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公开(公告)号:CN112779258A
公开(公告)日:2021-05-11
申请号:CN202110227210.4
申请日:2021-03-02
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/89
Abstract: 本发明公开了一种大黄鱼CRISPR/Cas9基因编辑方法,所述方法包括以下步骤:利用体外转录合成Cas9 mRNA和靶基因sgRNA,将它们与酚红混合,Cas9 mRNA和靶基因sgRNA的终浓度分别为1000 ng/μL和120 ng/μL,再利用显微注射的方式,将混合物导入卵膜变硬之前的大黄鱼受精卵中;孵化48 h后,检测并获得相应的基因突变体。本发明首次成功建立了大黄鱼基因编辑的方法,不仅可用于大黄鱼基因功能的研究,还为大黄鱼遗传改良育种开辟新的途径。
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公开(公告)号:CN111979355A
公开(公告)日:2020-11-24
申请号:CN202010898385.3
申请日:2020-08-31
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种大黄鱼虹彩病毒的TaqMan探针法荧光定量PCR检测试剂盒及制备方法,本发明以大黄鱼虹彩病毒LYCIV中的Laminin-like保守区序列作为扩增靶序列,设计合成了一对特异性引物及对应的TaqMan探针,建立了LYCIV TaqMan探针法荧光定量PCR检测方法,并开发成简便、快速、实用的检测试剂盒,本发明引物和探针的序列如下:正向引物F:5’-CGCTTGACCAAACAATCTTC-3’;反向引物R:5’-ATGAGCAATGGCGACCC-3’;荧光探针Q:5’-6-FAM–CTTCTTCTGTTGCTGACTGTGGCGTGTACTC-BHQ1-3’。
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公开(公告)号:CN110352986A
公开(公告)日:2019-10-22
申请号:CN201910600754.3
申请日:2019-07-04
Applicant: 福建农林大学 , 安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所 , 中国大洋矿产资源研究开发协会(中国大洋事务管理局)
Abstract: 本发明公开了一种含有芽孢杆菌Pc3和扑海因的组合物及其应用,该组合物有效成分由芽孢杆菌和扑海因组成,所述的芽孢杆菌和扑海因质量比为5:1~1:5。本发明还公开了含有芽孢杆菌Pc3和扑海因的杀菌组合物在防治油菜菌核病方面的应用。本发明的杀菌组合物与单剂相比对油菜菌核病的防治具有明显的增效作用,可显著提高防治效果;同时降低了油菜菌核病病原菌对扑海因的潜在耐药风险;减少了化学农药使用量,有效降低了农产品的农药残留和环境污染,对人畜、有益生物及环境安全。
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公开(公告)号:CN109517775A
公开(公告)日:2019-03-26
申请号:CN201811362411.X
申请日:2018-11-15
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明涉及一种大黄鱼IFNc基因大肠杆菌表达产物的制备方法与应用,本发明通过分子生物学手段,将大黄鱼干扰素c(IFNc基因)克隆后连接至大肠杆菌表达载体中,通过转化,诱导表达,获得重组表达产物,具体包括以下步骤:基因克隆、重组表达载体的构建、转化入大肠杆菌、IPTG诱导及表达产物的纯化等步骤。所获得的表达产物可诱导大黄鱼外周血白细胞表达抗病毒蛋白基因如Mx1、PKR和ISG15。
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公开(公告)号:CN109400706A
公开(公告)日:2019-03-01
申请号:CN201811360852.6
申请日:2018-11-15
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 抗大黄鱼IgM单克隆抗体及其制备方法。抗大黄鱼IgM单克隆抗体为杂交瘤细胞株IgM-9G7。制备大黄鱼IgM抗原;制备杂交瘤细胞株IgM-9G7;制备抗大黄鱼IgM的单克隆抗体。大黄鱼IgM单克隆抗体是由杂交瘤细胞株IgM-9G7产生、对大黄鱼IgM具有特异性的抗体。该细胞分泌的免疫球蛋白能够高效特异性结合大黄鱼IgM,最高效价达到2×104。将纯化的大黄鱼IgM免疫动物,取其产生抗大黄鱼IgM单克隆抗体的脾细胞与骨髓瘤细胞融合获得能够分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,该细胞株能分泌抗大黄鱼IgM的单克隆抗体。此抗体特异性高,灵敏度高,可用于大黄鱼IgM的结构分析、免疫应答水平检测等。
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公开(公告)号:CN120041453A
公开(公告)日:2025-05-27
申请号:CN202510206474.X
申请日:2025-02-25
