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公开(公告)号:CN103033472A
公开(公告)日:2013-04-10
申请号:CN201210548508.6
申请日:2012-12-18
申请人: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号: G01N21/00
摘要: 一种基于采样一致性的烤烟种期形态分类表征方法,其特征在于:包括下述步骤:①选择烟株100株,依次编号挂牌,烤烟种期不同阶段的形态分类表征采集样品所需烟株从挂牌烟株中选取;②结合烤烟种期传统划分,粗略表征;③量化分类表征:依据烟株蕾、花、果存在的不同比例进行量化分类表征,将烤烟种期划分为6个阶段,④烤烟种期不同阶段烟株样品的采样只选取符合各时期量化分类范围内的烟株进行采样,以满足采样一致性的要求。与现有分类方法比较,本发明采用最直观的花蕾、花和果的不同比例,量化烤烟种期客观存在的形态特征,分类准确规范,易于操作,有利于采集到一致的烤烟种期样品,从而能更好进行生物学分析测定,更准确反映样品的真实信息。
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公开(公告)号:CN102140546B
公开(公告)日:2012-12-05
申请号:CN201110067006.7
申请日:2011-03-20
申请人: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要: 一步法复合检测烟草普通花叶病毒与马铃薯Y病毒的方法,其特征是:该方法包括甄别比对病毒基因组中保守区域,人工筛选合成适用于两种病毒病复合RT-PCR特异性引物;分析获得TMV、PVY复合侵染烟叶样本,整合反转录和PCR反应所需酶和缓冲液,通过反应条件优化,建立基于一步法RT-PCR复合检测烟叶感染TMV、PVY的方法。其优点为:1、使TMV、PVY病原的检测更简便,减少了试验污染和反应中的影响因素,检测时间大大缩短。2、提供的TMV、PVY特异性引物,具有非常高的病毒病原特异性,能够有效单一或复合识别TMV、PVY,保证检测结果的准确性。3、使用起来省时、省力,对样品材料要求不高、受实验条件的限制少。
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公开(公告)号:CN102140546A
公开(公告)日:2011-08-03
申请号:CN201110067006.7
申请日:2011-03-20
申请人: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要: 一步法复合检测烟草普通花叶病毒与马铃薯Y病毒的方法,其特征是:该方法包括甄别比对病毒基因组中保守区域,人工筛选合成适用于两种病毒病复合RT-PCR特异性引物;分析获得TMV、PVY复合侵染烟叶样本,整合反转录和PCR反应所需酶和缓冲液,通过反应条件优化,建立基于一步法RT-PCR复合检测烟叶感染TMV、PVY的方法。其优点为:1、使TMV、PVY病原的检测更简便,减少了试验污染和反应中的影响因素,检测时间大大缩短。2、提供的TMV、PVY特异性引物,具有非常高的病毒病原特异性,能够有效单一或复合识别TMV、PVY,保证检测结果的准确性。3、使用起来省时、省力,对样品材料要求不高、受实验条件的限制少。
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公开(公告)号:CN101871858A
公开(公告)日:2010-10-27
申请号:CN201010204524.4
申请日:2010-06-22
申请人: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号: G01N1/28 , G01N1/30 , G01N27/447
摘要: 一种SDS-PAGE快速脱色方法及其脱色杯,其方法包括以下步骤:1)凝胶清洗:电泳凝胶染色结束后,用去离子水等将胶清洗2-3遍;2)预脱色:将凝胶放入盛有上述水的脱色杯中,加热达到80℃左右时,将脱色杯中水放出,该过程重复2次;3)脱色:向脱色杯中加入足量上述水,加热至80℃时后换水,再加热,如此反复循环,直到背景干净、条带清晰,脱色完成。本发明优点是:1、以去离子水等取代传统的甲醇-冰醋酸溶液作为脱色液,成本低廉,无环境污染。2、配合专用脱色装置利用加热方法在30-40分钟内完成整个脱色过程,方便快捷,加快试验进度。3、操作简单,本方法无需配制特殊脱色液,只需利用实验室现有加热设备,采用本专业脱色装置,就可以非常方便的进行脱色试验。
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公开(公告)号:CN101717431A
公开(公告)日:2010-06-02
申请号:CN200910227668.9
申请日:2009-12-28
申请人: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要: 一种菠菜蛋白提取物,其特征在于:将菠菜叶片粉碎,然后在磷酸盐缓冲液中浸提,离心后得蛋白粗提液;加入固体硫酸铵,两次盐析,透析除盐,得菠菜盐析蛋白组分;再通过强阳离子交换层析分离获得菠菜活性蛋白组分。本发明的菠菜蛋白提取物在防治烟草花叶病上的应用:可有效防治烟草花叶病毒病。本发明与现有烟草花叶病毒病的防治方法相比,其优点为:(1)菠菜蛋白提取物属于天然植物提取物,基本对人畜和环境无害,具有高效、低毒、无残留的特点。(2)菠菜蛋白提取物对TMV有较强的抗病毒活性,对TMV的抑制效率达到90%以上。(3)菠菜蛋白提取物可有效用于烟草育苗阶段、移栽期、团颗期及旺长期的烟草花叶病毒病的预防与控制。
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公开(公告)号:CN118652913A
公开(公告)日:2024-09-17
