公开(公告)号：CN102936235B

公开(公告)日：2014-04-16

申请号：CN201210441022.2

申请日：2012-11-07

Applicant: 浙江大学

Inventor： 王凤芹 ,  杨航仙 ,  汪以真

IPC: C07D307/33 ,  G01N30/02

Abstract: 本发明公开了葡萄糖醛酸缩硫醇-乙酸酯衍生物及其制备方法和应用。取8g/mL的葡萄糖醛酸0.5mL于水解管中，55℃水浴加热，氮气吹干；然后加入乙硫醇2mL和三氟乙酸1mL，25℃水浴磁力搅拌25分钟，55℃水浴加热，氮气吹干；然后加入醋酐2mL和吡啶2mL，55℃水浴，磁力搅拌5小时，得到葡萄糖醛酸缩硫醇-乙酸酯衍生物。取岩藻糖、葡萄糖、木糖、半乳糖及葡萄糖醛酸应用以上方法直接进入气相色谱-质谱联用分析得到岩藻糖、葡萄糖、木糖、半乳糖及葡萄糖醛酸的含量。本发明得到了葡萄糖醛酸缩硫醇-乙酸酯衍生物；对糖醛酸含量的测定避免了使用对水分十分敏感的硅醚化试剂，能够有效提高样品检测的可操作性和准确性；能够同时检测中性糖和酸性糖。

公开(公告)号：CN102936235A

公开(公告)日：2013-02-20

申请号：CN201210441022.2

申请日：2012-11-07

Applicant: 浙江大学

Inventor： 王凤芹 ,  杨航仙 ,  汪以真

IPC: C07D307/33 ,  G01N30/02

Abstract: 本发明公开了葡萄糖醛酸缩硫醇-乙酸酯衍生物及其制备方法和应用。取8g/mL的葡萄糖醛酸0.5mL于水解管中，55℃水浴加热，氮气吹干；然后加入乙硫醇2mL和三氟乙酸1mL，25℃水浴磁力搅拌25分钟，55℃水浴加热，氮气吹干；然后加入醋酐2mL和吡啶2mL，55℃水浴，磁力搅拌5小时，得到葡萄糖醛酸缩硫醇-乙酸酯衍生物。取岩藻糖、葡萄糖、木糖、半乳糖及葡萄糖醛酸应用以上方法直接进入气相色谱-质谱联用分析得到岩藻糖、葡萄糖、木糖、半乳糖及葡萄糖醛酸的含量。本发明得到了葡萄糖醛酸缩硫醇-乙酸酯衍生物；对糖醛酸含量的测定避免了使用对水分十分敏感的硅醚化试剂，能够有效提高样品检测的可操作性和准确性；能够同时检测中性糖和酸性糖。

公开(公告)号：CN120040606A

公开(公告)日：2025-05-27

申请号：CN202411230979.1

申请日：2024-09-04

Applicant: 浙江大学 ,  泰和傲昕乌鸡发展有限公司 ,  泰和县泰和乌鸡产业发展中心

Inventor： 汪以真 ,  开丽霞 ,  路则庆 ,  李文涛 ,  沈雨甜 ,  杜华华 ,  王凤芹 ,  冯杰 ,  范玉庆 ,  吴有平

IPC: C08B37/00 ,  A23K20/163 ,  A23K50/75

Abstract: 本发明公开了一种黄芪多糖及其制备方法和在泰和乌鸡上的应用。所述黄芪多糖为均一多糖PAPS,由甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成，摩尔百分比分别为0.17%：0.34%：0.44%：0.42%：98.54%：0.02%：0.07%，由糖苷键连接，所述糖苷键型包括 t‑Glc(p)、3‑Glc(p)、4‑Man(p)、6‑Glc(p)、4‑Glc(p)、3,4‑Glc(p)、2,4‑Glc(p)和4,6‑Glc(p)，其中4‑Glc(p)占比最大；所述多糖数均分子量Mn为3487Da,重均分子量Mw为26369 Da，峰分子量为13864Da。所述均一多糖的制备方法，包括多糖提取、脱蛋白、透析和冻干。本发明还提供了该其粗多糖APS在泰和乌鸡上的应用。本发明所述的均一多糖PAPS，化学组成清晰，同时其粗多糖APS可提高泰和乌鸡生长性能、免疫功能并调节泰和乌鸡肠道微生物。

