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公开(公告)号:CN110229234B
公开(公告)日:2022-09-27
申请号:CN201910485284.0
申请日:2019-06-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
Abstract: 本发明涉及具有免疫保护性的副猪嗜血杆菌融合蛋白CdtB‑OppA。经实验融合蛋白CdtB‑OppA免疫组的保护率为90%,要高于纯化蛋白CdtB+OppA免疫组的保护率80%。通过融合蛋白的形式,不仅有利于减少生产时的工艺复杂度和降低成本,并且免疫效果更好,可以单独或与其他蛋白一起作为联合疫苗。
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公开(公告)号:CN109970844B
公开(公告)日:2022-08-23
申请号:CN201910194597.0
申请日:2019-03-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/30 , C12N15/31 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种丝状支原体丝状亚种P35脂蛋白及其在诊断牛传染性胸膜肺炎中的应用。本发明通过筛选获得了一个免疫原性良好的Mmm脂蛋白,命名为P35,实验证明,rP35蛋白能够与CBPP阳性血清发生反应且与牛源性其他3种常见支原体感染样品血清不发生交叉反应,具有良好的特异性。此外,本发明还提出了一种用于诊断牛传染性胸膜肺炎的试剂盒,并建立了基于该试剂盒的ELISA检测方法,并对反应进行条件优化,确定了其cut off值。经过ELISA实验证明,本发明建立的ELISA检测方法具有良好的特异性、敏感性以及重复性,能够用于牛传染性胸膜肺炎高效、快速的诊断。本发明的提出为牛传染性胸膜肺炎的诊断提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN114686608A
公开(公告)日:2022-07-01
申请号:CN202011643292.2
申请日:2020-12-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明涉及基于CRISPR‑Cas12a的胸膜肺炎放线杆菌快速可视化检测方法。具体涉及试剂盒,其包含一对针对apxIV的特异性引物对SEQ ID NO:14和15、16和17、18和19、20和21,或26和27(优选SEQ ID NO:26和27),以及针对上述引物扩增的产物的序列为SEQ ID NO:3、5、6或8(优选SEQ ID NO:8)的gRNA,其用于快速可视化检测胸膜肺炎放线杆菌。本发明基于RPA及CRISPR/Cas12a系统的检测方法,利用Cas12a蛋白,根据App的特异性基因apxIV设计特异性重组酶聚合酶扩增(RPA)引物及CRISPR/Cas12a系统探针,以实现RPA特异性靶基因扩增,以及CRISPR/Cas12a系统对报告基因的切割,建立可用于检测猪胸膜肺炎放线杆菌的方法,并对RPA体系和CRISPR/Cas12a反应体系进行优化。该方法快速,可视,且特异性好,敏感度高,可用于临床检测。
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公开(公告)号:CN113913396B
公开(公告)日:2022-06-07
申请号:CN202111217661.6
申请日:2021-10-19
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种人工重组的H7N9流感病毒及制备方法和应用。本发明的人工重组的H7N9流感病毒具有高致病性禽流感病毒A/chicken/Yunnan/SD024/2021(H7N9)表面抗原血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因,但HA裂解位点氨基酸序列为‑PKGR‑,具有流感病毒A/PR/8/34(H1N1)的PB2,PB1,PA,NP,M和NS共6个内部基因,株号为H7‑Re4,保藏号为CCTCC NO:V202161。该毒株具有良好的鸡胚适应性,病毒生长滴度与野毒相比,可提高9倍以上;以此为疫苗株生产疫苗,可大大降低疫苗生产成本,提高疫苗质量。
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公开(公告)号:CN114487396A
公开(公告)日:2022-05-13
申请号:CN202111565323.1
申请日:2021-12-20
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/577 , G01N33/532 , G01N33/58 , C07K16/08 , C12N5/20
Abstract: 本发明公开了用于检测猪圆环病毒2型的红色乳胶微球免疫层析试纸条及其制备方法和应用。所述的试纸条包括PVC底板,以及在PVC底板上从左到右依次组装的结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,所述的结合垫上涂覆有红色乳胶微球偶联的抗猪圆环病毒2型单克隆抗体7C7,所述的硝酸纤维素膜上设有包被抗猪圆环病毒2型单克隆抗体9H4的检测线以及包被山羊抗鼠IgG的质控线。本发明中标记抗体和捕获抗体是挑选的最为广谱性的单抗,故对三种基因型的PCV2都具有较好的检测敏感性,与其他的病毒均无交叉反应。因此,本发明成功筛选出PCV2的广谱性单抗且成功建立了检测PCV2抗原的红色乳胶微球免疫层析试纸条,为后续的PCV2流行病学调查和净化提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN114437235A