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/65 , C12N15/85
Abstract: 本发明公开了一种大黄鱼SOCS3基因的启动子序列,如SEQ ID NO.1所示。将重组质粒pGL3‑SOCS3转染鲤上皮瘤(EPC)细胞,以海肾荧光素酶为内参,其萤火虫荧光素酶活性最高可达对照组的4.2倍,说明大黄鱼SOCS3启动子启动了下游报告基因的转录表达,具有启动子基础活性。将重组质粒pGL3‑SOCS3和pRL‑TK共转染EPC细胞,再加入poly(I:C),结果显示,Poly(I:C)可显著增强大黄鱼SOCS3启动子的活性,和对照组相比最高上升了1.7倍,说明大黄鱼SOCS3启动子可以响应外源的免疫刺激。本发明为研究大黄鱼 SOCS3 基因的转录调控机制提供优良的实验系统,也可用于高效表达外源基因或应用于转基因大黄鱼的研究,具有理论意义和实践价值。
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公开(公告)号:CN120040578A
公开(公告)日:2025-05-27
申请号:CN202510206915.6
申请日:2025-02-25
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了一种大黄鱼IL‑22重组蛋白,所述重组蛋白为大黄鱼IL‑22成熟肽序列,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过PCR扩增编码大黄鱼IL‑22成熟肽第31~190位氨基酸的基因片段,转化大肠杆菌进行异源表达,获得重组蛋白。本发明大黄鱼IL‑22重组蛋白可激活大黄鱼头肾细胞系(LYCK)中转录因子STAT3,此外,还可诱导大黄鱼免疫器官中炎症因子(IL‑1β、IL‑6和IL‑8)的表达,表明大黄鱼IL‑22重组蛋白具有明显的免疫调节作用,显示出其在水产免疫调节剂研发中的良好应用前景。
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公开(公告)号:CN119842711A
公开(公告)日:2025-04-18
申请号:CN202510121197.2
申请日:2025-01-26
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10
Abstract: 本发明属于基因工程领域,尤其涉及一种大黄鱼SOCS1基因启动子及其应用。所述大黄鱼SOCS1基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。将所述大黄鱼SOCS1基因启动子构建至pGL3.0载体,转染至鲤上皮瘤细胞(EPC)具有较高的基础活性,突变干扰素刺激响应元件(ISRE)基序,大黄鱼SOCS1基因启动子的活性显著下降;在病毒类似物poly(I:C)刺激下,该所述大黄鱼SOCS1基因启动子的活性进一步提高,而突变的启动子活性下降。本发明提供的所述大黄鱼SOCS1基因启动子可用于启动目的基因表达、鱼类抗病毒免疫机制研究及鱼类转基因育种。
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公开(公告)号:CN119842709A
公开(公告)日:2025-04-18
申请号:CN202510120762.3
申请日:2025-01-26
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/113 , A61K31/713 , A61P37/04
Abstract: 本发明公开了一种抑制大黄鱼SOCS3基因表达的miRNA模拟物及其应用,属于生物技术与基因工程领域。所述miRNA为miR‑181b,其核苷酸序列如SEQ ID NO .2所示。本发明公开了miR‑181b的模拟物,所述模拟物由正义链和反义链合成,其核苷酸序列如SEQ ID NO .3~SEQ ID NO .4所示,在大黄鱼原代淋巴细胞中转染miR‑181b模拟物,可显著降低大黄鱼SOCS3基因的mRNA水平,促进T、B淋巴细胞增殖,从而增强适应性免疫反应。因此,miR‑181b模拟物具有开发大黄鱼免疫调节剂的潜在应用价值。
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公开(公告)号:CN119709755A
公开(公告)日:2025-03-28
申请号:CN202510179021.2
申请日:2025-02-18
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/113 , C12N5/0783 , C12N5/0781 , A61P37/02
Abstract: 本发明公开了一种调控大黄鱼淋巴细胞增殖与分化的miRNA模拟物及其应用,属于分子生物技术与基因工程领域。所述miRNA为miR‑146a,本发明提供miR‑146a模拟物由正义链和反义链合成,其正义链序列为5'‑UGAGAACUGAAUUCCAUAGAUGG‑3',反义链序列为5'‑ AUCUAUGGAAUUCAGUUCUCAUU ‑3';该miR‑146a模拟物可在体内外显著促进大黄鱼T、B淋巴细胞的增殖,并促进大黄鱼T淋巴细胞向Th1、Th2型细胞方向分化,抑制其向Th17型细胞方向分化,从而增强大黄鱼的适应性免疫反应。因此miR‑146a模拟物具有开发成为大黄鱼免疫调节剂的潜在应用价值。
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