猪表现出临床症状。说明将A8抗原通过XCL1靶向XCR1受体，再用CpG激活树突状细胞能显著提高抗原的体液免疫和细胞免疫水平，因而，是一种有效的猪趋化因子介导的A型口蹄疫靶向性复合表位蛋白疫苗。
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公开(公告)号：CN109682980A
公开(公告)日：2019-04-26
申请号：CN201910163194.X
申请日：2019-03-05
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明提供了一种检测口蹄疫病毒O型保护性抗体的试剂盒和检测方法，属于免疫学技术领域，所述试剂盒包括以下组分：捕获抗体；检测抗体；生物素；FMDV O型146S抗原；Strep-HRP；TMB底物；包被缓冲液和封闭液；所述捕获抗体和检测抗体为口蹄疫病毒O型牛源广谱中和抗体。本发明提供的检测试剂盒和方法结合了病毒中和试验和液湘阻断ELISA两种方法的优点，检测方法操作简单，检测结果可靠精确。
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