申请号:CN202410821394.0
申请日:2024-06-24
申请人: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要: 本发明公开NtPPO7基因在调控烟草叶片绿原酸含量和烟草品种培育中的应用,属于植物基因工程技术领域。本发明以普通烟草不同时期叶片的cDNA为模板,利用PCR技术,克隆获得了烟草多酚氧化酶的同源基因,命名为NtPPO7。通过对NtPPO7基因的克隆和表达载体的构建与分析发现,在烟草植株中过表达该基因能显著降低成熟期烟草叶片中绿原酸的含量,这说明NtPPO7基因在烟草叶片成熟期绿原酸调控中具有重要的作用。本发明丰富了烟草多酚氧化酶基因家族,为深入研究烟草中多酚氧化酶基因家族奠定基础。同时,为阐明烟草叶片中绿原酸生物合成的分子调控机制奠定基础,为烟草叶片绿原酸含量调控提供新的精准调控基因。
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公开(公告)号:CN118222744A
公开(公告)日:2024-06-21
申请号:CN202410171056.7
申请日:2024-02-06
申请人: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号: C12Q1/6895 , C12Q1/6869 , C12N15/11
摘要: 本发明公开了一种SNP分子标记组合在烟草品种鉴定中的应用和烟草品种鉴定的检测试剂盒,属于分子标记和烟草品种鉴定技术领域。所述SNP分子标记组合由3个SNP分子标记组成;所述SNP分子标记1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,5’端起第409位碱基为A或C;所述SNP分子标记2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,5’端起第371位碱基为G或A;所述SNP分子标记3的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,5’端起第225位碱基为A或G。使用本发明的分子标记组合即可有效地区分鉴定烟草品种,有望为相关烟草品种的种质资源保护与利用、卷烟原料鉴定以及遗传进化研究等需求提供技术手段。
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公开(公告)号:CN117757819A
公开(公告)日:2024-03-26
申请号:CN202311802006.6
申请日:2023-12-25
申请人: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要: 本发明公开了烟草多酚氧化酶NtPPO5及其编码基因、重组表达载体和应用。本发明的烟草多酚氧化酶编码基因NtPPO5,其核苷酸序列为:(1)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列;或(2)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经取代和/或缺失和/或添加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白的核苷酸序列。经检测发现,过表达NtPPO5基因,可以显著增加烟草植株中多酚氧化酶的活性;而且过表达NtPPO5基因的烟草植株节距增加、总叶片和花蕾数减少,能有效改善烟草植株的株型;另外过表达NtPPO5基因在烟叶成熟期能降低多酚类物质绿原酸和芦丁含量。
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公开(公告)号:CN115807003A
公开(公告)日:2023-03-17
申请号:CN202211021367.2
申请日:2022-08-24
申请人: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/82
摘要: 本申请属于烟草基因工程技术领域,具体涉及一个烟草NtERF4基因及其在总黄酮与绿原酸合成调控中应用。发明人克隆获得了一个可以促进烟草总黄酮与绿原酸合成的转录因子基因NtERF4。对其结构进行分析后,其属于ERF类转录因子(一类乙烯转录因子)中的AP2亚族。该基因表达量与烟叶中总黄酮及绿原酸含量呈现正相关关系,即,通过超表达该基因,可以提高烟叶中总黄酮及绿原酸含量,而通过基因沉默方式降低该基因表达量后,可以降低烟叶中总黄酮及绿原酸含量。同时,相关基因表达模式研究结果表明,NtERF4转录因子对烟草叶片总黄酮与绿原酸合成调节,是通过NtPAL、NtGST和NtGT基因调节通路来实现的。
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公开(公告)号:CN110951758B
公开(公告)日:2022-12-27
申请号:CN201911345952.6
申请日:2019-12-24
申请人: 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要: 本发明属于植物生物工程技术领域,具体涉及一种叶绿体中表达紫杉二烯的重组载体pLD‑TS。该载体制备步骤包括:紫杉二烯合成酶基因TS基因获得、载体构建、转化验证等步骤。该载体在烟草叶绿体中,以烟草叶绿体基因组上trnI和trnA为左右同源序列,利用Prrn启动子调控筛选标记aadA基因,同时利用psbA基因的启动子和5’UTR调控紫杉二烯合成酶基因TS的表达。发明人利用烟草作为异源宿主,借助基因工程手段对紫杉二烯合成途径进行了重构。初步实验结果表明,本申请在烟草叶绿体中高效表达异源合成了紫杉二烯,烟草转化株叶片中紫杉二烯的含量最高可达127.69μg/g,表现出较好的应用前景。
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