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公开(公告)号：CN102417929B
公开(公告)日：2014-07-09
申请号：CN201110369345.0
申请日：2011-11-21
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌PCR检测方法，包括如下步骤：根据鸭疫里默氏杆菌基因组DNA序列中gyrB基因的保守序列SEQ ID NO：1设计扩增引物；提取样品DNA，PCR法扩增；凝胶电泳检测扩增产物，判断样品是否含有鸭疫里默氏杆菌；所述判断具体为：如果电泳结果出现相应的单一扩增条带，则说明样品中含有鸭疫里默氏杆菌；如果没有出现相应的单一扩增条带，则样品中不含该菌。采用本发明的检测方法检测鸭疫里默氏杆菌，检测时间短，成本底，检测结果特异，结果判定简单。
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公开(公告)号：CN102012428B
公开(公告)日：2013-09-25
申请号：CN201010299524.7
申请日：2010-09-30
申请人： 四川农业大学实验动物工程技术中心
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/543 , G01N33/531
摘要： 本发明涉及基于抗重组UL51蛋白抗体的胶体金试纸，其由吸收垫、底板、硝基纤维膜、金标垫和样品垫组成，所述硝基纤维膜上的测试线由浓度≥1mg/mLA动物抗重组UL51蛋白抗体IgG包被而成，所述金标垫由浓度≥2mg/mL胶体金标记B动物抗重组UL51蛋白抗体IgG包被而成，所述硝基纤维膜上的对照线由浓度≥1mg/mL C动物抗B动物IgG包被而成；所述胶体金试纸的制备方法包括硝基纤维膜上测试线和对照线喷制、金标垫制备及胶体金免疫层析试纸条的组装；本试纸用于检测鸭瘟病毒抗原的检测灵敏度和特异性高，本制备方法操作简单实用，本运用首次将抗重组UL51蛋白抗体制备成胶体金试纸用于检测鸭瘟病毒抗原。
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公开(公告)号：CN102140519B
公开(公告)日：2013-06-05
申请号：CN201110026963.5
申请日：2011-01-25
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C12Q1/68
CPC分类号： Y02A50/451
摘要： 本发明涉及生物检测试剂盒及方法，特别涉及基于fimY基因的沙门氏菌检测试剂盒，含有以下特异性引物：其具有上游外引物F3如SEQIDNO.1所示，下游外引物B3如SEQIDNO.2所示，上游内引物FIP如SEQIDNO.3所示，下游内引物BIP如SEQIDNO.4所示，上游环引物LF如SEQIDNO.5所示，下游环引物LB如SEQIDNO.6所示；本试剂盒是基于环介导等温扩增技术而制备的，特异性强，灵敏性高，在无需昂贵的仪器即可简单快速的检测沙门氏菌，特别适合于基层医疗单位。
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公开(公告)号：CN102250792B
公开(公告)日：2013-03-06
申请号：CN201110163742.2
申请日：2011-06-17
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明涉及微生物领域，特别涉及鸭疫里默氏菌用培养基，所述培养基包括基础培养基和培养基添加剂两部分，所述基础培养基按千分比由以下成分组成：胰蛋白胨15~17‰，大豆胨4~7‰，酵母提取物4~6‰，NaCl5~6‰，琼脂15~20‰及余量的水；所述的含有培养基添加剂的培养基在分离或鉴定鸭疫里默氏菌中的应用；由于本发明的鸭疫里默氏菌培养基采用多种成分的基础培养基和添加抗凝剂的鸭全血作为添加物，可应用于鸭疫里默氏菌的常规分离鉴定以及商业化的BIOLOG鉴定系统，克服了配套专用培养基依赖于进口的缺点，同时在培养基制备过程中能减少杂菌污染，降低培养基成本。
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公开(公告)号：CN102417930A
公开(公告)日：2012-04-18
申请号：CN201110369359.2
申请日：2011-11-21
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明公开了一种基于环介导等温扩增技术的鸭疫里默氏杆菌的核酸检测方法。所述方法为：根据鸭疫里默氏杆菌gyrB基因设计特异性的引物序列，提取待测样品的DNA为模板，进行LAMP反应；对LAMP结果进行分析，若LAMP扩增结果为阳性，则待测样品含有鸭疫里默氏杆菌。本发明提供的针对鸭疫里默氏杆菌的检测方法，具有简便、快速、特异、灵敏和经济的优点，结果判断方法简便，适合于临床或者基层实验室使用，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN102417929A