公开(公告)日:2022-05-06
申请号:CN202210002017.5
申请日:2022-01-04
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种马链球菌马亚种8种蛋白的重组融合蛋白及其制备方法和应用。所述的重组融合蛋白是由马链球菌马亚种的cne、eag、SclC、SclI、SclF、eq5、eq8和ideE 8种蛋白依次以蛋白接头Gly‑Gly‑Gly连接后得到。其中,优选的,所述的重组融合蛋白命名为SE8,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。实验证明,本发明制备的重组融合蛋白SE8具有良好的抗原性和免疫原性,免疫小鼠能够有效诱导机体产生高水平的特异性抗体,并对S.equi感染小鼠起到保护作用。此外,该重组融合蛋白是通过大肠杆菌纯化制得的菌体蛋白,不含其它成分,具有较高的安全性,避免了感染发病的现象。
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公开(公告)号:CN114392345A
公开(公告)日:2022-04-26
申请号:CN202111170846.6
申请日:2021-10-08
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: E199L蛋白在促进细胞凋亡中的用途及方法。本发明提供一种E199L促进细胞凋亡的用途,E199L通过与BCL‑XL、MCL‑1、BCL‑W、BCL‑2A1等抗凋亡蛋白的广泛的相互作用,竞争性地破坏抗凋亡蛋白与BAK和/或BAX的相互作用,最终诱导细胞凋亡。
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公开(公告)号:CN113355291B
公开(公告)日:2022-04-15
申请号:CN202110699407.8
申请日:2021-06-23
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/12 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种抗丝状支原体丝状亚种(Mycoplasma mycoide subsp.mycoides,Mmm)P0071蛋白的单克隆抗体及其应用,还公开了分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其制备方法。所述的单克隆抗体是由保藏编号为CGMCC No:22309的杂交瘤细胞株3C4A1分泌产生。实验证明,该杂交瘤细胞株3C4A1分泌的抗体能与Mmm发生抗原抗体反应,而与山羊支原体山羊肺炎亚种、牛鼻支原体、无乳支原体和牛支原体等其他支原体病原不发生反应,具有很高的特异性。本发明的单克隆抗体可用于制备丝状支原体丝状亚种抗原检测和抗体检测试剂盒,也可以用于丝状支原体丝状亚种的免疫学分析,为建立快速准确的牛传染性胸膜肺炎检测和诊断试剂盒开发提供了物质基础。
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公开(公告)号:CN109295006B
公开(公告)日:2022-03-29
申请号:CN201811126938.2
申请日:2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体3A10的杂交瘤细胞系及其应用。本发明用口蹄疫非结构蛋白为抗原免疫鼠通过细胞融合技术筛选最终筛选获得一株微生物保藏编号为CGMCC NO.16213的稳定分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单抗的杂交瘤细胞系,其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强,与血清竞争性强,可作为阻断ELISA检测方法中的检测抗体准确区分口蹄疫自然感染动物与免疫接种动物。本发明还提供了采用该单抗为检测抗体建立的阻断ELISA检测试剂盒,采用该一种该检测试剂盒即可检测任何动物种属的血清,跨越了种间屏障,具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号:CN113406065B
公开(公告)日:2022-03-25
申请号:CN202110676027.2
申请日:2021-06-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明涉及一种非洲猪瘟血清抗体IPMA检测试剂及其制备方法,所述检测试剂中非洲猪瘟病毒选择非洲猪瘟减毒株(HLJ/18‑7GD),感染细胞选择PK15细胞作为非洲猪瘟减毒株(HLJ/18‑7GD)的接种细胞。检测用抗原是感染细胞的全病毒,检测出的抗体能够较真实地体现抗体本身或接近抗体本身的血清反应,在非洲猪瘟缺乏针对所有毒株有效中和抗体的条件下,IPMA具备成为ASF血清学检测“金标准”的潜在价值。本发明的IPMA检测试剂在检测的敏感性上高于ELISA,特异性和检测时间上与ELISA检测相当,但对仪器设备要求较低,只需借助普通光学显微镜进行观察和判定,同时,IPMA检测结果可长期保存,便于后期实验结果整理与档案调取。
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