公开(公告)号：CN118126868B

公开(公告)日：2024-08-06

申请号：CN202410104056.5

申请日：2024-01-25

Applicant: 浙江大学

Inventor： 单体中 ,  涂羽昂 ,  刘事奇 ,  汪以真 ,  王凤芹

IPC: C12N1/20 ,  A23L5/20 ,  A23L33/135 ,  A23K10/18 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明提供了一株枯草芽孢杆菌ZMF7‑2，该菌株保藏于武汉的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO：M 20232186。本发明提供的枯草芽孢杆菌ZMF7‑2在短时间内具有优异的呕吐毒素，黄曲霉毒素和玉米赤霉烯酮降解效果。ZMF7‑2处理48h后对浓度为20μg/mL的DON、AFB1和ZEN降解率分别为99.92％、90.69％、87.15％；对胆固醇的降解率达到88.73％。并且，在pH＝2、3、4的培养基中存活率达到38.58％、76.59％、80.52％；在含有0.1％、0.3％、0.5％牛胆盐的培养基中存活率达到127.53％、88.30％、71.20％。

公开(公告)号：CN118126868A

公开(公告)日：2024-06-04

申请号：CN202410104056.5

申请日：2024-01-25

Applicant: 浙江大学

Inventor： 单体中 ,  涂羽昂 ,  刘事奇 ,  汪以真 ,  王凤芹

IPC: C12N1/20 ,  A23L5/20 ,  A23L33/135 ,  A23K10/18 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明提供了一株枯草芽孢杆菌ZMF7‑2，该菌株保藏于武汉的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO：M 20232186。本发明提供的枯草芽孢杆菌ZMF7‑2在短时间内具有优异的呕吐毒素，黄曲霉毒素和玉米赤霉烯酮降解效果。ZMF7‑2处理48h后对浓度为20μg/mL的DON、AFB1和ZEN降解率分别为99.92％、90.69％、87.15％；对胆固醇的降解率达到88.73％。并且，在pH＝2、3、4的培养基中存活率达到38.58％、76.59％、80.52％；在含有0.1％、0.3％、0.5％牛胆盐的培养基中存活率达到127.53％、88.30％、71.20％。

公开(公告)号：CN113308397B

公开(公告)日：2022-05-13

申请号：CN202110548346.5

申请日：2021-05-19

Applicant: 浙江大学

Inventor： 汪以真 ,  姜子鹏 ,  李文涛 ,  文超越 ,  苏维发 ,  路则庆 ,  靳明亮 ,  王凤芹

IPC: C12N1/20 ,  C12N1/02 ,  A61K35/742 ,  A61P31/04 ,  C12R1/07

Abstract: 本发明公开了一种抑制产气荚膜梭菌的益生菌及其筛选方法与应用。所述益生菌为解淀粉芽孢杆菌BA40,保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:M2021535。其中益生菌筛选的来源为猪源肠道内容物以及粪便样品。益生菌菌株通过双层琼脂法、琼脂扩散实验进行初筛，再通过耐酸、耐胆盐、耐胰酶等实验得到两株对产气荚膜梭菌有显著抑制能力的益生菌：解淀粉芽孢杆菌BA40。利用该菌株进行预防小鼠产气荚膜梭菌的感染的动物实验，可以显著改善产气荚膜梭菌感染所引发的体重下降、肠道形态损伤、肠道炎症反应等问题，同时益生菌处理组提高小鼠血清中的IgA、IgG含量，显著改善小鼠肠道菌群结构，降低小鼠腹泻率，为替代抗生素的使用提供了一条新的途径。