公开(公告)日：2012-04-18
申请号：CN201110369345.0
申请日：2011-11-21
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌PCR检测方法，包括如下步骤：根据鸭疫里默氏杆菌基因组DNA序列中gyrB基因的保守序列SEQ ID NO：1设计扩增引物；提取样品DNA，PCR法扩增；凝胶电泳检测扩增产物，判断样品是否含有鸭疫里默氏杆菌；所述判断具体为：如果电泳结果出现相应的单一扩增条带，则说明样品中含有鸭疫里默氏杆菌；如果没有出现相应的单一扩增条带，则样品中不含该菌。采用本发明的检测方法检测鸭疫里默氏杆菌，检测时间短，成本底，检测结果特异，结果判定简单。
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公开(公告)号：CN102276748A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110217849.0
申请日：2011-08-01
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明涉及微生物领域，特别涉及鸭疫里默氏菌脂质A的提取方法，具体为：将鸭疫里默氏菌脂多糖溶解于pH值为4.2~4.6的SDS的乙酸溶液中，并充分溶解，得鸭疫里默氏菌脂多糖的SDS溶液，将其加热至100℃，分别用蒸馏水和酸化的乙醇洗涤去除SDS，在不低于2000g条件下离心不低于10分钟取沉淀，用体积分数为90~95%的乙醇溶液洗涤样品，在不低于2000g条件下离心不低于10分钟；重复不少于2次后，进行干燥，得鸭疫里默氏菌脂质A；本发明建立的鸭疫里默氏菌脂质A提取方法操作简单，所得鸭疫里默氏菌脂质A经鉴定纯度高，为药物及疫苗研发提供依据。
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公开(公告)号：CN102268480A
公开(公告)日：2011-12-07
申请号：CN201110202891.5
申请日：2011-07-20
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明公开了一种基于环介导等温扩增技术的肠出血性大肠杆菌的主要血清型O157核酸筛查方法。利用环介导等温扩增(LAMP)技术来进行，通过使用特异性引物，利用LAMP技术平台扩增靶基因的特定区域，在阳性和阴性对照和内对照检测体系的辅助下，从分子水平对肠出血性大肠杆菌的主要血清型O157进行核酸筛查。本发明的方法具有简便、经济、快速、灵敏和特异的特点，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN102250792A
公开(公告)日：2011-11-23
申请号：CN201110163742.2
申请日：2011-06-17
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明涉及微生物领域，特别涉及鸭疫里默氏菌用培养基，所述培养基包括基础培养基和培养基添加剂两部分，所述基础培养基按千分比由以下成分组成：胰蛋白胨15~17‰，大豆胨4~7‰，酵母提取物4~6‰，NaCl5~6‰，琼脂15~20‰及余量的水；所述的含有培养基添加剂的培养基在分离或鉴定鸭疫里默氏菌中的应用；由于本发明的鸭疫里默氏菌培养基采用多种成分的基础培养基和添加抗凝剂的鸭全血作为添加物，可应用于鸭疫里默氏菌的常规分离鉴定以及商业化的BIOLOG鉴定系统，克服了配套专用培养基依赖于进口的缺点，同时在培养基制备过程中能减少杂菌污染，降低培养基成本。
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公开(公告)号：CN102174087A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201110047060.5
申请日：2011-02-28
申请人： 四川农业大学实验动物工程技术中心
摘要： 本发明公开了一种用于检测鸭瘟病毒抗体的UL55重组原核表达蛋白及制备方法，该检测鸭瘟病毒抗体的重组原核表达蛋白由SEQ ID NO：2的氨基酸序列表定义；是SEQ ID NO：1核苷酸序列的原核表达产物。制备方法包括：(1)设计扩增DPV-UL55基因的特异性引物；(2)通过PCR扩增获得UL55基因片段；(3)对UL55基因进行克隆、测序鉴定；(4)将UL55基因定向亚克隆至pET32a原核表达载体；(5)UL55基因在大肠杆菌中的诱导表达；(6)UL55基因表达蛋白的纯化；(7)重组UL55蛋白的复性和检测。本产品可以作为检测鸭瘟病毒抗体的间接ELISA和Western Blot方法的检测抗原，也可以作为预防鸭瘟病毒感染的基因工程亚单位疫苗。
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