公开(公告)号：CN111855847B

公开(公告)日：2022-05-13

申请号：CN202010653368.3

申请日：2020-07-08

Applicant: 浙江大学

Inventor： 王凤芹 ,  汪以真 ,  曹进平 ,  路则庆 ,  程远之

IPC: G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/36 ,  G01N30/74 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种高效液相色谱法测定富硒蛋白多糖中总硒含量的方法。该方法以2,3—二氨基萘为螯合剂，以400µL乙腈为分散剂，120µL氯苯为萃取剂，硒（IV）与2,3—二氨基萘的螯合物（4,5‑苯并苤硒脑）经乙腈稀释后直接采用PFP色谱柱分离，乙腈洗脱，用荧光检测器在激发波长为376 nm、发射波长为520 nm条件下测定荧光强度，外标法定量。本方法具有实验结果稳定、样品转移少、试剂用量少、回收率高等特点。

公开(公告)号：CN112630316B

公开(公告)日：2022-04-12

申请号：CN202011308803.5

申请日：2020-11-19

Applicant: 浙江大学

Inventor： 王凤芹 ,  曹进平 ,  汪以真 ,  路则庆 ,  程远之

IPC: G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/34 ,  G01N30/36 ,  G01N30/72 ,  G01N30/86

Abstract: 本发明公开一种基于HPLC‑ICP‑MS分析富硒蛋白多糖硒形态的方法。富硒蛋白多糖中加入蛋白酶K和Tris‑HCl缓冲液，37℃恒温酶解18小时，并应用高效液相色谱电感耦合等离子体质谱（HPLC‑ICP‑MS）分析酶解上清液中的硒化合物：亚硒酸钠（Na2SeO3）、硒代胱氨酸（SeCys2）、硒甲基硒代半胱氨酸（SeMeCys）和硒代蛋氨酸（SeMet）。本发明方法酶解仅获得4种硒化合物，与标准品高度匹配，定量准确；回收率在78.35%~111.42%之间，该方法回收率高、条件温和、稳定性好。

公开(公告)号：CN113621648A

公开(公告)日：2021-11-09

申请号：CN202111002489.2

申请日：2021-08-30

Applicant: 浙江大学

Inventor： 汪以真 ,  程远之 ,  杜满 ,  肖肖 ,  靳明亮 ,  宗鑫 ,  王凤芹 ,  路则庆

IPC: C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N15/53 ,  C12N15/12 ,  C12Q1/66 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种pBD1基因荧光报告肠上皮细胞系的构建方法及其应用。仔猪小肠样品分离得到基因组DNA，并利用PCR技术扩增pBD1启动子片段，序列如SEQ ID NO.1所示，将pBD1启动子片段克隆到pGL4.21荧光报告载体中得到pBD1荧光报告质粒，进行酶切线性化后转染猪肠上皮细胞，从而筛选获得阳性细胞系。本发明提供的筛选细胞系的应用，一次可最多检测数十种营养物质对pBD1基因的调控作用，本发明所公开的方法创新性地利用酶切线性化质粒载体转染细胞，构建了一种可长期稳定表达pBD1基因的筛选细胞系，极大地提高了营养物质的筛选效率，可克服现有方法中细胞因生长状态、不同检测方法等因素造成的干扰，有利于开发具有pBD1基因调控功能的营养物质及其后续应用生产。

公开(公告)号：CN113583956A

公开(公告)日：2021-11-02

申请号：CN202110853165.3

申请日：2021-07-27

Applicant: 浙江大学

Inventor： 汪以真 ,  程远之 ,  肖肖 ,  宗鑫 ,  王凤芹 ,  路则庆 ,  靳明亮

IPC: C12N5/0786 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了一种细胞焦亡模型的构建方法及其应用。细胞焦亡模型的构建方法，包括以下步骤：1）病原菌活化；2）活化的病原菌处理细胞；3）细胞样品收集与构建效果检测；所述的病原菌为大肠杆菌K88，处理细胞所用的浓度为OD600=0.4~0.6，含活菌数为1~3×107CFU/mL，处理细胞2小时后加入终浓度为2 mM的三甲基腺苷ATP，处理时间共计2.5小时；所述的细胞为鼠源单核巨噬细胞J774A.1。应用到小鼠，包括1）大肠杆菌K88活化；2）活化菌液灌胃小鼠；3）小鼠样品收集与构建效果检测。本发明贴近实际生产，效果与LPS相当，且极大地降低了使用成本。本发明为后续探究细胞焦亡在机体抵御病原菌感染过程中发挥的作用及其机制提供了依据，并为治疗常见的病原菌感染奠定了基础。